【摘要】：目的：研究表明改性殼聚糖是一種天然聚陽離子生物多糖,具有優(yōu)良的生物相容性和生物可降解性,已廣泛應(yīng)用于腹腔術(shù)后的防粘連治療,也在神經(jīng)修復(fù)、皮膚修復(fù)、骨及軟骨修復(fù)等方面表現(xiàn)出廣泛的應(yīng)用前景。甲基潑尼松龍是一種中效糖皮質(zhì)激素,具有抗炎、免疫抑制以及改善損傷神經(jīng)附近微環(huán)境的作用,有研究證實(shí)在周圍神經(jīng)損傷后應(yīng)用甲基潑尼松龍可促進(jìn)神經(jīng)再生。本實(shí)驗(yàn)通過聯(lián)合應(yīng)用改性殼聚糖與甲基潑尼松龍,觀察對SD大鼠坐骨神經(jīng)離斷吻合術(shù)后神經(jīng)再生修復(fù)所起的作用,探索有效、安全的改善周圍神經(jīng)損傷再生與修復(fù)的新方法。方法：6周齡SD(Sprague-Dawley)大鼠60只,雌雄不限,質(zhì)量160-200 g,隨機(jī)分為5組,每組12只：A改性殼聚糖組,B甲基潑尼松龍組,C改性殼聚糖與甲基潑尼松龍聯(lián)合治療組,D生理鹽水對照組,E假手術(shù)組。ABCD四組SD大鼠于坐骨結(jié)節(jié)與股骨大轉(zhuǎn)子連線和坐骨神經(jīng)相交處用手術(shù)刀片切斷坐骨神經(jīng),并在手術(shù)顯微鏡下,將切斷的坐骨神經(jīng)用9-0帶線縫合針行神經(jīng)外膜端端縫合,神經(jīng)外膜縫合4-6針。顯微吻合后立即根據(jù)分組不同于神經(jīng)吻合口周圍注入不同藥物進(jìn)行干預(yù)(A組改性殼聚糖1m1；B組甲基潑尼松龍10mg；C組改性殼聚糖1m1+甲基潑尼松龍10mg；D組生理鹽水1m1),E組假手術(shù)組游離坐骨神經(jīng)后不切斷。術(shù)后每組大鼠縫合切口,肌注慶大霉素,預(yù)防感染。術(shù)后每天觀察SD大鼠展爪反射恢復(fù)、右下肢腫脹、皮膚潰瘍、足趾脫落等一般情況,并于術(shù)后4,8,12周測定坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度、腓腸肌濕質(zhì)量殘存率、腓腸肌細(xì)胞直徑及截面積,坐骨神經(jīng)粘連,光鏡及透射電鏡觀察坐骨神經(jīng)組織學(xué)變化。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)SD大鼠60只,實(shí)驗(yàn)過程中無大鼠意外死亡及術(shù)后感染發(fā)生,實(shí)驗(yàn)過程中無數(shù)據(jù)脫失。所有大鼠術(shù)后8天右側(cè)股后部皮膚傷口全部愈合。ABCD四組坐骨神經(jīng)切斷并吻合大鼠,術(shù)后麻醉復(fù)蘇后即出現(xiàn)右下肢癱瘓癥狀,并逐漸出現(xiàn)右下肢失神經(jīng)性皮膚營養(yǎng)不良表現(xiàn)。A組第25天開始展爪反射恢復(fù),第32天全部恢復(fù)。B組第25天開始恢復(fù),第33天全部恢復(fù)。C組于第22天出現(xiàn)恢復(fù),第28天全部恢復(fù)。D組第26大開始恢復(fù),第38天全部恢復(fù)。E組術(shù)后展爪反射未消失。結(jié)果顯示C組較A組B組早,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),A組與B組相比,展爪反射恢復(fù)時(shí)間類似,相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。術(shù)后第4周、8周、12周,在體測量坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度：在3個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)中,E組坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度最快,ABCD四組明顯慢于E組。D組生理鹽水對照組坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度最慢。C組坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度快于A組與B組及D組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。