發(fā)布時(shí)間：2018-10-12 07:41

【摘要】：目的： 建立一種與人類頸椎間盤退變導(dǎo)致頸椎病發(fā)病過程相似的去雙前肢直立誘導(dǎo)大鼠頸椎間盤退變模型，在此模型成功的基礎(chǔ)上，觀察院內(nèi)制劑經(jīng)驗(yàn)方骨痹合劑對(duì)去雙前肢直立誘導(dǎo)大鼠頸椎間盤退變模型的影響。 方法： 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組：選用孕期15日齡的SD大鼠3只，分籠飼養(yǎng)，把出生第10天的20只幼鼠，隨機(jī)分為2組，分別為正常組和去雙前肢模型組。造模方法：按鹽酸氯氨酮0.1g／kg體重行腹腔注射麻醉，將幼鼠在雙前肢剪毛和清潔后，用碘伏消毒幼鼠上肢皮膚，取前臂近端1/3處橫向切開皮膚，剝離筋膜和肌肉，暴露三角肌下血管神經(jīng)束，并用絲線結(jié)扎，，在結(jié)扎處遠(yuǎn)端用咬骨鉗咬斷肱骨，再用剪刀剪斷皮膚、肌肉、血管和神經(jīng)，使雙上肢離斷。將鹽酸慶大霉素滴入切口后，再將肌肉、筋膜、皮膚逐層縫合，最后在切口處涂金霉素眼膏預(yù)防感染，術(shù)后置于飼養(yǎng)籠內(nèi)飼養(yǎng)。術(shù)后6個(gè)月分別處死正常對(duì)照組和模型組，取整個(gè)頸椎作為檢測標(biāo)本，通過固定、脫鈣、脫水、包埋、切片、展片、烤片，行HE+阿爾新蘭復(fù)染、甲苯胺藍(lán)染色、藏紅固綠染色及CollagenⅩ、CollagenⅠ免疫熒光檢測。評(píng)價(jià)模型是否成功。在模型成功的基礎(chǔ)上，選用孕期15日齡的SD大鼠12只，分籠飼養(yǎng)，把出生第10天的80只幼鼠，隨機(jī)分為2組（6月齡組和9月齡組），每組40只，并全部去雙前肢（造模及喂養(yǎng)方法同前）。在大鼠5月齡時(shí)，將6月齡組隨機(jī)分為4組，每組10只，分別為模型組、生理鹽組、骨痹合劑組、陽性藥物對(duì)照組，分別給藥干預(yù)1個(gè)月，模型組不給藥，生理鹽水組按1ml/100g灌胃，骨痹合劑組按骨痹合劑1ml/100g灌胃，陽性藥物對(duì)照組以氨糖美辛1ml/100g灌胃。每隔12小時(shí)各給藥一次，連續(xù)4周。在大鼠6月齡時(shí)，分別處死4組大鼠，取下頸椎及周圍肌肉標(biāo)本行新鮮冰凍切片HE+阿爾新蘭復(fù)染觀察，頸椎標(biāo)本通過固定、脫鈣、脫水、包埋、切片、展片、烤片，行HE+阿爾新蘭復(fù)染、甲苯胺藍(lán)染色、藏紅固綠染色及CollagenⅩ、CollagenⅠ免疫熒光檢測。9月齡組在8月齡時(shí)隨機(jī)分為4組（方法同6月齡組），給藥方法與6月齡組相同，均給藥4周。在大鼠9月齡時(shí)，分別處死4組大鼠，標(biāo)本的觀察和檢測方法同前。 結(jié)果： 正常對(duì)照組的椎間盤結(jié)構(gòu)正常，髓核居中、纖維環(huán)包繞四周纖維環(huán)排列層次清晰呈整齊完整的板層狀結(jié)構(gòu)，終板完整；鈣化層與非鈣化層兩層之間有潮標(biāo)分布；生長軟骨呈柱狀排列，緊貼椎體。模型組中椎間盤形態(tài)改變，髓核內(nèi)開始出現(xiàn)裂隙、髓核皺縮，纖維環(huán)內(nèi)層部分纖維扭曲、排列紊亂與髓核的界線模糊，椎體結(jié)構(gòu)有部分破壞，椎間盤發(fā)生軟骨細(xì)胞變性、壞死，軟骨終板鈣化、斷裂等組織形態(tài)學(xué)改變，椎間盤高度降低。CollagenⅠ免疫熒光顯示：模型組CollagenⅠ陽性細(xì)胞表達(dá)比例較正常對(duì)照組高。CollagenⅩ免疫熒光顯示：模型組中的CollagenⅩ陽性細(xì)胞表達(dá)比例較正常對(duì)照組高。骨痹合劑組的椎間盤較其它三組比較，纖維環(huán)排列扭曲，結(jié)構(gòu)尚完整，層次尚清晰。髓核皺縮程度輕，軟骨終版鈣化層、潮標(biāo)向軟骨表層推進(jìn)，有部分軟骨細(xì)胞染色不均勻，終板鈣化層與非鈣化層兩層之間有潮標(biāo)分布。CollagenⅠ免疫熒光顯示：骨痹合劑組陽性細(xì)胞表達(dá)比例較其它三組低；CollagenⅩ免疫熒光顯示：骨痹合劑組陽性細(xì)胞表達(dá)比例較其它三組低。 結(jié)論： 成功建立了去雙前肢直立誘導(dǎo)大鼠頸椎間盤退變模型，此模型制作簡便，可重復(fù)性強(qiáng)，與人類直立狀態(tài)頸椎間盤退變導(dǎo)致頸椎病發(fā)病機(jī)制相似。骨痹合劑可延緩去雙前肢直立誘導(dǎo)大鼠頸椎間盤退變模型的椎間盤退變狀態(tài)，可能通過下調(diào)細(xì)胞外基質(zhì)CollagenⅠ、CollagenⅩ表達(dá)，延緩頸椎間盤的退變進(jìn)程。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：云南中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R274.9

