本文選題：丙泊酚 + Morris水迷宮　； 參考：《上海交通大學(xué)》2014年博士論文

【摘要】：第一部分MMP-9在丙泊酚麻醉引起的記憶強(qiáng)化功能受損中的作用 目的：探討丙泊酚麻醉對(duì)水迷宮訓(xùn)練后記憶強(qiáng)化的影響，初步闡明MMP-9在丙泊酚麻醉引起的記憶強(qiáng)化功能受損中的作用。 方法：4月齡雄性成年SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、丙泊酚75mg/kg腹腔注射組和150mg/kg腹腔注射組（n=12/組）。大鼠在渡過適應(yīng)期后開始水迷宮單一空間記憶訓(xùn)練（Single Morris water maze training session），訓(xùn)練結(jié)束給予腹腔注射相應(yīng)劑量的丙泊酚（75mg/kg、150mg/kg）或10%脂肪乳劑（15ml/kg），24小時(shí)后進(jìn)行水迷宮記憶測(cè)試（Probe test）。選擇另一批相同月齡的SD大鼠，也隨機(jī)分為上述三組，在渡過適應(yīng)期后開始水迷宮單一空間記憶訓(xùn)練，訓(xùn)練結(jié)束給予腹腔注射相應(yīng)劑量的丙泊酚或10%脂肪乳劑，然后分別在注射后1、3、6和12小時(shí)采集大鼠的海馬組織標(biāo)本（n=6/時(shí)間點(diǎn)）；對(duì)照組、丙泊酚75mg/kg腹腔注射組及150mg/kg腹腔注射組分別對(duì)應(yīng)一個(gè)HC（Home cage）組（n=6），HC組的大鼠既不進(jìn)行水迷宮訓(xùn)練也不給予丙泊酚或10%脂肪乳劑腹腔注射，僅在鼠籠中同期飼養(yǎng)，然后在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)采集海馬標(biāo)本用于測(cè)定MMP-9基礎(chǔ)值；采用蛋白印跡法測(cè)定大鼠海馬組織MMP-9的表達(dá)。 結(jié)果：①在單一空間記憶訓(xùn)練階段（即第1-8次訓(xùn)練），有重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)的雙因素方差分析結(jié)果顯示大鼠上臺(tái)潛伏期在組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F2,287=0.927，P=0.409），但訓(xùn)練次數(shù)對(duì)大鼠的上臺(tái)潛伏期有顯著性影響（F7,287=117.28，P0.001），而組別×訓(xùn)練次數(shù)的交互作用則無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F14，287=0.538，P=0.908）。在訓(xùn)練結(jié)束時(shí)（即第8次訓(xùn)練），大鼠的上臺(tái)潛伏期在三組間無顯著性差異（F2,35=0.7851，P=0.3261）。在記憶測(cè)試中，大鼠的游泳速度在三組間無顯著性差異（F2,35=0.8527，P=0.477），但150mg/kg丙泊酚麻醉組的大鼠在目標(biāo)象限的停留時(shí)間（18.1±4.6秒）要顯著短于對(duì)照組（28.1±5.9秒）（F2,35=5.712，P=0.0038），而75mg/kg丙泊酚麻醉組的大鼠在目標(biāo)象限的停留時(shí)間（26.0±5.3s）與對(duì)照組相比則無顯著性差異（P0.05）。②在對(duì)照組中，時(shí)間點(diǎn)對(duì)pro-MMP-9（F4,29=45.4，P0.001）和active-MMP-9（F4,29=37.3，P0.001）蛋白的表達(dá)具有顯著性影響；與HC組相比，pro-MMP-9和active-MMP-9在訓(xùn)練后的3小時(shí)、6小時(shí)顯著升高（P0.05），在12小時(shí)降低到基礎(chǔ)水平。在75mg/kg丙泊酚麻醉組中，pro-MMP-9和active-MMP-9蛋白表達(dá)的變化與對(duì)照組具有相似的時(shí)間變化過程。在150mg/kg丙泊酚麻醉組中，所有時(shí)間點(diǎn)pro-MMP-9的表達(dá)與HC組相比均無顯著性差異（F4,29=1.588，P=0.216）；在訓(xùn)練后的3小時(shí)active-MMP-9的表達(dá)有短暫性的升高（F4,29=7.562，P0.001），但是在訓(xùn)練后的3小時(shí)和6小時(shí)pro-MMP-9和active-MMP-9的表達(dá)都要顯著低于對(duì)照組和75mg/kg丙泊酚麻醉組（P0.05）。 