【摘要】：目的： 觀(guān)察連翹提取物(單體)對(duì)膿毒癥大鼠術(shù)后48h、72h及1周存活率的影響,初步篩選出最有效的前3種單體；引用單味中藥有效單體(組效-量效)配伍的理念,運(yùn)用正交設(shè)計(jì)的研究方法,得出最佳組份及配比；觀(guān)察最佳配比對(duì)膿毒癥大鼠血清內(nèi)毒素、腫瘤壞死因子-α、白介素1、白介素6等炎癥介質(zhì)的影響及對(duì)凝血機(jī)制、肝腎功能等方面的影響。 方法： (1)采用大鼠盲腸結(jié)扎穿孔(CLP)模型,術(shù)前12h禁食,不禁水,5%水合氯醛麻醉(350-400mg/kg)腹腔麻醉,麻醉滿(mǎn)意后,前腹正中備皮,消毒腹部皮膚,于腹部正中做2.5cm切口,取出盲腸后,游離腸系膜和盲腸,距盲、回腸結(jié)合部約盲腸全長(zhǎng)1/3處,4號(hào)手術(shù)縫線(xiàn)盡量回避血管結(jié)扎,于距結(jié)扎處遠(yuǎn)端約0.8-1cm處回避血管,三棱針(2.6x65mm)貫穿孔,3x30mm膠條貫穿盲腸留滯,放回腹腔,縫合切口。術(shù)后頸部皮下補(bǔ)液10mmL,補(bǔ)充術(shù)中液體流失,抗休克；(2)分三個(gè)梯度(20%乙醇、50%乙醇、80%乙醇)分別對(duì)連翹進(jìn)行提取,得到三種對(duì)應(yīng)的連翹粗提取物后,分別予大鼠給藥,觀(guān)測(cè)大鼠48h、72h及1周的存活情況,選擇對(duì)膿毒癥大鼠最有效的連翹粗提取物,并以此實(shí)驗(yàn)結(jié)果為基礎(chǔ),對(duì)有效的連翹粗提取物進(jìn)行進(jìn)一步的單體提取,提純連翹提取物混合成份中含量最多的4種成份,用連翹提取物混合成分中含量最多的4中成份分別進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn),通過(guò)尾靜脈注射給藥的方法,觀(guān)察各單體對(duì)膿毒癥大鼠48h及72h的死亡率及生存時(shí)間的影響,初步篩選出對(duì)治療膿毒癥大鼠有效的單體；(3)對(duì)篩選出治療膿毒癥大鼠有效的單體,通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),運(yùn)用正交設(shè)計(jì),得出對(duì)膿毒癥大鼠有治療作用的3種單體的(組效-量效)關(guān)系,尋找最佳配比；(4)采用化學(xué)鑒別、核磁共振氫譜(1H-NMR)、核磁共振碳譜(13C-NMR)、薄層色譜(TLC)、高效液相色譜(HPLC)等光譜色譜方法對(duì)所分離出的四個(gè)化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,確定化合物的結(jié)構(gòu)和名稱(chēng)(主要由天津藥物研究院完成)；(5)通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),運(yùn)用酶聯(lián)免疫法及檢驗(yàn),研究連翹有效單體最佳配比對(duì)膿毒癥大鼠術(shù)后24h、48h、72小時(shí)TNF-α、IL-1β、LPS、IL-6，，血常規(guī),肝腎功能,凝血機(jī)制的影響。 結(jié)果： (1)50%連翹粗提取物對(duì)膿毒癥有很好的治療作用,能夠在一定程度上降低膿毒癥大鼠的死亡率,并相對(duì)延長(zhǎng)膿毒癥大鼠的生存時(shí)間；(2)記錄9種不同產(chǎn)地連翹的指紋圖譜；(3)分離出的四種化合物由鑒定可得出,一個(gè)木脂素類(lèi)(連翹苷)、一個(gè)苯乙醇苷類(lèi)(連翹酯苷A)、兩個(gè)黃酮類(lèi)(蘆丁和槲皮素),連翹苷、連翹酯苷A及槲皮素均能降低膿毒癥大鼠術(shù)后48h、72h及1周的死亡率,并相對(duì)延長(zhǎng)膿毒癥大鼠的生存時(shí)間；(4)單體連翹苷、連翹酯苷A及槲皮素在治療膿毒癥大鼠模型中的最佳配比為2：3：3；(5)在膿毒癥病程的早期,連翹提取物能夠拮抗機(jī)體炎癥介質(zhì)釋放,活白細(xì)胞及凝血系統(tǒng)來(lái)阻止病原微生物(如細(xì)菌)的進(jìn)一步擴(kuò)散。 結(jié)論： (1)50%連翹粗提取物對(duì)膿毒癥大鼠有一定的治療作用,能夠在一定程度上降低膿毒癥大鼠的死亡率,并相對(duì)延長(zhǎng)膿毒癥大鼠的生存時(shí)間；(2)連翹苷、連翹酯苷A及槲皮素組對(duì)膿毒癥大鼠有很好的治療作用；(3)單體連翹苷、連翹酯苷A及槲皮素在治療膿毒癥大鼠模型中的最佳配比為2：3：3。(4)連翹提取物能通過(guò)改善機(jī)體炎癥反應(yīng)、微血管凝血及血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷等因素,提高膿毒癥大鼠的存活率。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 金曄;王煒;;前降鈣素在膿毒癥診斷中的作用[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué);2013年12期

2 劉新農(nóng);展翰翔;胡三元;張光永;王磊;;血清miR-146a在膿毒癥早期診斷中的價(jià)值[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年09期

3 傅冠華;張麗英;徐瑞龍;馮勝春;;血清磷和hs-CRP聯(lián)檢對(duì)細(xì)菌性膿毒癥早期診斷的臨床價(jià)值[J];放射免疫學(xué)雜志;2013年03期

4 劉占國(guó);蔡靚;龍國(guó)良;余英典;楊祥銳;常平;;膿毒癥患者血清白細(xì)胞介素-6的檢測(cè)及意義[J];廣東醫(yī)學(xué);2012年24期

5 張羿;易思華;張曉微;金鳳玲;;sTREM-1和中性粒細(xì)胞表面CD64表達(dá)在膿毒癥早期診斷的價(jià)值[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2012年13期

6 劉慧琳;劉桂花;馬青變;;降鈣素原對(duì)急診膿毒癥患者早期診斷的價(jià)值[J];中國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué);2012年05期

7 朱倩;朱山寅;;連翹的化學(xué)成分研究[J];海峽藥學(xué);2012年02期

8 王玲玲;郭振輝;姜巧;陳蕊;孫杰;俞宙;肖飛;熊日成;;凝血功能異常在膿毒癥急性肺損傷發(fā)病中的作用[J];廣東醫(yī)學(xué);2012年01期

9 孫謀;孫立東;趙子瑜;陳圓圓;;前降鈣素在燒傷患者并發(fā)膿毒癥預(yù)測(cè)中的應(yīng)用[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合急救雜志;2011年06期

10 白靜慧;丁環(huán);蔣雷;馬建齊;O次捌

本文編號(hào)：2329732