本文選題：myomiRs　切入點：血漿　出處：《南京體育學院》2017年碩士論文

【摘要】：研究目的:長期有規(guī)律的運動能夠促使人體產(chǎn)生生物適應,促進和維持身體健康。離心運動(eccentric exercise,ECC)指肌肉在離心工作時承受額外負荷,產(chǎn)生抗重力和制動的動作,發(fā)揮制動作用。由于ECC生理學和機械學上的諸多特性,例如眾所周知的ECC能夠產(chǎn)生更大的肌力以及ECC特異性的心肺和代謝反應。ECC是改善健康人和運動員的肌肉力量和運動能力的經(jīng)典運動方式,同時也在康復鍛煉和臨床上也越來越多地被采用。此外,長期周期性訓練計劃中包含更多的ECC訓練可能是提高競技能力的一個很有前景的訓練手段和策略。但是目前對于ECC作用的生理學適應機制仍然不清楚。micro RNAs(miRNAs)是一類長度約為22nt的小分子非編碼RNA,在轉(zhuǎn)錄后水平的基因調(diào)控中發(fā)揮重要的生理學作用,在骨骼肌生成、增殖、分化、凋亡等過程中發(fā)揮調(diào)控作用,作為一類新的調(diào)控分子,可能參與ECC誘導的生物學適應,提供新的角度理解ECC給機體帶來的影響。因此,本課題選定7種肌肉特異性的miRNAs,目的是從miRNAs的角度研究ECC的諸多好處,從分子層面理解ECC,并且探索miRNAs可潛在的作為ECC的生物標志物。研究方法:選用8周齡健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠80只,體重280±15g,隨機分為安靜組(rest)、運動后即刻組(0h)、1小時組(1h)、24小時組(24h)和48小時組(48h)。安靜組不參加運動,0h、1h、24h和48h組進行急性下坡跑運動。跑臺的坡度為-16°,速度為20m/min,時間90min。在各個時間點麻醉大鼠,腹腔取血5ml,后取右側(cè)腿腓腸肌、比目魚肌、股四頭肌和心肌。利用實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(q RT-PCR)檢測選定的幾種肌肉特異性miRNAs(myomiRs)(miR-1、miR-133a、miR-133b、miR-206、miR-208a、miR-208b和miR-499)水平在血漿、血漿外泌體(exosome)和肌肉中變化情況。研究結果:在ECC后,血漿中幾種肌肉特異性miRNAs都有不同程度的應答,而在選定的四種肌肉組織中,只有腓腸肌中miR-1和miR-133b水平發(fā)生變化,同時,血漿exosome中也發(fā)現(xiàn)了5種miRNAs對運動有不同程度的應答,運動后miR-133a水平在血漿中和血漿exosome中變化趨勢相似,ECC后24h腓腸肌miR-133b水平較安靜組顯著上升,而血漿和血漿exosome中卻呈現(xiàn)相反趨勢。結論:ECC后miR-1在血漿、exosome和腓腸肌中變化趨勢一致;miR-133a水平在四種組織中沒有變化,但在血漿和exosome中都在ECC后升高;腓腸肌中與血漿中miR-133b水平變化呈現(xiàn)相反趨勢,但腓腸肌中miR-133b與exosome中變化趨勢相似,都在運動后24h達到最高。這些都提示miR-1、miR-133a和miR-133b作為ECC潛在生物標志物,在ECC帶來的各種生物適應中發(fā)揮重要作用。
[Abstract]:Research objective: Long-term regular exercise can promote biological adaptation, promote and maintain good health. Centrifugal exercise exercise is the action of resisting gravity and braking when muscles bear extra load during centrifugal work. Play a role in braking. Because of the physiological and mechanical properties of ECC, For example, ECC is known to produce greater muscle strength and ECC specific cardiopulmonary and metabolic responses. ECC is a classic exercise way to improve muscle strength and exercise ability in healthy people and athletes. At the same time, it is also used more and more in rehabilitation exercise and clinical practice. In addition, More ECC training in long-term periodic training plan may be a promising training method and strategy to improve competitive ability. However, the physiological adaptation mechanism of ECC effect is still unclear. Micro RN AsmiRNs is a kind of training method and strategy. Small non-coding RNAs, which are about the length of 22nt, play an important physiological role in gene regulation at post-transcriptional level. It plays a regulatory role in skeletal muscle formation, proliferation, differentiation and apoptosis. As a new class of regulatory molecules, it may participate in the biological adaptation induced by ECC and provide a new perspective to understand the effects of ECC on the body. In this paper, seven muscle-specific miRNAss were selected to study the benefits of ECC from the point of view of miRNAs. To understand Ecc at the molecular level and to explore the potential biomarker of miRNAs as a biomarker of ECC, 80 healthy male Sprague-Dawley SD rats aged 8 weeks were selected. The body weight was 280 鹵15g, which was randomly divided into quiet group (0 h / h) and 48 hour group (24 h) and 48 h group respectively. The rest group did not take part in the exercise for 24 h and 48 h for acute downhill running. The slope of the platform was -16 擄, the speed was 20 m / min, and the time was 90 min. Anesthetized rats at a point in time, 5 ml of blood was taken from abdominal cavity, then from right leg gastrocnemius muscle, soleus muscle, quadriceps femoris muscle and myocardium. The specific miR-1 miR-133amiR-133bmiR-206miR-208amiR-208b and miR-499b were detected in plasma by real-time fluorescence quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction (qRT-PCRR). Changes in plasma exosome and muscle. Results: after ECC, several muscle-specific miRNAs in plasma had varying degrees of response, while in the four selected muscle tissues, only miR-1 and miR-133b levels in gastrocnemius muscle changed, and at the same time, It was also found in plasma exosome that five miRNAs had different degree of response to exercise. The changes of miR-133a level in plasma and exosome were similar after exercise. The miR-133b level of gastrocnemius muscle was significantly higher than that of quiet group at 24 h after exercise. Conclusion the change trend of miR-1 in plasma exosome and gastrocnemius muscle is the same in plasma and gastrocnemius muscle. The level of miR-133a does not change in four tissues, but it is increased in both plasma and exosome after ECC. The change of miR-133b level in gastrocnemius muscle and plasma showed the opposite trend, but the change trend of miR-133b in gastrocnemius muscle was similar to that in exosome, and reached the highest at 24 hours after exercise. All these suggested that miR-1 miR-133a and miR-133b were potential biomarkers of ECC. Play an important role in various biological adaptation brought about by ECC.
【學位授予單位】：南京體育學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：G804.7

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