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芡實(shí)對(duì)糖尿病腎病大鼠腎組織SOCS-3、IGF-1表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-05-16 17:35

  本文選題:糖尿病腎病 + 芡實(shí) ; 參考:《山西醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文


【摘要】:目的:觀察芡實(shí)對(duì)糖尿病腎病(diabetic nephropathy, DN)大鼠腎組織中SOCS-3及IGF-1表達(dá)的影響,進(jìn)一步探討芡實(shí)延緩糖尿病腎病進(jìn)展的可能機(jī)制。 方法:健康清潔級(jí)雄性SD大鼠60只,適應(yīng)環(huán)境1周后,用隨機(jī)數(shù)字表法抽取10只為正常對(duì)照組(NC組),其余50只大鼠采用單劑量腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ45mg/Kg)以建立糖尿病大鼠模型,隨機(jī)分為糖尿病腎病組(DN組)、糖尿病腎病+小劑量芡實(shí)治療組(EL組1.5g/kg/d)、糖尿病腎病+中劑量芡實(shí)治療組(EM組3.0g/kg/d)、糖尿病腎病+大劑量芡實(shí)治療組(EH組6.0g/kg/d)及糖尿病腎病+氯沙坦鉀治療組(LP組30mg/kg/d),正常組腹腔注射相同體積不含STZ的檸檬酸鈉緩沖液。造模組大鼠于72h后斷尾測血糖,若血糖值16.7mmol/L,認(rèn)為糖尿病模型成立;3周后測24h尿蛋白定量30mg/d,認(rèn)為DN模型成功。各實(shí)驗(yàn)組給予相應(yīng)劑量藥物灌胃治療,模型組及對(duì)照組給予等體積的蒸餾水灌胃,治療12周。于治療12周末記錄各組大鼠的體重,留取24小時(shí)尿液標(biāo)本及空腹血標(biāo)本,分別用來檢測24小時(shí)尿蛋白定量、血清尿素氮(BUN)及血肌酐(Scr),然后經(jīng)腹腔注射水合氯醛麻醉大鼠,逐層打開腹腔,經(jīng)腹主動(dòng)脈取血,沖洗腎臟至灰黃色,留取腎組織標(biāo)本采用HE染色、Masson染色、PAS染色及電鏡觀察腎組織的病理變化,采用免疫組織化學(xué)法及Western blot技術(shù)檢測各組大鼠腎組織中SOCS-3與IGF-1的表達(dá)及分布情況。 結(jié)果:(1).生化參數(shù)的比較:治療12周末,NC組大鼠血糖、血尿素氮、血肌酐、24h尿蛋白定量均在正常范圍內(nèi)波動(dòng);與NC組相比,,DN組大鼠血尿素氮、血肌酐、24h尿蛋白定量明顯增加(P0.05);與DN組對(duì)比,EM組、EH組及LP組大鼠血尿素氮、血肌酐、24h尿蛋白定量顯著降低(P0.05);(2).腎臟病理改變:12周末,在光鏡、電鏡下可見,NC組大鼠腎小球、腎小管的形態(tài)規(guī)則、結(jié)構(gòu)清晰、均勻分布,未見系膜細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞增殖及纖維組織產(chǎn)生;DN組大鼠的腎組織腎小球結(jié)構(gòu)紊亂,細(xì)胞數(shù)量增多,體積增加,系膜細(xì)胞增生,系膜區(qū)擴(kuò)大、變形,基底膜彌漫性增厚,腎小管官腔增寬,線粒體腫脹;與DN組對(duì)比,LP組、EH組及EM組大鼠腎臟病理改變減輕;(3).SOCS-3、IGF-1表達(dá)情況:12周末,免疫組化及Western blot法測定,與NC組對(duì)比,DN組大鼠腎組織中SOCS-3的表達(dá)增加,IGF-1的表達(dá)顯著升高(P0.05),LP組、EH組及EM組較DN組大鼠腎組織SOCS-3表達(dá)明顯增多、IGF-1表達(dá)明顯下降(P0.05)。結(jié)論:芡實(shí)可減少尿蛋白,保護(hù)腎功能。芡實(shí)可能通過上調(diào)SOCS-3的表達(dá),抑制IGF-1的過表達(dá),從而延緩DN進(jìn)展,發(fā)揮對(duì)腎臟保護(hù)作用。
[Abstract]:Objective: to observe the effect of Euryale coryale on the expression of SOCS-3 and IGF-1 in diabetic nephropathy (DN) rats, and to explore the possible mechanism of delaying the progression of diabetic nephropathy. Methods: 60 healthy and clean male Sprague-Dawley rats were selected as normal control group (NC group) by random digital table method after adapting to the environment for one week. The other 50 rats were treated with single dose injection of STZ45mg / kg) to establish diabetic rat model. They were randomly divided into diabetic nephropathy group (DN group), diabetic nephropathy treated group (EH) with low dose cornstarch seed (DM) group (1.5 g / kg / d), diabetic nephropathy treated group (EM group) (3.0 g / kg 路kg / d), diabetic nephropathy treated group with high dose Euryale seed solid treatment group (6.0 g kg 路kg / d) and diabetic nephropathy (DN). Losartan potassium treatment group and LP group 30 mg / kg / d, normal group intraperitoneal injection of the same volume of sodium citrate buffer without STZ. In the model group, the blood glucose was measured 72 hours later. If the