本文選題：龍膽水提物 + 膽汁淤積��； 參考：《廣州中醫(yī)藥大學(xué)》2014年碩士論文

【摘要】：目的： 從膽汁酸自身反饋調(diào)節(jié)角度探討龍膽水提物(The aqueous extract of Gentiana scabra Bge. a scabra Bge. a scabra Bge., GA)通過FXR及其靶基因(SHP、NTCP、MRP2、 BSEP和CYP7al)對(duì)α-萘異硫氰酸酯(α-naphthylisothiocyanate, ANIT)誘導(dǎo)的急性肝內(nèi)膽汁淤積模型大鼠護(hù)肝利膽的作用及機(jī)制。 方法： 1.GA的急性毒性考察 將40只KM小鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為4組,即空白對(duì)照組、(48g/kg)GA高劑量組、(24g/kg)GA中劑量組、(12g/kg)GA低劑量組,每組10只,雌雄各半。按40mL/kg灌胃給藥,給藥4h后正常飼養(yǎng),觀察7d。 2.GA對(duì)正常大鼠的利膽作用研究 將40只SD大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為4組,即：空白對(duì)照組、GA高劑量組、GA中劑量組、GA低劑量組,每組10只�？瞻讓�(duì)照組和GA高、中、低劑量組每日一次同一時(shí)間段內(nèi)分別給予生理鹽水和1.2g/kg、0.6g/kg和0.3g/kg GA灌服,連續(xù)給藥7天。末次給藥2h后,使用烏拉坦麻醉大鼠后行膽管插管手術(shù),術(shù)后收集大鼠的膽汁和血液樣品。通過對(duì)膽汁流速；膽汁內(nèi)TBA、TBIL、GSH和DBIL的含量；血清內(nèi)TBA、TBIL和DBIL的含量以及AST、和ALP的活性來評(píng)價(jià)GA對(duì)正常大鼠的影響 3.GA對(duì)ANIT誘導(dǎo)的急性肝內(nèi)膽汁淤積鼠的保肝利膽作用及機(jī)制研究 將60只SD大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為6組,即：模型對(duì)照組、模型組、模型+陽性藥物熊去氧膽酸組(Ursodeoxycholic acid, UDCA)和模型+GA高、中、低劑量組,每組10只,連續(xù)給藥7天。模型對(duì)照組和模型組的大鼠每日一次給予生理鹽水灌服。在實(shí)驗(yàn)的第5天,模型組給予ANIT(100mg/kg)僅一次灌服誘導(dǎo)急性肝內(nèi)膽汁淤積的模型,而模型對(duì)照組給予植物油一次對(duì)照處理,誘導(dǎo)處理2h后均按原劑量繼續(xù)給藥。陽性藥物對(duì)照組每天給予灌服UDCA (60mg/kg),模型+GA高、中、低劑量組每天分別給予GA1.2g/kg、0.6g/kg和0.3g/kg灌服,在實(shí)驗(yàn)的第5天,模型+UDCA組和模型+GA低、中、高劑量組分別給予ANIT(100mg/kg)僅一次灌服誘導(dǎo)急性肝內(nèi)膽汁淤積的模型,誘導(dǎo)處理2h后均按原劑量繼續(xù)給藥。在實(shí)驗(yàn)的第7天(ANIT誘導(dǎo)造模48h后),使用烏拉坦麻醉大鼠后行膽管插管手術(shù),術(shù)后收集大鼠的膽汁,血液和肝組織樣品。通過對(duì)膽汁流速；膽汁內(nèi)TBA、TBIL、GSH和DBIL的含量；血清內(nèi)TBA、TBIL和DBIL的含量以及AST、ALT和ALP的活性；肝組織形態(tài)學(xué)；肝組織中法尼醇受體(Farnesoid X receptor, FXR)、小異源二聚體伴侶(Small heterodimer partner, SHP)、膽固醇7a羥化酶(Cholesterol7a-hydroxylase, CYP7al)、多藥耐藥相關(guān)蛋白2(Multidrug resistance-associated protein2, MRP2)、膽鹽輸出泵(Bile salt export pump, BSEP)和鈉-�；悄懰峁厕D(zhuǎn)運(yùn)蛋白(Na+/taurocholate cotransporting peptide, NTCP)的mRNA的表達(dá)；以及肝臟中BSEP和MRP2蛋白的表達(dá)來對(duì)各組實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行評(píng)價(jià)對(duì)比。 