結(jié)論：丙泊酚麻醉引起的早期記憶強(qiáng)化功能受損可能與丙泊酚抑制海馬MMP-9的表達(dá)有關(guān)。 第二部分NF-κB-MMP-9信號(hào)通路在術(shù)后認(rèn)知功能障礙中的作用 目的：探討NF-κB-MMP-9信號(hào)通路在術(shù)后認(rèn)知功能障礙中的作用。 方法：4月齡雄性Fisher344大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、麻醉組（丙泊酚-丁丙諾啡靜脈麻醉）、麻醉+手術(shù)組、PDTC組（在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)腹腔注射50mg/kg的PDTC溶液）和麻醉+手術(shù)+PDTC組（在術(shù)前30分鐘和術(shù)后6小時(shí)腹腔注射50mg/kg的PDTC溶液）。①5組大鼠（n=8-13）在術(shù)后第7天開始進(jìn)行Barnes迷宮和條件性恐懼實(shí)驗(yàn)。②5組大鼠（n=5-12）在術(shù)后24小時(shí)測(cè)定大鼠海馬組織內(nèi)炎癥因子（Westernblotting測(cè)定IL-1β、IL-6、MMP-9及NF-κB-p65等蛋白的表達(dá)）、IgG滲出（免疫組化）及小膠質(zhì)細(xì)胞激活情況（熒光免疫組化測(cè)定海馬DG區(qū)和CA3區(qū)Iba-1的表達(dá)）。③3組大鼠（空白對(duì)照組、麻醉組及麻醉+手術(shù)組，，n=6）在行為學(xué)后30分鐘（術(shù)后20天）測(cè)定海馬內(nèi)IL-1β、IL-6等炎癥因子的表達(dá)及海馬DG區(qū)和CA3區(qū)Iba-1的表達(dá)。 結(jié)果：①在空間記憶訓(xùn)練中，手術(shù)創(chuàng)傷對(duì)大鼠找到目標(biāo)洞的時(shí)間具有顯著性影響（F1,24=6.544，P=0.017），PDTC處理可消除手術(shù)創(chuàng)傷引起的這種效應(yīng)（F1,3=0.127，P=0.725）。在長(zhǎng)期記憶測(cè)試中，手術(shù)創(chuàng)傷顯著增加大鼠找到目標(biāo)洞的時(shí)間（F4,52=8.75，P0.001），PDTC處理可消除手術(shù)創(chuàng)傷所引起的這種效應(yīng)（P0.05）；在背景恐懼記憶測(cè)試中，手術(shù)創(chuàng)傷顯著性降低大鼠的呆滯反應(yīng)時(shí)間（F4,52=14.871，P0.001），而PDTC處理可消除手術(shù)創(chuàng)傷所引起的這種效應(yīng)（P0.05）；在聲音恐懼記憶測(cè)試中，各因素對(duì)大鼠的呆滯反應(yīng)時(shí)間均無顯著性影響（F4,52=1.853，P=0.134）。②手術(shù)創(chuàng)傷顯著增加術(shù)后24小時(shí)大鼠海馬內(nèi)IL-1β（F4,24=29.263，P0.001）、IL-6（F4,24=43.846，P0.001）等炎癥因子的表達(dá)、海馬細(xì)胞核內(nèi)NF-κB-p65（F4,24=42.694，P0.001）的表達(dá)、海馬內(nèi)active-MMP-9（F4,24=49.568，P0.001）的表達(dá)、海馬DG區(qū)和CA3區(qū)Iba-1（F4,24=0.127，P0.001；F4,59=13.298，P0.001）的表達(dá)及海馬CA3區(qū)血腦屏障的通透性（F4,44=11.687，P0.001），PDTC處理顯著消除手術(shù)創(chuàng)傷所引起的這些效應(yīng)（P0.05）。單純的麻醉和PDTC處理對(duì)手術(shù)后24小時(shí)海馬組織內(nèi)IL-1β、IL-6、active-MMP-9的表達(dá)、海馬細(xì)胞核內(nèi)NF-κB-p65的表達(dá)、海馬DG區(qū)和CA3區(qū)Iba-1的表達(dá)、海馬CA3區(qū)血腦屏障的通透性均無顯著性影響（P0.05）。