blood glucose value was 16.7 mmol / L, the 24h urine protein was measured 3 weeks after the establishment of the diabetic model, and the DN model was considered to be successful. Each experimental group was treated with the corresponding dose of drugs, and the model group and the control group were given the same volume of distilled water for 12 weeks. The body weight of rats in each group was recorded at the end of the 12th week of treatment. Urine samples and fasting blood samples were collected for 24 hours, respectively, to detect 24 hour urinary protein quantification, serum urea nitrogen bun and serum creatinine, and then intraperitoneal injection of chloral hydrate was used to anesthetize the rats. The abdominal cavity was opened layer by layer, blood was taken from the abdominal aorta, and the kidney was washed to gray-yellow. The pathological changes of renal tissue were observed by HE staining Masson staining and electron microscope. Immunohistochemical method and Western blot technique were used to detect the expression and distribution of SOCS-3 and IGF-1 in rat kidney. The result is that one is one. Comparison of biochemical parameters: blood glucose, blood urea nitrogen, serum creatinine 24 hours urine protein in NC group fluctuated within normal range at the end of 12 weeks, and blood urea nitrogen in DN group was higher than that in NC group. Compared with DN group, serum urea nitrogen and creatinine 24 hours urine protein in EM group and LP group were significantly decreased compared with DN group. At the end of 12 weeks, the glomeruli and renal tubules in the NC group were found to have regular morphology, clear structure, uniform distribution and no Mesangial cells. In the DN group, the glomerular structure of renal tissue in the group of endothelial cell proliferation and fibrous tissue formation was disordered, the number of cells increased, the volume increased, the Mesangial cell proliferated, the Mesangial area expanded, the basement membrane became diffuse thickening, and the renal tubule cavity widened. Compared with DN group, the pathological changes of kidney in LP group, EH group and EM group were reduced. The expression of SOCS-3 IGF-1 was reduced at the end of 12 weeks, and the expression of IGF-1 was determined by immunohistochemistry and Western blot method. Compared with NC group, the expression of SOCS-3 in renal tissue of DN group was significantly increased. The expression of IGF-1 was significantly increased in EH group and EM group than that in DN group. The expression of IGF-1 in kidney tissue of DN group decreased significantly (P 0.05). Conclusion: Euryale can reduce urine protein and protect renal function. Euryale Euryale may inhibit the overexpression of IGF-1 by upregulating the expression of SOCS-3, thus delaying the progression of DN and exerting its protective effect on kidney.
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R587.2;R692

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