【摘要】：背景和目的皮膚損傷后愈合方式包括再生修復(fù)(完全愈合)和瘢痕增生(不完全愈合)。創(chuàng)面愈合是一個復(fù)雜有序的過程,有多種細胞、細胞因子、膠原及信號分子均參與這一過程,并對創(chuàng)傷后炎性反應(yīng)、細胞增殖、結(jié)締組織形成、創(chuàng)面收縮和重新塑造等起重要作用。瘢痕形成不僅影響外觀,而且常常導(dǎo)致功能障礙,如關(guān)節(jié)部位,嚴重者可導(dǎo)致器官功能部分喪失或全部喪失。Ⅳ型及Ⅵ型膠原作為細胞外基質(zhì)的主要組成分,在創(chuàng)面愈合中發(fā)揮重要作用。Ⅳ型對創(chuàng)面愈合具有雙重作用：一方面,參與基底膜的形成,使表皮與乳頭真皮層粘附促進創(chuàng)面愈合；另一方面,可抑制血管內(nèi)皮細胞粘附于血管基底膜,阻止新血管形成,延遲創(chuàng)面愈合。Ⅵ型膠原可形成微纖絲促使Ⅰ型和Ⅲ型膠原沉積,并促使細胞粘附,激活基質(zhì)金屬蛋白酶的活性使創(chuàng)面組織重塑[3]而促進創(chuàng)面愈合。然而,Ⅳ型及Ⅵ型膠原在皮膚創(chuàng)傷再生修復(fù)及瘢痕愈合中的變化仍不清楚。本研究采用耳兔皮膚再生和瘢痕愈合一體化模型,使用HE染色法及免疫組織化學技術(shù),檢測Ⅳ型及Ⅵ型膠原在皮膚從淺到深層損傷區(qū)愈合和瘢痕演變過程中的表達,了解Ⅳ型及Ⅵ型膠原蛋白在皮膚再生修復(fù)和瘢痕形成中的變化規(guī)律。 材料和方法選用健康日本大耳白兔26只,(購于蘭州市獸醫(yī)研究所,普通級動物,合格證號：SCKX甘2004-0005),雌雄不拘,體重在2.0kg-3.0kg之間。單只分籠飼養(yǎng),普通飼料喂養(yǎng),自由進食水,適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后,采用含8%硫化鈉的自制脫毛劑行兔耳腹側(cè)脫毛,脫毛后飼養(yǎng)3天,以減少硫化鈉對兔耳腹側(cè)皮膚的損傷。采用2%的戊巴比妥鈉(30mg/kg)耳緣靜脈注射麻醉,麻妥后,采用自制模具充分展平兔耳腹側(cè)皮膚,分別于兩側(cè)兔耳各制作兩個創(chuàng)面(10mm×10mm,創(chuàng)面為由淺至深的斜面,淺層僅傷及表皮,深層至軟骨表面),共84個。分別于傷后即刻、傷后3天、傷后6天、傷后9天、傷后27天、傷后50天切取創(chuàng)面及創(chuàng)周組織。實驗前經(jīng)蘭州大學第二醫(yī)院實驗動物倫理委員會審批同意,所有實驗動物給予人文關(guān)懷。 標本使用HE染色法及免疫組織化學檢測Ⅳ型及Ⅵ型膠原在兔耳腹側(cè)皮膚損傷區(qū)深、淺兩層的表達情況。 沿斜形創(chuàng)面由淺入深的方向,將其分為10等分,每等分1.0mm×10mm,采用Image-Pro—Plus6.0圖像分析軟件檢測每等分組織區(qū)域內(nèi)的10個視野中的平均光密度。淺層創(chuàng)面定義為距淺表皮膚損傷側(cè)向創(chuàng)面中心3mm范圍,深層創(chuàng)面定義為距軟骨暴露側(cè)向創(chuàng)面中心3mm范圍內(nèi)。 所檢測測到的數(shù)據(jù)采用x±s表示,統(tǒng)計學分析使用SPSS18.0軟件包：若方差齊性時,多組間均數(shù)比較則采用方差分析,兩兩比較時使用最小顯著差異法,方差補齊時則采用秩和檢驗法,P0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果 1.傷后3天創(chuàng)面結(jié)痂。淺層創(chuàng)面?zhèn)?天痂脫落,第9天再生修復(fù)；而深層創(chuàng)面于傷后第9天痂大部分脫落,傷后12-14天上皮化。傷后27天瘢痕增生顯著,瘢痕質(zhì)硬,傷后50天瘢痕成熟軟化,創(chuàng)面膚色與周圍不能分辨。 2.Ⅳ型膠原主要表達于皮膚及血管BMs。傷后第3天創(chuàng)面開始表達,上皮化時達高峰,傷后27天時明顯減少。傷后27天內(nèi)淺層創(chuàng)面表達量較深層多(p0.05)。傷后50天時深淺創(chuàng)面無明顯區(qū)別(p0.05)。 3.Ⅵ型膠原廣泛表達于整個真皮層。傷后第3天創(chuàng)面開始表達,隨后逐漸增加,傷后27天開始減少。傷后6天內(nèi)淺層創(chuàng)面表達量較深層創(chuàng)面多(p0.05)。傷后第9、12、27天深層表達量均多于淺層Q0.05)。傷后50天深淺創(chuàng)面表達量無明顯差異(p0.05)。 結(jié)論 1.創(chuàng)面Ⅳ型膠原表達量傷后27天內(nèi)淺層高于深層創(chuàng)面。 2.Ⅵ型膠原表達量傷后6天內(nèi)淺層創(chuàng)面較深層多；9-27天深層較淺層高。
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R622

