GLP-1通路在電針胃脘下俞改善骨骼肌胰島素抵抗中的機(jī)制研究
本文選題:電針 + 骨骼肌。 參考:《北京中醫(yī)藥大學(xué)》2016年博士論文
【摘要】:目的:本研究旨在觀察電針“胃脘下俞"穴對(duì)2型糖尿病動(dòng)物血糖、血脂、胰島素抵抗?fàn)顩r等基礎(chǔ)指標(biāo)的干預(yù)作用的基礎(chǔ)上,探討電針可能的起效途徑;以神經(jīng)節(jié)段支配理論解釋電針“胃脘下俞”等背俞穴的干預(yù)效果,從神經(jīng)解剖學(xué)角度對(duì)背俞穴主治功能規(guī)律提出解釋,并探討胰高血糖素樣肽1 (glucagon-like peptide-1, GLP-1)-環(huán)磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)-磷脂酰肌醇3激酶(Phosphatidylinositol-3-Kinase, PI3K)-葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(glucose transporter4, GLUT4)通路在電針干預(yù)2型糖尿病大鼠骨骼肌胰島素抵抗中的作用,為針灸治療2型糖尿病的臨床實(shí)踐提供依據(jù)。方法:研究以高糖高脂飼料喂養(yǎng)結(jié)合小劑量鏈脲佐菌素(streptozotocin, STZ)腹腔注射制備2型糖尿病動(dòng)物模型,將成模動(dòng)物分為模型組、電針“胃脘下俞”組、電針“心俞”組、電針“腎俞”組、電針“后三里”組(n=12)。以2Hz,2mA低頻電針刺激相應(yīng)穴位,20min/次,6次/周,4周進(jìn)行干預(yù)。于干預(yù)前及每周干預(yù)結(jié)束后檢測(cè)各組動(dòng)物空腹血糖,觀察電針對(duì)2型糖尿病動(dòng)物血糖的調(diào)控規(guī)律;于干預(yù)前及全部干預(yù)結(jié)束后進(jìn)行口服葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)(oral glucose tolerance test, OGTT),計(jì)算OGTT曲線下面積,觀察電針對(duì)模型動(dòng)物糖耐受的調(diào)控;于全部干預(yù)結(jié)束后以戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉大鼠,腹主動(dòng)脈取血致死,分離血清檢測(cè)總膽固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、胰高血糖素樣肽1含量;取胰腺制備石蠟切片進(jìn)行HE染色及Masson染色,觀察電針對(duì)胰島及B細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的影響;取胰腺及股四頭肌,western blot法檢測(cè)GLP-1受體蛋白表達(dá),以及cAMP、PI3K (Y607)、GLUT4在骨骼肌中蛋白表達(dá),驗(yàn)證研究假設(shè)的骨骼肌GLP-1-cAMP-PI3K-GLUT4通路在電針干預(yù)2型糖尿病及骨骼肌胰島素抵抗中的作用。結(jié)果:各種電針干預(yù)均能產(chǎn)生降血糖作用。其中,電針“胃脘下俞”組可在干預(yù)第3、第4周末顯著降低模型動(dòng)物空腹血糖(P0.01,P0.05),電針“心俞”組可在干預(yù)第2、第3周末顯著降低模型動(dòng)物空腹血糖(P0.05,P0.01)。電針“胃脘下俞”還可以顯著降低模型動(dòng)物血清總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、三酰甘油含量(PO.01,P0.01, P0.01), OGTT曲線下面積(P0.05),以及胰島素抵抗指數(shù)(P0.01)。對(duì)電針的上述干預(yù)效果的機(jī)理研究顯示,電針可降低模型動(dòng)物顯著升高的血漿活性GLP-1含量,顯著增高模型動(dòng)物驟減的胰腺GLP-1受體蛋白表達(dá)(P0.05),降低其激增的骨骼肌GLP-1受體蛋白表達(dá)(P0.01),并對(duì)骨骼肌中GLP-1信號(hào)的下游指標(biāo)PI3K (Y607)及GLUT4產(chǎn)生有效的良性調(diào)節(jié)作用。結(jié)論:本研究以高糖高脂飼料喂養(yǎng)結(jié)合小劑量STZ腹腔注射的造模方法能很好地模擬2型糖尿病患者高血糖、高血脂以及胰島素抵抗癥狀。電針“胃脘下俞"可以顯著降低模型動(dòng)物激增的血糖、血脂指標(biāo)。其對(duì)2型糖尿病的干預(yù)主要通過(guò)改善胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)實(shí)現(xiàn)。電針“胃脘下俞”對(duì)骨骼肌胰島素抵抗的改善一部分通過(guò)上調(diào)骨骼肌PI3K-GLUT4通路活性實(shí)現(xiàn),但該段通路的啟動(dòng)與GLP-1信號(hào)關(guān)聯(lián)性不強(qiáng),應(yīng)涉及其它通路的調(diào)控,即研究所假設(shè)的GLP-1-cAMP-PI3K-GLUT4通路存在進(jìn)一步改進(jìn)的空間。電針“心俞”和電針“腎俞”對(duì)血糖和血脂等基礎(chǔ)指標(biāo)有一定的改善作用,可對(duì)其中部分指標(biāo)產(chǎn)生顯著的良性調(diào)節(jié)。其中,電針“心俞”穴主要通過(guò)改善胰島及B細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)干預(yù)2型糖尿病的作用,電針“腎俞"側(cè)重于調(diào)控胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)。在本研究所選穴位當(dāng)中,干預(yù)作用由強(qiáng)到弱依次為胃脘下俞、心俞、腎俞、后三里,上述穴位在降糖作用的起效時(shí)間、作用強(qiáng)度、效果維持時(shí)間上各不相同,其起效機(jī)理存在一定差異,臨床治療2型糖尿病時(shí)可以根據(jù)各穴位的作用特點(diǎn)聯(lián)合應(yīng)用,優(yōu)化療效。
[Abstract]:Objective : To study the effect of electroacupuncture on insulin resistance in rats with type 2 diabetes mellitus . The effects of electroacupuncture on insulin resistance in rats with type 2 diabetes mellitus were studied . The effect of electroacupuncture on insulin resistance in skeletal muscle of rats with type 2 diabetes mellitus was explained . The effects of glucagon - like peptide - 1 ( GLP - 1 ) - cyclic adenosine monophosphate ( cAMP ) - phosphoinositide 3 - kinase ( GLUT4 ) pathway on insulin resistance in rats with type 2 diabetes mellitus were studied .
Oral glucose tolerance test ( OGTT ) was performed before and after all intervention , and the area under OGTT curve was calculated , and the regulation of glucose tolerance in model animal was observed .
The total cholesterol , triglyceride , high density lipoprotein cholesterol , low density lipoprotein cholesterol and glucagon - like peptide 1 were detected by intraperitoneal injection of sodium opental into abdominal aorta after all intervention .
The paraffin sections were stained with HE and eosin staining to observe the effect of electroacupuncture on the structure and function of islet and B cells .
The expression of GLP - 1 receptor protein was detected by western blot , and the effects of cAMP , K 3 K ( Y607 ) and GLUT4 on insulin resistance of skeletal muscle were studied . In this study , the effect of electroacupuncture on insulin resistance of rats was studied by improving the expression of GLP - 1 receptor protein in skeletal muscle ( P0.05 ) .
【學(xué)位授予單位】:北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R245
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1732758
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