本文關(guān)鍵詞：瑞舒伐他汀對(duì)UUO大鼠模型LPA1受體、RhoA、CTGF及Ⅲ型膠原表達(dá)的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:腎間質(zhì)纖維化是慢性腎臟病(Chronic Kidney Disease,CKD)的最終表現(xiàn),使慢性腎臟病不可避免的進(jìn)展至終末期腎病(End Stage Renal Disease,ESRD),其治療包括血液凈化和腎移植治療。腎間質(zhì)纖維化以腎小管間質(zhì)纖維化和腎小球硬化為主要表現(xiàn),分子學(xué)機(jī)制表現(xiàn)為:細(xì)胞外基質(zhì)的過度沉積(Extracellular Matrix,ECM),而病理學(xué)則往往表現(xiàn)為細(xì)胞的激活,例如:上皮細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化、纖維母細(xì)胞、纖維細(xì)胞、肌成纖維細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞的浸潤等;細(xì)胞凋亡和信號(hào)分子的激活,例如:轉(zhuǎn)化生長因子-β、血管緊張素-Ⅱ等。3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMG-Co A reductase)作為膽固醇合成過程中的限速酶,在膽固醇合成過程中起關(guān)鍵作用,其抑制劑即他汀類藥物是治療血脂異常的經(jīng)典藥物。他汀類藥物普遍應(yīng)用于心腦血管疾病,但是它的多效性還體現(xiàn)在抗炎癥細(xì)胞浸潤、抗氧化應(yīng)激、減輕細(xì)胞外基質(zhì)沉積等,具有腎臟保護(hù)作用。有關(guān)研究顯示:腎間質(zhì)纖維化過程中溶血磷脂酸受體-1(Lysophosphatidic Acid Receptor-1,LPA1R)表達(dá)增加,從而誘導(dǎo)結(jié)締組織生長因子(Connective Tissue Growth Factor,CTGF)和Ⅲ型膠原(Collagen TypeⅢ)的表達(dá)增加,此過程通過多種信號(hào)通路來調(diào)節(jié),是否通過小G蛋白R(shí)ho A來調(diào)控研究尚少,他汀類藥物可通過其異戊二烯化作用降低Rho A蛋白的表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菙M通過瑞舒伐他汀的干預(yù),觀察其對(duì)LPA1受體、Rho A、CTGF及Ⅲ型膠原在單側(cè)輸尿管梗阻模型所致的腎間質(zhì)纖維化大鼠中表達(dá)的影響,研究LPA1受體是否是通過小G蛋白R(shí)ho A進(jìn)行調(diào)控,探討瑞舒伐他汀減輕、延緩腎間質(zhì)纖維化,腎臟保護(hù)作用的可能機(jī)制,為延緩慢性腎臟病的進(jìn)展提供新的治療靶點(diǎn)。方法:將54只SPF級(jí)雄性SD大鼠(體重180g±20g)編號(hào)后按照隨機(jī)原則分為三組:正常對(duì)照組(A組)18只,模型組(單側(cè)輸尿管結(jié)扎組,B組)18只,治療組(瑞舒伐他汀干預(yù)組,C組)18只。適應(yīng)性喂養(yǎng)7天后建立單側(cè)輸尿管梗阻模型,各組大鼠于術(shù)前12小時(shí)開始禁食水。手術(shù)過程如下:每組大鼠均以10%水合氯醛(0.3ml/100g)腹腔注射+2%鹽酸利多卡因皮下浸潤麻醉。備皮消毒鋪單后,觸診腎臟,給予左側(cè)腹部縱形切口,逐層分離組織層及肌肉層,暴露左腎,并沿左腎下極找到左輸尿管,在輸尿管中上1/3處用4—0號(hào)線上下結(jié)扎并從中剪斷輸尿管,以防逆行性感染,逐層縫合至皮膚。A組大鼠除不結(jié)扎和剪斷輸尿管外,其他手術(shù)過程與其余兩組相同。C組給予瑞舒伐他汀混懸液10mg/(Kg·d)灌胃;對(duì)照組及模型組每日給予等容積的0.9%氯化鈉注射液灌胃;三組大鼠均于造模前1天開始灌胃。單側(cè)輸尿管梗阻(unilateral ureteral occlusion,UUO)術(shù)后分別于3、7、14天取6只大鼠處死,留取左腎標(biāo)本置于4%多聚甲醛固定液中固定并編號(hào),經(jīng)梯度酒精逐級(jí)脫水,二甲苯透明,石蠟包埋,制成3um切片,烘干,然后用HE、Masson染色法染色后,于光鏡下觀察大鼠腎臟組織病理改變及腎間質(zhì)纖維化程度;應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測(cè)LPA1受體、Rho A、CTGF及Ⅲ型膠原在腎臟中的表達(dá),對(duì)結(jié)果進(jìn)行半定量分析。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)表示統(tǒng)計(jì)結(jié)果,應(yīng)用單因素方差分析對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,P0.05表示結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1腎組織病理形態(tài)學(xué)觀察光鏡下HE染色:A組,腎小球和腎小管及間質(zhì)未見明顯異常;B組,術(shù)后第3天,可觀察到少量炎癥細(xì)胞在腎間質(zhì)局部浸潤,腎小管有輕度擴(kuò)張;第7天,可觀察到大量炎癥細(xì)胞浸潤于腎間質(zhì)區(qū)域,腎間質(zhì)寬度明顯增加,腎小管明顯擴(kuò)張,上皮細(xì)胞變性、壞死;第14天,可見較多腎小管萎縮,腎小管基底膜有彌漫性增厚、皺縮;C組,術(shù)后腎小管間質(zhì)病變隨梗阻時(shí)間延長進(jìn)行性加重,和同時(shí)相B組相比,病變程度有所減輕,但仍明顯重于A組。光鏡下Masson染色:A組,未見明顯異常;B組,術(shù)后第3天可觀察到腎小管輕度擴(kuò)張,腎間質(zhì)區(qū)域可見少量藍(lán)色膠原纖維沉積,與A組相比有所增加;術(shù)后第7天及第14天,腎小管擴(kuò)張程度進(jìn)行性加重,膠原纖維沉積顯著增多,間質(zhì)纖維化現(xiàn)象明顯;C組,術(shù)后腎小管擴(kuò)張程度、膠原纖維表達(dá)水平隨梗阻時(shí)間延長進(jìn)行性加重、增多,雖較同時(shí)相B組的病變程度稍輕,但仍明顯重于A組。2腎組織中LPA1受體、Rho A、CTGF及Col-Ⅲ免疫組織化學(xué)染色LPA1受體:A組,腎小管上皮細(xì)胞、系膜細(xì)胞微量表達(dá);B組,腎小管上皮細(xì)胞及腎間質(zhì)大量表達(dá),且隨梗阻時(shí)間的延長表達(dá)量增加,較同時(shí)相A組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均0.05);C組,腎小管上皮細(xì)胞及腎間質(zhì)大量表達(dá),隨梗阻時(shí)間的延長進(jìn)行性加重,較同時(shí)相A組表達(dá)增加,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均0.05),但B、C兩組間表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均0.05)。Rho A:A組,腎小管上皮細(xì)胞輕微表達(dá),為基礎(chǔ)水平的表達(dá),腎小球無明顯表達(dá);B組,隨著梗阻時(shí)間的延長,腎小管上皮細(xì)胞及腎間質(zhì)表達(dá)增加,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均0.05),較A組同時(shí)相表達(dá)增加,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均0.05);C組,隨著梗阻時(shí)間延長表達(dá)增加,術(shù)后3、7、14天相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均0.05),與同時(shí)相B組相比術(shù)后3天和術(shù)后7天無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),較術(shù)后14天有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),較同時(shí)相A組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均0.05)。CTGF:A組,腎小球無明顯表達(dá),在腎小管上皮細(xì)胞輕微表達(dá);B組,術(shù)后3、7、14天較A組同時(shí)相表達(dá)均增加(P均0.05),術(shù)后7天較術(shù)后3天表達(dá)增加有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),術(shù)后14天表達(dá)進(jìn)一步增加(P0.05);C組,隨梗阻時(shí)間的延長,其表達(dá)增加有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均0.05),與同時(shí)相B組相比表達(dá)下降,與A組相比表達(dá)增加(P均0.05)。Col-Ⅲ:A組,腎小管上皮細(xì)胞輕微表達(dá),為基礎(chǔ)水平的表達(dá),腎小球無明顯表達(dá);B組,隨著梗阻時(shí)間的延長,腎小管上皮細(xì)胞及腎間質(zhì)表達(dá)增加,但術(shù)后3天及術(shù)后7天表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),較術(shù)后14天分別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均0.05),較A組同時(shí)相表達(dá)增加,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均0.05);C組,隨著梗阻時(shí)間延長表達(dá)增加,但術(shù)后3天和術(shù)后7天無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),分別較術(shù)后14天有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均0.05),較同時(shí)相A組和B組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均0.05)。結(jié)論:LPA1受體、Rho A、CTGF和Col-Ⅲ在梗阻側(cè)腎臟表達(dá)增加,且具有時(shí)間依賴性。瑞舒伐他汀通過下調(diào)Rho A的表達(dá),減輕CTGF和Ⅲ型膠原在腎臟的表達(dá),從而可能起到延緩及減輕腎間質(zhì)纖維化的作用。瑞舒伐他汀減輕腎間質(zhì)纖維化的作用機(jī)制之一可能是通過下調(diào)Rho A,抑制其異戊二烯化作用保護(hù)腎臟功能。
【關(guān)鍵詞】：瑞舒伐他汀 腎間質(zhì)纖維化 RhoA 溶血磷脂酸受體-1 結(jié)締組織生長因子 Ⅲ型膠原
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R965
【目錄】：