結(jié)果： 1.4組小鼠均存活�？瞻讓�(duì)照組和低劑量組的大鼠給藥后精神、食欲、活動(dòng)無異常；中、高劑量組的大鼠給藥后精神恍惚、行動(dòng)遲緩,4h后恢復(fù)正常。 2.與空白對(duì)照組比較,GA處理組加快了膽汁的流速(P0.05)。與空白對(duì)照組比較,GA處理組血清內(nèi)TBA、TBIL和DBIL的含量以及AST、ALT和ALP的活性無明顯影響改變(P0.05)。 3.與模型對(duì)照組比較,模型組的膽汁流速明顯減緩(P0.05)且膽汁中GSH、TBIL、DBIL和TBA的含量升高(P0.05)；血清中TBIL、DBIL和TBA的含量以及AST、ALP和ALT的活性顯著升高(P0.05)；在肝組織切片內(nèi)可見肝細(xì)胞變性和壞死,中性粒細(xì)胞浸潤；在分子和蛋白表達(dá)方面,肝組織中的NTCP和CYP7a1的mRNA表達(dá)雖略有降低,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),FXR、MRP2、BSEP和SHP的mRNA表達(dá)雖稍見升高,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),BSEP和MRP2蛋白變化與mRNA表達(dá)一致,均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與模型對(duì)照組比較,GA處理組的膽汁流速明顯的加快(P0.05);膽汁中GSH、TBIL、DBIL和TBA的含量升高(P0.05)；血清中的TBIL、DBIL和TBA的含量以及ALT、 AST和ALP的活性顯著降低(P0.05)；肝組織的病理形態(tài)顯著改善；在分子和蛋白表達(dá)方面,肝臟中FXR、SHP、BSEP和MRP2的mRNA表達(dá)升高(P0.005),NTCP和CYP7al的mRNA表達(dá)降低(P0.05),BSEP和MRP2蛋白變化與mRNA表達(dá)一致(P0.05)。 結(jié)論： 1.GA對(duì)小鼠沒有明顯的急性毒性。 2.GA能促進(jìn)大鼠膽汁的分泌及代謝,對(duì)肝功能沒有明顯的影響。 3.GA能緩解ANIT導(dǎo)致的膽汁異常蓄積和返流入血的病變,從而減少黃疸,改善肝功能；GA藥源性的刺激FXR表達(dá)的上調(diào),表達(dá)增強(qiáng)的FXR通過SHP反饋性抑制膽汁酸合成酶CYP7al的表達(dá),減少膽汁酸的合成,激活肝細(xì)胞膜上BSEP和MRP2的轉(zhuǎn)錄,加速膽汁酸從肝細(xì)胞向膽小管的外排轉(zhuǎn)運(yùn)：下調(diào)NTCP的表達(dá),減少膽汁酸的攝入。這可能是GA通過FXR調(diào)控膽汁酸的合成和代謝利膽護(hù)肝的作用機(jī)制之一。
[Abstract]:Objective:
The aqueous extract of Gentiana scabra Bge. a scabra Bge. a scabra, the acute intrahepatic cholestasis model induced by alpha naphthyl isothiocyanate (alpha naphthyl cyanate) in rats was studied from the angle of self feedback regulation of bile acids. The function and mechanism of the bile.
Method錛，

本文編號(hào)：1866498