【摘要】：利用肥胖患者血液和肥胖動(dòng)物模型研究Fas凋亡抑制分子FAIM 1與單純性肥胖的關(guān)系,為揭示單純性肥胖發(fā)生的分子機(jī)理和診治肥胖提供新的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。檢測(cè)40例單純性肥胖患者和17例正常者血液白細(xì)胞的FAIM 1蛋白的表達(dá)量,分析FAIM 1與單純性肥胖的相關(guān)性。為進(jìn)一步揭示FAIM 1與單純性肥胖發(fā)生、發(fā)展的內(nèi)在關(guān)系,利用高脂飼料建立肥胖模型,并測(cè)定肥胖組和對(duì)照組大鼠的體重和血糖水平;造模成功的肥胖組大鼠和對(duì)照組大鼠禁食12h,麻醉心臟取血,分析血脂中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-C)的變化;取肥胖組和對(duì)照組大鼠的附睪脂肪墊和腎周脂肪,分析重量變化;取肥胖組和對(duì)照組大鼠,利用Western-blot檢測(cè)FAIM 1及胰島素受體β(IRβ)的表達(dá)變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與正常者相比,單純性肥胖患者血液白細(xì)胞的FAIM 1表達(dá)量平均減少36.4%;與對(duì)照組相比,肥胖組大鼠血清TC、TG和LDL-C分別增加37.1%、25.6%和39.1%,而HDL-C則降低33.3%;肥胖組大鼠附睪脂肪墊和腎周脂肪分別是對(duì)照組的1.85倍和2.24倍;與對(duì)照組相比,肥胖組大鼠肝臟FAIM 1、IRβ的表達(dá)量分別降低45.9%和32.6%,與臨床血液樣本的檢測(cè)結(jié)果一致。研究表明,FAIM 1表達(dá)與單純性肥胖發(fā)生具有顯著的負(fù)相關(guān)性,FAIM 1可成為單純性肥胖診斷和治療的新靶點(diǎn)。
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圖片說明： 噱椅孿亂?%脫脂奶粉封閉2h，分別加入FAIM1抗體和IＲβ抗體、室溫孵育2h，TBST洗滌3次，每次8min，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的IgG，室溫孵育1h，TBST洗滌3次，每次5min，利用ECL試劑盒曝光蛋白條帶，檢測(cè)在肥胖SD大鼠模型與正常對(duì)照鼠肝組織中FAIM1與IＲβ表達(dá)的差異。1．4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS19．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(M±S．E．M)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果與分析2．1臨床血液樣本的分析以正常者作為對(duì)照，肥胖患者血液白細(xì)胞的FAIM1表達(dá)量顯著下降(圖1a)。對(duì)17例正常者和40例肥胖者血液白細(xì)胞的FAIM1表達(dá)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，以正常者作為對(duì)照，肥胖患者血液白細(xì)胞的FAIM1表達(dá)量平均減少36．4%(圖1b)。FAIM1表達(dá)量與肥胖程度(BMI)的相關(guān)性分析顯示，F(xiàn)AIM1表達(dá)量與肥胖程度(BMI)呈顯著性負(fù)相關(guān)(Ｒ=－0．833)(圖1c)。圖1正常者與肥胖患者血液白細(xì)胞的FAIM1表達(dá)量比較及與BMI的相關(guān)性Fig．1ComparisonofFAIM1expressionlevelsinleukocytesbetweenthenormalindividualsandobesepatientsandtherelationofFAIM1andBMI(a)AssayofFAIM1proteinexpressioninwhitebloodcellsofthenormalindividualsandobesepatientsbyWesternblot(b)StatisticalanalysisofFAIM1proteinexpressioninwhitebloodcellsfor17casesofnormalindividualsand40casesofobesepatients(c)CorrelationanalysisofFAIM1proteinexpressionandBMI＊＊P＜0．01，，normalindividualsversusobesepatients2．2肥胖SD大鼠模型的構(gòu)建6周齡雄性SD大鼠利用高脂飼料喂養(yǎng)，正常對(duì)照組則用相應(yīng)的對(duì)照飼料連續(xù)喂養(yǎng)10周后，與正常對(duì)照組相比，肥胖組的大鼠空腹血糖和體重分別增加11．7%和26．5%(表2)，表明高脂飼料喂養(yǎng)的SD?
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圖片說明： ?高脂飼料喂養(yǎng)的肥胖SD大鼠與正常對(duì)照鼠的附睪脂肪墊和腎周脂肪的重量比較Table4Comparisonoftheweightoftheepididymalfatpadandperirenalfatbetweenthenormalandhigh-fatdiet-fedobeseSDrats(M±S．E．M．)對(duì)照組肥胖組附睪脂肪墊(g)12．12±1．0922．39±2．12＊＊腎周脂肪(g)3．79±1．518．48±0．46＊＊＊＊P＜0．01，高脂飼料喂養(yǎng)的肥胖SD大鼠與正常對(duì)照鼠比較2．5高脂飼料喂養(yǎng)肥胖SD大鼠與正常鼠的FAIM1與IＲβ的表達(dá)檢測(cè)與正常組相比，肥胖組的大鼠肝臟中FAIM1和IＲβ表達(dá)量分別下降45．9%和32．6%(圖2a、圖2b)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，肥胖組的大鼠肝臟中不僅FAIM1的表達(dá)顯著減少，而且胰島素通路和能量代謝相關(guān)的IＲβ的表達(dá)也明顯減少，這些與能量代謝相關(guān)的關(guān)鍵蛋白的表達(dá)異常降低可能誘導(dǎo)了肥胖的發(fā)生與發(fā)展。圖2高脂飼料喂養(yǎng)肥胖SD大鼠與正常鼠肝組織中FAIM1和IＲβ蛋白表達(dá)量比較Fig．2ComparisonofFAIM1andIＲβexpressioninlivertissuebetweenthenormalandhigh-fatdiet-fedobeseSDrats(a)AssayofFAIM1andIＲβproteinexpressioninlivertissueofthenormalandhigh-fatdiet-fedobeseSDratsbyWesternblot(b)ＲelativeexpressionassayforFAIM1andIＲβproteinexpressionin(a)＊＊P＜0．01，normalSDratsversushigh-fatdiet-fedobeseSDrats3討論FAIM1蛋白通過與Fas受體的直接相互作用以及通過穩(wěn)定XIAP(一種有效抑制半胱天冬蛋白酶的抗凋亡蛋白)水平來抑制細(xì)胞因子FasL和TNFα誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。FAIM1作為一種新發(fā)現(xiàn)的功能調(diào)節(jié)蛋白，近年來不斷發(fā)現(xiàn)它的表達(dá)異常與某些疾病關(guān)系密切［8，13-14］。目前關(guān)于FAIM1蛋白與肥胖關(guān)系的研究罕有報(bào)道。近期本課題組及國(guó)外合作者的研究已發(fā)現(xiàn)FAIM1的表達(dá)異常與肥胖的發(fā)生、發(fā)
【作者單位】： ;" target="_blank">暨南大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)系暨南大學(xué)生物醫(yī)藥研究院廣東省生物工程藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室基因工程藥物國(guó)家工程研究中心;廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院<廣東省中醫(yī)院>;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81373314,81473688) 廣東省自然科學(xué)基金(2015A030313333,2015A030313345) 廣東省科技計(jì)劃(2014A020210015,2013B090500105) 中央高�；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金(21615412) 廣州市科技計(jì)劃(201707010245)資助項(xiàng)目
【分類號(hào)】：R589.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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4 陳Y蹣

本文編號(hào)：2513102