③麻醉和手術(shù)創(chuàng)傷對(duì)術(shù)后遠(yuǎn)期（術(shù)后20天）大鼠海馬DG區(qū)和CA3區(qū)Iba-1的表達(dá)（F2,17=0.341，P=0.716；F2,17=0.38，P=0.69）及海馬組織內(nèi)IL-1β、IL-6等炎癥因子的表達(dá)（F2,17=0.444，P=0.65；F2,17=0.26，P=0.775）均無顯著性影響。 結(jié)論：手術(shù)創(chuàng)傷可導(dǎo)致血腦屏障功能破壞、海馬小膠質(zhì)細(xì)胞激活、神經(jīng)炎癥反應(yīng)及術(shù)后遠(yuǎn)期認(rèn)知功能障礙；丙泊酚-丁丙諾啡靜脈麻醉對(duì)血腦屏障功能、海馬小膠質(zhì)細(xì)胞激活、神經(jīng)炎癥反應(yīng)及術(shù)后遠(yuǎn)期認(rèn)知功能均無明顯影響；PDTC可抑制手術(shù)創(chuàng)傷引起的血腦屏障功能破壞、海馬小膠質(zhì)細(xì)胞激活和神經(jīng)炎癥反應(yīng)，并改善術(shù)后遠(yuǎn)期的認(rèn)知功能障礙；NF-κB-MMP-9信號(hào)通路激活參與手術(shù)創(chuàng)傷引起術(shù)后認(rèn)知功能障礙的形成。
[Abstract]:Role of the first part of MMP - 9 in impaired memory - intensive function induced by propofol anesthesia

Objective : To investigate the effect of propofol anesthesia on memory enhancement after water maze training , and to clarify the role of MMP - 9 in the impairment of memory enhancement caused by propofol anesthesia .

Methods : Male adult SD rats were randomly divided into control group , propofol 75 mg / kg abdominal cavity injection group and 150 mg / kg intraperitoneal injection group ( n = 12 / group ) . The rats were given intraperitoneal injection of propofol ( 75 mg / kg , 150 mg / kg ) or 10 % fat emulsion ( 15 ml / kg ) at the end of training , and water maze memory test ( Probe test ) was performed after 24 hours . Another group of SD rats with the same month age was randomly divided into three groups . After crossing the adaptive period , a single spatial memory training of water maze was started , the corresponding dose of propofol or 10 % fat emulsion was injected into the abdominal cavity at the end of training , and then the hippocampal tissue samples of rats were collected 1 , 3 , 6 and 12 hours after injection respectively ( n = 6 / time point ) ;
In the control group , the intraperitoneal injection group and 150 mg / kg intraperitoneal injection group were respectively corresponding to one HC ( Home cage ) group ( n = 6 ) .
The expression of MMP - 9 in hippocampus of rats was determined by Western blot .

Results : 鈶

本文編號(hào)：1844979