電針對(duì)MCAO大鼠腦皮質(zhì)臂板蛋白3a和軸突生長導(dǎo)向因子-1表達(dá)的影響
發(fā)布時(shí)間:2019-08-01 15:23
【摘要】:目的:觀察局灶性腦梗死大鼠皮質(zhì)軸突生長導(dǎo)向因子-1(netrin-1,Ntn1)和臂板蛋白3a(semaphorin-3a,sema3a)的表達(dá)及電針干預(yù)對(duì)其表達(dá)的影響。探索Ntn1與sema3a在電針對(duì)腦梗后神經(jīng)可塑性影響中的作用。 方法:將135只雄性Sprague-Dawle(SD)大鼠分為正常組(n=15)、模型組(n=60)及電針組(n=60)。利用線栓法制作大腦中動(dòng)脈閉塞(middlecerebral artery occlusion,MCAO)模型,并行l(wèi)onga評(píng)分。2,3,5—氯化三苯基四氮唑(TTC)染色與蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosinstaining, HE)染色確定造模成功。電針選穴“內(nèi)關(guān)”(PC6),“足三里”(ST36),刺激參數(shù)為疏密波,頻率80~100Hz,強(qiáng)度以保持針刺局部輕微顫抖為度,留針30min。電刺激在大鼠麻醉蘇醒后90min進(jìn)行。分別在術(shù)后1d、3d、7d、14d時(shí),對(duì)術(shù)后大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分(modified neurologic severity scores,mNSS),利用免疫組化檢測缺血側(cè)大腦腦皮質(zhì)中Ntn1、sema3a、神經(jīng)絲蛋白200(NF200)分布和表達(dá),免疫印跡法檢測缺血側(cè)大腦皮質(zhì)Ntn1和sema3a的蛋白表達(dá)。 結(jié)果:免疫組化結(jié)果顯示在各個(gè)時(shí)相點(diǎn)大鼠腦皮質(zhì)均表達(dá)Ntn1和sema3a,主要集中在細(xì)胞質(zhì)陽性表達(dá)。Westernblot檢測結(jié)果顯示,與正常組相比,模型組Ntn1蛋白的表達(dá)水平在腦梗死后1d即開始明顯上升(P<0.01),3d時(shí)呈上升趨勢(P<0.01),7d時(shí)達(dá)峰值(P<0.01),14d時(shí)仍顯著高于基礎(chǔ)水平(P<0.01),電針組與模型組相比,Ntn1蛋白表達(dá)趨勢相同,但表達(dá)量明顯高于模型組,術(shù)后1d、3d、7d、14d時(shí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05,P<0.01).與正常組相比,模型組sema3a蛋白的表達(dá)水平在術(shù)后1d即開始上升(P<0.01),7d時(shí)達(dá)高峰(P<0.01),14d時(shí)仍高于基礎(chǔ)水平(P<0.01)。同時(shí)相點(diǎn)電針組與模型組相比sema3a均呈現(xiàn)低表達(dá),1d、3d和7d、14d時(shí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05,P<0.01),峰值同樣在7d時(shí)出現(xiàn)。Western blot檢測結(jié)果與免疫組化分析結(jié)果基本相符。7d、14d時(shí)電針組與模型組相比mNSS評(píng)分存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),14d時(shí)電針組與模型組相比NF200的表達(dá)量存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。結(jié)論局灶性腦梗死后大鼠皮質(zhì)Ntn1與sema3a表達(dá)明顯上調(diào),給予電針干預(yù)后可提高Ntn1的表達(dá)并抑制sema3a的表達(dá),促進(jìn)軸突的再生與修復(fù),這可能是電針促進(jìn)腦梗死后神經(jīng)功能恢復(fù)的機(jī)制之一。
【圖文】:
學(xué)差異( P < 0. 01) 。電針組sema3a 的表達(dá)趨勢與模型組相符,但表達(dá)量明顯低于模型組,1、3、7、14 d 時(shí)與模型組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異( P < 0. 05,P < 0. 01).見圖2(Fig.2)、圖3(Fig.3)、圖4(Fig.4)、圖5(Fig.5)a: P<0.05,b: P<0.01,與正常組比較; c: P<0.05,d: P<0.01,與模型組比較圖2 不同時(shí)相點(diǎn)各組大鼠腦皮質(zhì)Ntn1 的平均光密度值
圖6 Western blot 檢測不同時(shí)相點(diǎn)各組大鼠腦皮質(zhì)Ntn1 與sema3a 的表達(dá)Figure 6 the result of Western blotting with Ntn1 and sema3aa: P < 0. 01 與正常組比較; b: P < 0. 05,c: P < 0. 01 與模型組比較圖7 不同時(shí)相點(diǎn)各組大鼠腦皮質(zhì)Ntn1 的灰度值a: P < 0. 01 compared with normal group; b: P < 0. 05,c: P < 0. 01
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R245.97
本文編號(hào):2521831
【圖文】:
學(xué)差異( P < 0. 01) 。電針組sema3a 的表達(dá)趨勢與模型組相符,但表達(dá)量明顯低于模型組,1、3、7、14 d 時(shí)與模型組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異( P < 0. 05,P < 0. 01).見圖2(Fig.2)、圖3(Fig.3)、圖4(Fig.4)、圖5(Fig.5)a: P<0.05,b: P<0.01,與正常組比較; c: P<0.05,d: P<0.01,與模型組比較圖2 不同時(shí)相點(diǎn)各組大鼠腦皮質(zhì)Ntn1 的平均光密度值
圖6 Western blot 檢測不同時(shí)相點(diǎn)各組大鼠腦皮質(zhì)Ntn1 與sema3a 的表達(dá)Figure 6 the result of Western blotting with Ntn1 and sema3aa: P < 0. 01 與正常組比較; b: P < 0. 05,c: P < 0. 01 與模型組比較圖7 不同時(shí)相點(diǎn)各組大鼠腦皮質(zhì)Ntn1 的灰度值a: P < 0. 01 compared with normal group; b: P < 0. 05,c: P < 0. 01
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R245.97
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):2521831
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