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 蘇順清;轉(zhuǎn)化生長因子β與皮膚創(chuàng)傷后瘢痕增生[J];中華醫(yī)學美容雜志;1998年01期

2 孫潔;劉琛;;濕潤燒傷膏治療面頸部皮膚創(chuàng)傷療效及影響因素[J];齊魯藥事;2008年11期

3 譚琳;;應(yīng)用美容技術(shù)急診修復(fù)皮膚裂傷[J];中國美容醫(yī)學;2009年11期

4 鞏永杰,賈小強,石琳;鳳凰衣治療急性皮膚創(chuàng)傷300例療效分析[J];山東醫(yī)藥;2003年18期

5 羅梅;轉(zhuǎn)化生長因子β與皮膚創(chuàng)傷修復(fù)后病理性瘢痕的形成[J];中國美容醫(yī)學;2003年05期

6 劉霞,高峰,谷振勇;創(chuàng)傷愈合的分子機制研究進展[J];醫(yī)學綜述;2005年03期

7 宣兆艷;曹紅十;盧英強;常亞東;;P選擇素在大鼠皮膚損傷愈合過程中的免疫組織化學表達[J];中國實驗診斷學;2006年12期

8 張紅;孫明江;代龍;;膠原蛋白對大鼠創(chuàng)傷模型愈合影響的實驗研究[J];中國實驗方劑學雜志;2009年08期

9 董鵬飛;楊佑成;;羧甲基殼聚糖在醫(yī)學領(lǐng)域中的應(yīng)用進展[J];濱州醫(yī)學院學報;2009年06期

10 金福;鄭秋燕;;如何使用碘酒、紅汞、紫藥水?[J];新聞世界(健康生活);2007年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 胡剛;馮捷;金巖;;人循環(huán)成纖維細胞參與皮膚創(chuàng)傷修復(fù)的作用[A];2010全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學術(shù)會議論文匯編[C];2010年

2 顧家富;晉繼忠;;苯扎溴銨溶液對皮膚創(chuàng)傷瘢痕的防治作用[A];2010年中國藥學大會暨第十屆中國藥師周論文集[C];2010年

3 吳多慶;潘富文;;濕潤燒傷膏治療皮膚創(chuàng)傷150例臨床觀察[A];第七屆全國燒傷創(chuàng)瘍學術(shù)會議論文匯編[C];2002年

4 于虎;李艷;王冠;楊小凡;許松山;聶李亞;車永哲;;皮膚創(chuàng)傷時重組Thymosin β4調(diào)節(jié)ICAM-1表達研究[A];天津市生物醫(yī)學工程學會2008年年會暨首屆生物醫(yī)學工程與臨床論壇論文集[C];2008年

5 陳禮新;王一兵;;碘對大鼠皮膚創(chuàng)傷修復(fù)影響的實驗研究[A];中華醫(yī)學會燒傷外科學分會2009年學術(shù)年會論文匯編[C];2009年

6 肖摩;;再生醫(yī)療技術(shù)在皮膚創(chuàng)傷、潰瘍類疾病的臨床應(yīng)用[A];2009全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學術(shù)會議論文匯編[C];2009年

7 馮正直;周明芳;;抑郁復(fù)合皮膚創(chuàng)傷對大鼠創(chuàng)面愈合的影響[A];第十一屆全國心理學學術(shù)會議論文摘要集[C];2007年

8 李學鋒;王慧君;;皮膚創(chuàng)傷愈合過程中TGF-β_1 mRNA的表達與損傷時間關(guān)系的實驗研究[A];全國第七次法醫(yī)學術(shù)交流會論文摘要集[C];2004年

9 霍雙枝;龐希寧;施萍;;人羊膜負載羊膜間充質(zhì)干細胞治療大鼠皮膚創(chuàng)傷的研究[A];“細胞活動 生命活力”——中國細胞生物學學會全體會員代表大會暨第十二次學術(shù)大會論文摘要集[C];2011年

