本文選題：丙泊酚 + Morris水迷宮��； 參考：《上海交通大學》2014年博士論文

【摘要】：第一部分MMP-9在丙泊酚麻醉引起的記憶強化功能受損中的作用 目的：探討丙泊酚麻醉對水迷宮訓練后記憶強化的影響，初步闡明MMP-9在丙泊酚麻醉引起的記憶強化功能受損中的作用。 方法：4月齡雄性成年SD大鼠隨機分為對照組、丙泊酚75mg/kg腹腔注射組和150mg/kg腹腔注射組（n=12/組）。大鼠在渡過適應期后開始水迷宮單一空間記憶訓練（Single Morris water maze training session），訓練結束給予腹腔注射相應劑量的丙泊酚（75mg/kg、150mg/kg）或10%脂肪乳劑（15ml/kg），24小時后進行水迷宮記憶測試（Probe test）。選擇另一批相同月齡的SD大鼠，也隨機分為上述三組，在渡過適應期后開始水迷宮單一空間記憶訓練，訓練結束給予腹腔注射相應劑量的丙泊酚或10%脂肪乳劑，然后分別在注射后1、3、6和12小時采集大鼠的海馬組織標本（n=6/時間點）；對照組、丙泊酚75mg/kg腹腔注射組及150mg/kg腹腔注射組分別對應一個HC（Home cage）組（n=6），HC組的大鼠既不進行水迷宮訓練也不給予丙泊酚或10%脂肪乳劑腹腔注射，僅在鼠籠中同期飼養(yǎng)，然后在相應時間點采集海馬標本用于測定MMP-9基礎值；采用蛋白印跡法測定大鼠海馬組織MMP-9的表達。 結果：①在單一空間記憶訓練階段（即第1-8次訓練），有重復測量數(shù)據(jù)的雙因素方差分析結果顯示大鼠上臺潛伏期在組間無統(tǒng)計學意義（F2,287=0.927，P=0.409），但訓練次數(shù)對大鼠的上臺潛伏期有顯著性影響（F7,287=117.28，P0.001），而組別×訓練次數(shù)的交互作用則無統(tǒng)計學意義（F14，287=0.538，P=0.908）。在訓練結束時（即第8次訓練），大鼠的上臺潛伏期在三組間無顯著性差異（F2,35=0.7851，P=0.3261）。在記憶測試中，大鼠的游泳速度在三組間無顯著性差異（F2,35=0.8527，P=0.477），但150mg/kg丙泊酚麻醉組的大鼠在目標象限的停留時間（18.1±4.6秒）要顯著短于對照組（28.1±5.9秒）（F2,35=5.712，P=0.0038），而75mg/kg丙泊酚麻醉組的大鼠在目標象限的停留時間（26.0±5.3s）與對照組相比則無顯著性差異（P0.05）。②在對照組中，時間點對pro-MMP-9（F4,29=45.4，P0.001）和active-MMP-9（F4,29=37.3，P0.001）蛋白的表達具有顯著性影響；與HC組相比，pro-MMP-9和active-MMP-9在訓練后的3小時、6小時顯著升高（P0.05），在12小時降低到基礎水平。在75mg/kg丙泊酚麻醉組中，pro-MMP-9和active-MMP-9蛋白表達的變化與對照組具有相似的時間變化過程。在150mg/kg丙泊酚麻醉組中，所有時間點pro-MMP-9的表達與HC組相比均無顯著性差異（F4,29=1.588，P=0.216）；在訓練后的3小時active-MMP-9的表達有短暫性的升高（F4,29=7.562，P0.001），但是在訓練后的3小時和6小時pro-MMP-9和active-MMP-9的表達都要顯著低于對照組和75mg/kg丙泊酚麻醉組（P0.05）。 結論：丙泊酚麻醉引起的早期記憶強化功能受損可能與丙泊酚抑制海馬MMP-9的表達有關。 第二部分NF-κB-MMP-9信號通路在術后認知功能障礙中的作用 目的：探討NF-κB-MMP-9信號通路在術后認知功能障礙中的作用。 方法：4月齡雄性Fisher344大鼠隨機分為空白對照組、麻醉組（丙泊酚-丁丙諾啡靜脈麻醉）、麻醉+手術組、PDTC組（在相應時間點腹腔注射50mg/kg的PDTC溶液）和麻醉+手術+PDTC組（在術前30分鐘和術后6小時腹腔注射50mg/kg的PDTC溶液）。①5組大鼠（n=8-13）在術后第7天開始進行Barnes迷宮和條件性恐懼實驗。②5組大鼠（n=5-12）在術后24小時測定大鼠海馬組織內(nèi)炎癥因子（Westernblotting測定IL-1β、IL-6、MMP-9及NF-κB-p65等蛋白的表達）、IgG滲出（免疫組化）及小膠質細胞激活情況（熒光免疫組化測定海馬DG區(qū)和CA3區(qū)Iba-1的表達）。③3組大鼠（空白對照組、麻醉組及麻醉+手術組，，n=6）在行為學后30分鐘（術后20天）測定海馬內(nèi)IL-1β、IL-6等炎癥因子的表達及海馬DG區(qū)和CA3區(qū)Iba-1的表達。 結果：①在空間記憶訓練中，手術創(chuàng)傷對大鼠找到目標洞的時間具有顯著性影響（F1,24=6.544，P=0.017），PDTC處理可消除手術創(chuàng)傷引起的這種效應（F1,3=0.127，P=0.725）。在長期記憶測試中，手術創(chuàng)傷顯著增加大鼠找到目標洞的時間（F4,52=8.75，P0.001），PDTC處理可消除手術創(chuàng)傷所引起的這種效應（P0.05）；在背景恐懼記憶測試中，手術創(chuàng)傷顯著性降低大鼠的呆滯反應時間（F4,52=14.871，P0.001），而PDTC處理可消除手術創(chuàng)傷所引起的這種效應（P0.05）；在聲音恐懼記憶測試中，各因素對大鼠的呆滯反應時間均無顯著性影響（F4,52=1.853，P=0.134）。