• 摘要4-8
• ABSTRACT8-13
• 英文縮寫13-14
• 前言14-15
• 材料與方法15-19
• 結(jié)果19-22
• 附圖22-46
• 附表46-49
• 討論49-54
• 結(jié)論54
• 參考文獻(xiàn)54-59
• 綜述 HMG-CoA還原酶抑制劑抗腎間質(zhì)纖維化的作用機(jī)制59-66
• 參考文獻(xiàn)63-66
• 致謝66-67
• 個(gè)人簡歷67

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 王洪濤;周建華;;小G蛋白R(shí)ho與腎間質(zhì)纖維化[J];國際內(nèi)科學(xué)雜志;2009年07期

2 盧思廣;劉健勝;于艷輝;;腎小管間質(zhì)纖維化發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2011年17期

3 李慶憲;查文菁;;他汀類藥物非調(diào)脂作用的研究新進(jìn)展[J];中國醫(yī)院藥學(xué)雜志;2009年17期

4 梁艷;王皓;楊再興;仲人前;;上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在纖維化疾病中的研究進(jìn)展[J];中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué);2013年08期

  本文關(guān)鍵詞：瑞舒伐他汀對(duì)UUO大鼠模型LPA1受體、RhoA、CTGF及Ⅲ型膠原表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：267071