本文選題：二聯(lián)外膜蛋白 + 嗜水氣單細(xì)胞菌　； 參考：《中國水產(chǎn)科學(xué)》2015年01期

【摘要】：采用鰻鱺源嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)和遲緩愛德華氏菌(Edwardsiella tarda)外膜蛋白基因二聯(lián)表達(dá)產(chǎn)物免疫日本鰻鱺(Anguilla japonica),檢測其對日本鰻鱺免疫功能的影響及其攻毒免疫保護(hù)力。將150尾日本鰻鱺平均分為PBS、細(xì)菌免疫和外膜蛋白免疫3個(gè)組,3組鰻鱺分別以PBS(0.01 mol/L,p H7.4)、嗜水氣單胞菌與遲緩愛德華氏菌二聯(lián)滅活苗(5.0×108 CFU/m L)、嗜水氣單胞菌與遲緩愛德華氏菌外膜蛋白二聯(lián)表達(dá)產(chǎn)物(500μg/m L)腹腔注射0.2 m L。于免疫后14、21和28 d麻醉鰻鱺采血并分離抗凝血。測定3個(gè)時(shí)間點(diǎn)鰻鱺血漿中特異性抗體效價(jià)和同時(shí)期鰻鱺血漿、體表黏液、肝和腎組織勻漿液中的溶菌酶含量,同時(shí)檢測3個(gè)時(shí)間點(diǎn)鰻鱺全血細(xì)胞的轉(zhuǎn)化水平。免疫后28 d,嗜水氣單胞菌和遲緩愛德華氏菌分別腹腔注射感染3組鰻鱺并測定其相對免疫保護(hù)率。結(jié)果表明,免疫后14 d和28 d,滅活菌和外膜蛋白免疫組的抗體水平均極顯著高于PBS組(P0.01)。溶菌酶檢測結(jié)果表明,不同處理組不同時(shí)間段血清、黏液和肝腎組織懸液的溶菌酶含量存在顯著(P0.05)或極顯著(P0.01)差異。免疫后14 d滅活菌組全血細(xì)胞轉(zhuǎn)化水平顯著高于PBS和外膜蛋白組(P0.05),而21 d兩個(gè)免疫組則均顯著低于PBS組(P0.05)。活菌感染結(jié)果表明,滅活菌和外膜蛋白免疫后28 d對兩株病原菌的攻毒相對免疫保護(hù)率均比PBS組提高了50%(P0.05)。本研究結(jié)果表明鰻鱺源嗜水氣單胞菌和遲緩愛德華氏菌外膜蛋白二聯(lián)表達(dá)產(chǎn)物免疫日本鰻鱺后可提高鰻鱺的免疫功能及其對這兩株菌的抵抗力,從而可能應(yīng)用于鰻鱺基因工程疫苗的研發(fā)。
[Abstract]:Anguilla japonica was immunized with the double expression products of outer membrane protein gene of Aeromonas hydrophila and Edwardsiella tarda. 150 Japanese eels (Anguilla japonica) were divided into three groups on average: PBS, bacterial immunization and outer membrane protein immunization. The eels were treated with PBS(0.01 mol-lpH7.4, Aeromonas hydrophila and Edwards tardy inactivated vaccine 5.0 脳 10 ~ 8 CFU/m / L, Aeromonas hydrophila and Edward tardy respectively. The diplex expression product of outer membrane protein was injected intraperitoneally with 0.2 mL of 500 渭 g 路mL ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1). The blood samples were collected and anticoagulant blood was isolated from anaesthetized Anguilla japonica on day 14, 21 and 28 after immunization. The specific antibody titers in plasma of Anguilla japonica and the lysozyme contents in plasma, body surface mucus, liver and kidney homogenate of Anguilla japonica were measured at three time points, and the transformation level of whole blood cells of Anguilla japonica at three time points was also measured. On the 28th day after immunization, Aeromonas hydrophila and Edward's retardation were injected intraperitoneally into three groups of eels, and their relative immune protection rates were measured. The results showed that the antibody levels of inactivated bacteria and outer membrane protein immunized group were significantly higher than that of PBS group on the 14th and 28th day after immunization. The results of lysozyme detection showed that there were significant differences in lysozyme content in serum, mucus and liver and kidney suspension between different treatment groups (P 0.05) or extremely significant (P 0.01). On the 14th day after immunization, the whole blood cell transformation level in inactivated bacteria group was significantly higher than that in PBS group and outer membrane protein group (P0.05A), but on the 21st day, it was significantly lower in both groups than that in PBS group. The results of live bacteria infection showed that the relative immunity protection rate of inactivated bacteria and outer membrane protein against the two pathogens 28 days after immunization was higher than that of PBS group (P 0.05). The results showed that the double expression products of Aeromonas hydrophila and Edwardsiella tarda could improve the immune function of Anguilla japonica and their resistance to the two strains of Anguilla japonica. Therefore, it may be used in the development of genetic engineering vaccine of Anguilla japonica.
【作者單位】： 集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院鰻鱺現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術(shù)教育部工程研究中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31001136)
【分類號(hào)】：S943

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本文編號(hào)：1863736