②手術創(chuàng)傷顯著增加術后24小時大鼠海馬內(nèi)IL-1β（F4,24=29.263，P0.001）、IL-6（F4,24=43.846，P0.001）等炎癥因子的表達、海馬細胞核內(nèi)NF-κB-p65（F4,24=42.694，P0.001）的表達、海馬內(nèi)active-MMP-9（F4,24=49.568，P0.001）的表達、海馬DG區(qū)和CA3區(qū)Iba-1（F4,24=0.127，P0.001；F4,59=13.298，P0.001）的表達及海馬CA3區(qū)血腦屏障的通透性（F4,44=11.687，P0.001），PDTC處理顯著消除手術創(chuàng)傷所引起的這些效應（P0.05）。單純的麻醉和PDTC處理對手術后24小時海馬組織內(nèi)IL-1β、IL-6、active-MMP-9的表達、海馬細胞核內(nèi)NF-κB-p65的表達、海馬DG區(qū)和CA3區(qū)Iba-1的表達、海馬CA3區(qū)血腦屏障的通透性均無顯著性影響（P0.05）。③麻醉和手術創(chuàng)傷對術后遠期（術后20天）大鼠海馬DG區(qū)和CA3區(qū)Iba-1的表達（F2,17=0.341，P=0.716；F2,17=0.38，P=0.69）及海馬組織內(nèi)IL-1β、IL-6等炎癥因子的表達（F2,17=0.444，P=0.65；F2,17=0.26，P=0.775）均無顯著性影響。 結論：手術創(chuàng)傷可導致血腦屏障功能破壞、海馬小膠質細胞激活、神經(jīng)炎癥反應及術后遠期認知功能障礙；丙泊酚-丁丙諾啡靜脈麻醉對血腦屏障功能、海馬小膠質細胞激活、神經(jīng)炎癥反應及術后遠期認知功能均無明顯影響；PDTC可抑制手術創(chuàng)傷引起的血腦屏障功能破壞、海馬小膠質細胞激活和神經(jīng)炎癥反應，并改善術后遠期的認知功能障礙；NF-κB-MMP-9信號通路激活參與手術創(chuàng)傷引起術后認知功能障礙的形成。
[Abstract]:Role of the first part of MMP - 9 in impaired memory - intensive function induced by propofol anesthesia

Objective : To investigate the effect of propofol anesthesia on memory enhancement after water maze training , and to clarify the role of MMP - 9 in the impairment of memory enhancement caused by propofol anesthesia .

Methods : Male adult SD rats were randomly divided into control group , propofol 75 mg / kg abdominal cavity injection group and 150 mg / kg intraperitoneal injection group ( n = 12 / group ) . The rats were given intraperitoneal injection of propofol ( 75 mg / kg , 150 mg / kg ) or 10 % fat emulsion ( 15 ml / kg ) at the end of training , and water maze memory test ( Probe test ) was performed after 24 hours . Another group of SD rats with the same month age was randomly divided into three groups . After crossing the adaptive period , a single spatial memory training of water maze was started , the corresponding dose of propofol or 10 % fat emulsion was injected into the abdominal cavity at the end of training , and then the hippocampal tissue samples of rats were collected 1 , 3 , 6 and 12 hours after injection respectively ( n = 6 / time point ) ;
In the control group , the intraperitoneal injection group and 150 mg / kg intraperitoneal injection group were respectively corresponding to one HC ( Home cage ) group ( n = 6 ) .
The expression of MMP - 9 in hippocampus of rats was determined by Western blot .

Results : 鈶

本文編號：1844979