A組坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度稍稍快于B組,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。術(shù)后第4周、8周、12周,測定腓腸肌濕質(zhì)量殘存率表明：隨著術(shù)后時(shí)間延長,ABCD四組大鼠腓腸肌濕質(zhì)量殘存率逐漸下降,其中D組下降最快。E組濕質(zhì)量殘存率明顯高于ABCD四組,比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。C組與ABD組相比,濕質(zhì)量殘存率下降明顯較慢,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。術(shù)后第4周、8周、12周,測量腓腸肌直徑及計(jì)算截面積顯示：隨著術(shù)后時(shí)間延長,ABCD四組腓腸肌肌細(xì)胞直徑及截面積進(jìn)行性減小；與E組相比較,D組直徑及截面積減小最多(P0.05),在同一時(shí)間節(jié)點(diǎn)上,A組、B組及C組腓腸肌肌細(xì)胞直徑及截面積減小較少。C組與ABD三組相比,直徑及截面積減小明顯較小,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。術(shù)后第4周、8周、12周,觀察坐骨神經(jīng)粘連情況表明：D組坐骨神經(jīng)與周圍組織粘連較重,不易分離。E組亦存在較重粘連。A組、B組及C組粘連情況較D組及E組為輕。在ABC三組中,C組粘連情況相對較輕,相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。術(shù)后12周時(shí)電鏡觀察：E組假手術(shù)組可見神經(jīng)纖維無明顯分散,排列有序,髓鞘境界清晰,未見明顯髓鞘脫失。D組生理鹽水對照組可見神經(jīng)纖維、樹突、軸突及細(xì)胞器均嚴(yán)重變性及壞死,膜結(jié)構(gòu)不清,多見空泡狀改變,髓鞘排列雜亂、相互融合、溶解,髓鞘完整性嚴(yán)重破壞。C組改性殼聚糖與甲基潑尼松龍聯(lián)合治療組可見神經(jīng)纖維束及樹突、軸突、胞體等結(jié)構(gòu),細(xì)胞膜及細(xì)胞器均較清楚,纖維排列稍紊亂,胞體內(nèi)膜結(jié)構(gòu)及形態(tài)較正常稍差,部分胞體輕度水腫及變性。A組改性殼聚糖組可見神經(jīng)纖維排列尚有序,未見明顯變性,部分細(xì)胞器變性,部分膜結(jié)構(gòu)不清,欠光滑,細(xì)胞器變性變形,可見空泡變,部分染色質(zhì)凝集固縮,但優(yōu)于E組假手術(shù)組及D組生理鹽水對照組。B組甲基潑尼松龍組鏡下所見類似于改性殼聚糖組。結(jié)論：1.改性殼聚糖、甲基潑尼松龍均能防治周圍神經(jīng)損傷后吻合口附近粘連和瘢痕增生。改性殼聚糖與甲基潑尼松龍聯(lián)合使用后,明顯減少粘連和瘢痕發(fā)生率。2.改性殼聚糖與甲基潑尼松龍聯(lián)合使用能夠促進(jìn)周圍神經(jīng)離斷吻合后神經(jīng)再生及終末器官支配,促進(jìn)周圍神經(jīng)再生修復(fù)。3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)采用改性殼聚糖聯(lián)合甲基潑尼松龍治療有利于促進(jìn)大鼠坐骨神經(jīng)損傷的再生修復(fù),但功能恢復(fù)仍不能達(dá)到周圍神經(jīng)損傷前水平,仍需要進(jìn)一步研究探索周圍神經(jīng)損傷修復(fù)的新方法。
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【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R688

【參考文獻(xiàn)】

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1 顧玉榮,蔣電明,朱天亮;低溫冷凍和酒精處理的同種異體周圍神經(jīng)移植的效果比較[J];創(chuàng)傷外科雜志;2002年01期

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本文編號：2333350