【參考文獻(xiàn)】

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1 吳云剛;倪劍武;吳劍靜;吳春雷;;頸椎間孔阻滯合臂叢神經(jīng)牽拉樣手法治療神經(jīng)根型頸椎病的臨床研究[J];浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2009年04期

2 趙國紅;紀(jì)清;;神經(jīng)根型頸椎病的手法治療進(jìn)展[J];北京中醫(yī)藥;2008年10期

3 黃輝;吳樂彬;沈新云;錢世勛;陳中福;;按摩合前傾定位牽引法治療神經(jīng)根型頸椎病療效觀察[J];中華中醫(yī)藥雜志;2008年08期

4 王元德,張慶和;黃芪桂枝五物湯加味治療神經(jīng)根型頸椎病60例[J];黑龍江中醫(yī)藥;1999年02期

5 金國英;;定位旋轉(zhuǎn)扳法結(jié)合中藥外治治療神經(jīng)根型頸椎病的臨床觀察[J];遼寧中醫(yī)雜志;2008年04期

6 顧一煌;任建寧;李忠仁;張仕年;郭愛松;;疏經(jīng)通督法推拿治療神經(jīng)根型頸椎病的臨床療效觀察[J];南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2009年06期

7 趙越;程麗敏;;神經(jīng)根型頸椎病的綜合治療[J];黑龍江醫(yī)藥;2003年03期

8 吉立新,宋祥平,馬慶軍;神經(jīng)根型頸椎病的診斷和鑒別診斷[J];中國全科醫(yī)學(xué);2001年07期

9 陳斌,陳兆如;頸康靈Ⅱ號(hào)治療神經(jīng)根型頸椎病[J];四川中醫(yī);1998年06期

10 符彥成,李秉濤,黃秀麗,劉培峰,符保軍;歸靈止痛酊結(jié)合內(nèi)服中藥治療神經(jīng)根型頸椎病[J];四川中醫(yī);2001年04期

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