【摘要】：目的:觀察電針夾脊穴和督脈穴對急性脊髓損傷家兔后肢神經(jīng)功能的影響,并探討其作用機(jī)制。方法:采用隨機(jī)數(shù)字表將60只新西蘭家兔隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、電針組,每組20只。假手術(shù)組咬除T_(13)~L_1棘突及全部椎板,暴露0.5 cm寬硬膜,不損傷脊髓;模型組和電針組采用改良Allens法建立急性脊髓損傷家兔模型,并行脊髓MRI掃描鑒定模型。模型組和假手術(shù)組不給予治療,電針組給予電針刺激受損脊髓節(jié)段上下兩對夾脊穴及上下督脈穴(筋縮、命門)治療,每次30 min,每日1次,共7次。電針干預(yù)開始后1 d、3 d、7 d采用改良Tarlov評分法評價(jià)家兔后肢神經(jīng)功能。干預(yù)結(jié)束后每組取10只家兔,以4%多聚甲醛行心臟灌注后剖取損傷脊髓約1 cm,制成切片后經(jīng)HE染色于顯微鏡下觀察脊髓組織形態(tài),并采用免疫組織化學(xué)法觀察脊髓細(xì)胞增殖情況和巢蛋白(Nestin)表達(dá)水平。將每組剩余的10只家兔麻醉,分離坐骨神經(jīng)并注入5μL的30%辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP),24 h后取脊髓橫斷面背側(cè)靠近損傷處脊髓,采用HRP逆行示蹤法標(biāo)記紅核神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)。結(jié)果:①模型鑒定結(jié)果。MRI片上假手術(shù)組脊髓橫斷面信號正常,可見清晰的腦脊液通過。模型組和電針組脊髓橫斷面信號增強(qiáng),腦脊液受壓;受傷節(jié)段的脊髓在矢狀位MRI片T2WI上呈明顯的高信號,T1WI上呈低信號;提示脊髓斷端周圍充血、水腫,證明造模成功。②后肢神經(jīng)功能評分。電針干預(yù)后不同時(shí)間點(diǎn)Tarlov評分比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,即存在時(shí)間效應(yīng)(F=6.920,P=0.001);除假手術(shù)組外,干預(yù)后模型組和電針組Tarlov評分均逐漸升高。3組Tarlov評分總體上比較,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,即存在分組效應(yīng)(F=426.78,P=0.000)。干預(yù)開始后1 d,電針組Tarlov評分高于模型組[(0.30±0.47)分,(0.20±0.41)分,q=7.010,P=0.486],低于假手術(shù)組[(0.30±0.47)分,(4.70±0.47)分,q=30.843,P=0.000)];模型組低于假手術(shù)組(q=31.544,P=0.000)。干預(yù)開始后3 d,電針組Tarlov評分高于模型組[(1.55±0.60)分,(1.05±0.53)分,q=2.877,P=0.006],低于假手術(shù)組[(1.55±0.60)分,(4.80±0.41)分,q=20.775,P=0.000];模型組低于假手術(shù)組(q=23.651,P=0.000)。干預(yù)開始后7 d,電針組Tarlov評分高于模型組[(2.65±0.59)分,(1.40±0.50)分,q=8.004,P=0.000],低于假手術(shù)組[(2.65±0.59)分,(4.85±0.41)分,q=14.081,P=0.000];模型組低于假手術(shù)組(q=22.093,P=0.000)。時(shí)間因素和分組因素之間存在交互效應(yīng)(F=70.786,P=0.000)。③脊髓組織形態(tài)。假手術(shù)組脊髓形態(tài)結(jié)構(gòu)完整,神經(jīng)元結(jié)構(gòu)正常、分布均勻,細(xì)胞膜、細(xì)胞核及組織間隙均正常,尼氏體顯示清晰;模型組脊髓組織正常結(jié)構(gòu)喪失,可見組織充血、水腫,神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量減少,部分尼氏體消失,灰質(zhì)中部分區(qū)域甚至有較大的空腔;電針組與模型組相比,脊髓形態(tài)結(jié)構(gòu)基本完整,神經(jīng)元細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本正常,空泡變性減少,組織充血、水腫消失。④脊髓細(xì)胞增殖情況。電針干預(yù)開始后7 d,200倍顯微鏡下觀察,每個(gè)視野下3組家兔脊髓增殖細(xì)胞數(shù)比較,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(43.67±8.19)個(gè),(18.77±3.55)個(gè),(6.30±2.32)個(gè),F=382.413,P=0.000];電針組脊髓增殖細(xì)胞多于模型組(q=20.889,P=0.000)和假手術(shù)組(q=31.348,P=0.000),模型組多于假手術(shù)組(q=10.459,P=0.000)。⑤脊髓細(xì)胞Nestin表達(dá)水平。干預(yù)開始后7 d,200倍顯微鏡下觀察,每個(gè)視野下3組家兔脊髓細(xì)胞Nestin陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)比較,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(23.37±5.10)個(gè),(10.77±3.26)個(gè),(4.43±1.33)個(gè),F=218.084,P=0.000];電針組Nestin陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)多于模型組(q=15.770,P=0.000)和假手術(shù)組(q=23.696,P=0.000),模型組多于假手術(shù)組(q=7.926,P=0.000)。⑥紅核神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)。干預(yù)開始后7 d,200倍顯微鏡下觀察,每個(gè)視野下3組紅核神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)比較,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(513.40±46.79,417.90±43.03,578.40±43.91,F=32.760,P=0.000);電針組紅核神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)多于模型組(q=6.771,P=0.000)、少于假手術(shù)組(q=4.608,P=0.000),模型組少于假手術(shù)組(q=11.379,P=0.000)。結(jié)論:電針刺激夾脊穴和督脈穴能明顯改善急性脊髓損傷家兔的后肢神經(jīng)功能,其作用機(jī)制可能是通過促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞增殖分化和抑制紅核神經(jīng)元細(xì)胞凋亡,從而使損傷節(jié)段神經(jīng)組織修復(fù)及神經(jīng)通路再通。
[Abstract]:......
【作者單位】： 浙江省杭州市蕭山區(qū)中醫(yī)院;浙江中醫(yī)藥大學(xué);浙江省腫瘤醫(yī)院;
【基金】：浙江省杭州市科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(20140733Q51) 浙江省杭州市蕭山區(qū)科技計(jì)劃項(xiàng)目(2013313)
【分類號】：R245

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本文編號：2435933