GLP-1通路在電針胃脘下俞改善骨骼肌胰島素抵抗中的機制研究
本文選題:電針 + 骨骼肌。 參考:《北京中醫(yī)藥大學》2016年博士論文
【摘要】:目的:本研究旨在觀察電針“胃脘下俞"穴對2型糖尿病動物血糖、血脂、胰島素抵抗狀況等基礎指標的干預作用的基礎上,探討電針可能的起效途徑;以神經(jīng)節(jié)段支配理論解釋電針“胃脘下俞”等背俞穴的干預效果,從神經(jīng)解剖學角度對背俞穴主治功能規(guī)律提出解釋,并探討胰高血糖素樣肽1 (glucagon-like peptide-1, GLP-1)-環(huán)磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)-磷脂酰肌醇3激酶(Phosphatidylinositol-3-Kinase, PI3K)-葡萄糖轉運蛋白4(glucose transporter4, GLUT4)通路在電針干預2型糖尿病大鼠骨骼肌胰島素抵抗中的作用,為針灸治療2型糖尿病的臨床實踐提供依據(jù)。方法:研究以高糖高脂飼料喂養(yǎng)結合小劑量鏈脲佐菌素(streptozotocin, STZ)腹腔注射制備2型糖尿病動物模型,將成模動物分為模型組、電針“胃脘下俞”組、電針“心俞”組、電針“腎俞”組、電針“后三里”組(n=12)。以2Hz,2mA低頻電針刺激相應穴位,20min/次,6次/周,4周進行干預。于干預前及每周干預結束后檢測各組動物空腹血糖,觀察電針對2型糖尿病動物血糖的調控規(guī)律;于干預前及全部干預結束后進行口服葡萄糖耐量實驗(oral glucose tolerance test, OGTT),計算OGTT曲線下面積,觀察電針對模型動物糖耐受的調控;于全部干預結束后以戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉大鼠,腹主動脈取血致死,分離血清檢測總膽固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、胰高血糖素樣肽1含量;取胰腺制備石蠟切片進行HE染色及Masson染色,觀察電針對胰島及B細胞結構和功能的影響;取胰腺及股四頭肌,western blot法檢測GLP-1受體蛋白表達,以及cAMP、PI3K (Y607)、GLUT4在骨骼肌中蛋白表達,驗證研究假設的骨骼肌GLP-1-cAMP-PI3K-GLUT4通路在電針干預2型糖尿病及骨骼肌胰島素抵抗中的作用。結果:各種電針干預均能產(chǎn)生降血糖作用。其中,電針“胃脘下俞”組可在干預第3、第4周末顯著降低模型動物空腹血糖(P0.01,P0.05),電針“心俞”組可在干預第2、第3周末顯著降低模型動物空腹血糖(P0.05,P0.01)。電針“胃脘下俞”還可以顯著降低模型動物血清總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、三酰甘油含量(PO.01,P0.01, P0.01), OGTT曲線下面積(P0.05),以及胰島素抵抗指數(shù)(P0.01)。對電針的上述干預效果的機理研究顯示,電針可降低模型動物顯著升高的血漿活性GLP-1含量,顯著增高模型動物驟減的胰腺GLP-1受體蛋白表達(P0.05),降低其激增的骨骼肌GLP-1受體蛋白表達(P0.01),并對骨骼肌中GLP-1信號的下游指標PI3K (Y607)及GLUT4產(chǎn)生有效的良性調節(jié)作用。結論:本研究以高糖高脂飼料喂養(yǎng)結合小劑量STZ腹腔注射的造模方法能很好地模擬2型糖尿病患者高血糖、高血脂以及胰島素抵抗癥狀。電針“胃脘下俞"可以顯著降低模型動物激增的血糖、血脂指標。其對2型糖尿病的干預主要通過改善胰島素抵抗狀態(tài)實現(xiàn)。電針“胃脘下俞”對骨骼肌胰島素抵抗的改善一部分通過上調骨骼肌PI3K-GLUT4通路活性實現(xiàn),但該段通路的啟動與GLP-1信號關聯(lián)性不強,應涉及其它通路的調控,即研究所假設的GLP-1-cAMP-PI3K-GLUT4通路存在進一步改進的空間。電針“心俞”和電針“腎俞”對血糖和血脂等基礎指標有一定的改善作用,可對其中部分指標產(chǎn)生顯著的良性調節(jié)。其中,電針“心俞”穴主要通過改善胰島及B細胞形態(tài)和結構實現(xiàn)干預2型糖尿病的作用,電針“腎俞"側重于調控胰島素抵抗狀態(tài)。在本研究所選穴位當中,干預作用由強到弱依次為胃脘下俞、心俞、腎俞、后三里,上述穴位在降糖作用的起效時間、作用強度、效果維持時間上各不相同,其起效機理存在一定差異,臨床治療2型糖尿病時可以根據(jù)各穴位的作用特點聯(lián)合應用,優(yōu)化療效。
[Abstract]:Objective : To study the effect of electroacupuncture on insulin resistance in rats with type 2 diabetes mellitus . The effects of electroacupuncture on insulin resistance in rats with type 2 diabetes mellitus were studied . The effect of electroacupuncture on insulin resistance in skeletal muscle of rats with type 2 diabetes mellitus was explained . The effects of glucagon - like peptide - 1 ( GLP - 1 ) - cyclic adenosine monophosphate ( cAMP ) - phosphoinositide 3 - kinase ( GLUT4 ) pathway on insulin resistance in rats with type 2 diabetes mellitus were studied .
Oral glucose tolerance test ( OGTT ) was performed before and after all intervention , and the area under OGTT curve was calculated , and the regulation of glucose tolerance in model animal was observed .
The total cholesterol , triglyceride , high density lipoprotein cholesterol , low density lipoprotein cholesterol and glucagon - like peptide 1 were detected by intraperitoneal injection of sodium opental into abdominal aorta after all intervention .
The paraffin sections were stained with HE and eosin staining to observe the effect of electroacupuncture on the structure and function of islet and B cells .
The expression of GLP - 1 receptor protein was detected by western blot , and the effects of cAMP , K 3 K ( Y607 ) and GLUT4 on insulin resistance of skeletal muscle were studied . In this study , the effect of electroacupuncture on insulin resistance of rats was studied by improving the expression of GLP - 1 receptor protein in skeletal muscle ( P0.05 ) .
【學位授予單位】:北京中醫(yī)藥大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R245
【參考文獻】
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,本文編號:1732758
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