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Fas凋亡抑制分子FAIM 1表達缺失誘發(fā)單純性肥胖的初步研究

發(fā)布時間:2019-07-11 10:50
【摘要】:利用肥胖患者血液和肥胖動物模型研究Fas凋亡抑制分子FAIM 1與單純性肥胖的關系,為揭示單純性肥胖發(fā)生的分子機理和診治肥胖提供新的實驗基礎。檢測40例單純性肥胖患者和17例正常者血液白細胞的FAIM 1蛋白的表達量,分析FAIM 1與單純性肥胖的相關性。為進一步揭示FAIM 1與單純性肥胖發(fā)生、發(fā)展的內(nèi)在關系,利用高脂飼料建立肥胖模型,并測定肥胖組和對照組大鼠的體重和血糖水平;造模成功的肥胖組大鼠和對照組大鼠禁食12h,麻醉心臟取血,分析血脂中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-C)的變化;取肥胖組和對照組大鼠的附睪脂肪墊和腎周脂肪,分析重量變化;取肥胖組和對照組大鼠,利用Western-blot檢測FAIM 1及胰島素受體β(IRβ)的表達變化。實驗結(jié)果表明:與正常者相比,單純性肥胖患者血液白細胞的FAIM 1表達量平均減少36.4%;與對照組相比,肥胖組大鼠血清TC、TG和LDL-C分別增加37.1%、25.6%和39.1%,而HDL-C則降低33.3%;肥胖組大鼠附睪脂肪墊和腎周脂肪分別是對照組的1.85倍和2.24倍;與對照組相比,肥胖組大鼠肝臟FAIM 1、IRβ的表達量分別降低45.9%和32.6%,與臨床血液樣本的檢測結(jié)果一致。研究表明,FAIM 1表達與單純性肥胖發(fā)生具有顯著的負相關性,FAIM 1可成為單純性肥胖診斷和治療的新靶點。
文內(nèi)圖片:正常者與肥胖患者血液白細胞的FAIM1表達量比較及與BMI的相關性Fig.1ComparisonofFAIM1expressionlevelsinleukocytesbetweenthenormalindividualsandobesepatientsandtherelationofFAIM1andBMI
圖片說明: 噱椅孿亂?%脫脂奶粉封閉2h,分別加入FAIM1抗體和IRβ抗體、室溫孵育2h,TBST洗滌3次,每次8min,加入辣根過氧化物酶標記的IgG,室溫孵育1h,TBST洗滌3次,每次5min,利用ECL試劑盒曝光蛋白條帶,檢測在肥胖SD大鼠模型與正常對照鼠肝組織中FAIM1與IRβ表達的差異。1.4統(tǒng)計學處理應用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計學分析,實驗數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差(M±S.E.M)表示,組間比較采用t檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。2結(jié)果與分析2.1臨床血液樣本的分析以正常者作為對照,肥胖患者血液白細胞的FAIM1表達量顯著下降(圖1a)。對17例正常者和40例肥胖者血液白細胞的FAIM1表達量進行統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn),以正常者作為對照,肥胖患者血液白細胞的FAIM1表達量平均減少36.4%(圖1b)。FAIM1表達量與肥胖程度(BMI)的相關性分析顯示,F(xiàn)AIM1表達量與肥胖程度(BMI)呈顯著性負相關(R=-0.833)(圖1c)。圖1正常者與肥胖患者血液白細胞的FAIM1表達量比較及與BMI的相關性Fig.1ComparisonofFAIM1expressionlevelsinleukocytesbetweenthenormalindividualsandobesepatientsandtherelationofFAIM1andBMI(a)AssayofFAIM1proteinexpressioninwhitebloodcellsofthenormalindividualsandobesepatientsbyWesternblot(b)StatisticalanalysisofFAIM1proteinexpressioninwhitebloodcellsfor17casesofnormalindividualsand40casesofobesepatients(c)CorrelationanalysisofFAIM1proteinexpressionandBMI**P<0.01,,normalindividualsversusobesepatients2.2肥胖SD大鼠模型的構(gòu)建6周齡雄性SD大鼠利用高脂飼料喂養(yǎng),正常對照組則用相應的對照飼料連續(xù)喂養(yǎng)10周后,與正常對照組相比,肥胖組的大鼠空腹血糖和體重分別增加11.7%和26.5%(表2),表明高脂飼料喂養(yǎng)的SD?
文內(nèi)圖片:高脂飼料喂養(yǎng)肥胖SD大鼠與正常鼠肝組織中FAIM1和IRβ蛋白表達量比較
圖片說明: ?高脂飼料喂養(yǎng)的肥胖SD大鼠與正常對照鼠的附睪脂肪墊和腎周脂肪的重量比較Table4Comparisonoftheweightoftheepididymalfatpadandperirenalfatbetweenthenormalandhigh-fatdiet-fedobeseSDrats(M±S.E.M.)對照組肥胖組附睪脂肪墊(g)12.12±1.0922.39±2.12**腎周脂肪(g)3.79±1.518.48±0.46****P<0.01,高脂飼料喂養(yǎng)的肥胖SD大鼠與正常對照鼠比較2.5高脂飼料喂養(yǎng)肥胖SD大鼠與正常鼠的FAIM1與IRβ的表達檢測與正常組相比,肥胖組的大鼠肝臟中FAIM1和IRβ表達量分別下降45.9%和32.6%(圖2a、圖2b)。實驗結(jié)果表明,肥胖組的大鼠肝臟中不僅FAIM1的表達顯著減少,而且胰島素通路和能量代謝相關的IRβ的表達也明顯減少,這些與能量代謝相關的關鍵蛋白的表達異常降低可能誘導了肥胖的發(fā)生與發(fā)展。圖2高脂飼料喂養(yǎng)肥胖SD大鼠與正常鼠肝組織中FAIM1和IRβ蛋白表達量比較Fig.2ComparisonofFAIM1andIRβexpressioninlivertissuebetweenthenormalandhigh-fatdiet-fedobeseSDrats(a)AssayofFAIM1andIRβproteinexpressioninlivertissueofthenormalandhigh-fatdiet-fedobeseSDratsbyWesternblot(b)RelativeexpressionassayforFAIM1andIRβproteinexpressionin(a)**P<0.01,normalSDratsversushigh-fatdiet-fedobeseSDrats3討論FAIM1蛋白通過與Fas受體的直接相互作用以及通過穩(wěn)定XIAP(一種有效抑制半胱天冬蛋白酶的抗凋亡蛋白)水平來抑制細胞因子FasL和TNFα誘導的細胞凋亡。FAIM1作為一種新發(fā)現(xiàn)的功能調(diào)節(jié)蛋白,近年來不斷發(fā)現(xiàn)它的表達異常與某些疾病關系密切[8,13-14]。目前關于FAIM1蛋白與肥胖關系的研究罕有報道。近期本課題組及國外合作者的研究已發(fā)現(xiàn)FAIM1的表達異常與肥胖的發(fā)生、發(fā)
【作者單位】: ;" target="_blank">暨南大學細胞生物學系暨南大學生物醫(yī)藥研究院廣東省生物工程藥物重點實驗室基因工程藥物國家工程研究中心;廣州中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院<廣東省中醫(yī)院>;
【基金】:國家自然科學基金(81373314,81473688) 廣東省自然科學基金(2015A030313333,2015A030313345) 廣東省科技計劃(2014A020210015,2013B090500105) 中央高;究蒲袠I(yè)務費專項資金(21615412) 廣州市科技計劃(201707010245)資助項目
【分類號】:R589.2

【參考文獻】

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【共引文獻】

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4 陳Y蹣

本文編號:2513102


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