10 胡剛;馮捷;金巖;肖生祥;;人循環(huán)成纖維細胞參與皮膚創(chuàng)傷修復(fù)的作用[A];中華醫(yī)學會第16次全國皮膚性病學術(shù)年會摘要集[C];2010年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 吳一福;我國具有自主知識產(chǎn)權(quán)的活性人造皮膚問世[N];中國醫(yī)藥報;2008年

2 白河;何謂肺大泡[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2007年

3 汪志錚;山羊鏈球菌病的防治[N];福建科技報;2006年

4 薛志成;七彩龜癤腫病防治[N];中國漁業(yè)報;2006年

5 楊元祥邋王方;保打贏保出“雙贏”效益[N];解放軍報;2007年

6 李錫巖;酒精濃度高不等于消毒作用強[N];家庭醫(yī)生報;2007年

7 劉遠橋 鄒爭春;大坪醫(yī)院成功開展肛門成形手術(shù)[N];科技日報;2005年

8 黃文尚;怎樣防治豬“打火印”[N];農(nóng)民日報;2004年

9 韓文格;觀察雞群 診斷雞病[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2005年

10 周橫;用姜喂豬功效多[N];云南科技報;2005年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 孫士錦;BMSCs在皮膚創(chuàng)傷修復(fù)中的作用[D];第三軍醫(yī)大學;2009年

2 周建大;原代成體皮膚角質(zhì)形成細胞、成纖維細胞的培養(yǎng)和轉(zhuǎn)基因研究[D];中南大學;2004年

3 郭愛華;關(guān)于人皮膚真皮和角質(zhì)上皮細胞以及在體創(chuàng)傷模型的研究[D];南方醫(yī)科大學;2012年

4 簡華剛;皮膚創(chuàng)傷愈合相關(guān)差異表達基因的克隆、篩選及鑒定[D];重慶醫(yī)科大學;2002年

5 李金鳳;HGF基因治療和預(yù)防病理性瘢痕的實驗研究及相關(guān)機制探討[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2007年

6 劉鵬;外周血來源的成體干細胞的體外培養(yǎng)鑒定以及在皮膚創(chuàng)傷修復(fù)中的作用研究[D];第四軍醫(yī)大學;2008年

7 郭永峰;人表皮細胞去分化的實驗研究[D];中國醫(yī)科大學;2007年

8 蔣艷;富組蛋白1促進人表皮細胞，人成纖維細胞增殖和遷移在創(chuàng)傷愈合中的作用及機制研究[D];第三軍醫(yī)大學;2012年

9 李憲奎;人胸腺素β4在大腸桿菌中的克隆、表達、純化及生物學活性鑒定[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2008年

10 馬霞;發(fā)酵生產(chǎn)細菌纖維素及其作為醫(yī)學材料的應(yīng)用研究[D];天津科技大學;2004年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 李朝軍;濕性敷料美皮康應(yīng)用于乳房皮膚創(chuàng)傷修復(fù)的臨床觀察[D];吉林大學;2012年

2 馮海軍;皮膚創(chuàng)傷再生和瘢痕愈合中腱糖蛋白C、透明質(zhì)酸和蛋白激酶C-α、-β_1的表達差異[D];蘭州大學;2013年

3 姚東剛;Ⅳ和Ⅵ型膠原在皮膚創(chuàng)傷再生和瘢痕愈合中的表達差異[D];蘭州大學;2014年

4 張旭;TGF-β_(1、2、3)在皮膚創(chuàng)傷再生和瘢痕愈合中的表達差異[D];蘭州大學;2014年

5 高興強;KLF4在創(chuàng)傷新生血管內(nèi)皮細胞中的表達和對血管內(nèi)皮細胞功能的影響[D];華中科技大學;2013年

6 孫耀蘭;角質(zhì)細胞特異性過表達miR-142轉(zhuǎn)基因小鼠的建立[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2011年

7 楊威;瓊脂基皮膚創(chuàng)傷修復(fù)材料的研究[D];暨南大學;2006年

8 劉東輝;IL-1，IL-8，VEGF在小鼠皮膚切創(chuàng)中的表達及其與損傷時間關(guān)系的研究[D];吉林大學;2006年

9 霍艷麗;脫細胞羊膜與小腸黏膜下層促進大鼠皮膚缺損修復(fù)和血管形成[D];中國醫(yī)科大學;2009年

10 安玉林;三種骨髓間充質(zhì)干細胞移植方法對大鼠急性皮膚創(chuàng)面愈合作用的比較研究[D];第四軍醫(yī)大學;2012年

，

本文編號：2585170