本文選題：糖尿病　切入點(diǎn)：糖尿病視網(wǎng)膜病變　出處：《蘭州大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：研究目的:本研究通過分析葛根素對(duì)糖尿病大鼠血清及視網(wǎng)膜組織中AGE-修飾蛋白表達(dá)水平的影響,為臨床上糖尿病視網(wǎng)膜病變的診斷和治療探索新的分子生物學(xué)機(jī)制。研究方法:1.SPF級(jí)成年雄性SD大鼠150只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組1月、3月組(N1,N3)、DM 1月、3月組(D1,D3)、葛根素干預(yù)1月、3月組(P1,P3),每組25只。2.通過2%鏈脲佐菌素(STZ)予以大鼠腹腔注射,建立DM大鼠模型,55mg/kg。對(duì)照組給予同等劑量的檸檬酸緩沖液腹腔注射。注射后3天后,及1周后大鼠尾靜脈分別取血,測(cè)定其空腹血糖,若兩次均≥16.7mmol/L則視為DM造模成功。葛根素干預(yù)組大鼠予以葛根素(80mg/kg/d)灌胃。3.造模成功后,于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)(灌胃開始1月、3月后)用10%水合氯醛麻醉大鼠,從心臟取血獲得標(biāo)本,低溫下迅速分離視網(wǎng)膜組織,部分樣品固定后在光鏡及電鏡下進(jìn)行觀察,其余標(biāo)本-80℃低溫保存。4.分離各組大鼠血清,自備視網(wǎng)膜勻漿,ELISA法分析各組大鼠視網(wǎng)膜及血清中AGE-修飾蛋白的總濃度。5.1-DE/Western分離各組大鼠視網(wǎng)膜及血清中AGE-修飾蛋白。Image Lab軟件分析分組大鼠血清及視網(wǎng)膜中AGE-修飾蛋白表達(dá)水平,ANOVA比較各組大鼠視網(wǎng)膜及血清中AGE-修飾蛋白表達(dá)水平的差異,P0.05視為有顯著性差異。研究結(jié)果:1.糖尿病組大鼠(D1,D3)、葛根素干預(yù)組大鼠(P1,P3)體重均顯著低于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),D1組與D3組、P1組與P3組,及糖尿病組與葛根素干預(yù)組之間大鼠體重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.糖尿病組大鼠(D1,D3)、葛根素干預(yù)組大鼠(P1,P3)血糖均高于正常對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),相同時(shí)間點(diǎn)時(shí),糖尿病組血糖升高較葛根素干預(yù)組血糖更高(D1vs P1:27.90±1.79 vs 25.39±2.45;D3vs P3:30.33±1.69vs 25.54±2.00,P0.05)。D3組大鼠血糖水平顯著高于其余各組(P0.05),P1與P3組間血糖水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。3.視網(wǎng)膜病理形態(tài)學(xué)改變:正常組大鼠(N1、N3)與D1組、P1組間無明顯差異。D3組病變最為嚴(yán)重,視網(wǎng)膜各層細(xì)胞數(shù)量減少、排列紊亂,細(xì)胞器結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重;毛細(xì)血管出現(xiàn)嚴(yán)重的擴(kuò)張充血現(xiàn)象。P3組病變較D3組有所減輕。4.ELISA定量大鼠血清及視網(wǎng)膜中AGE-修飾蛋白濃度。糖尿病組大鼠(D1,D3)、葛根素干預(yù)組大鼠(P1,P3)血清中AGE-修飾蛋白濃度均顯著高于正常對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。D3組大鼠血清中AGE-修飾蛋白濃度顯著高于D1組大鼠(P0.05)。D1組與P1組大鼠視網(wǎng)膜中AGE-修飾蛋白濃度無統(tǒng)計(jì)性差異(P0.05),D3組大鼠視網(wǎng)膜組織中AGE-修飾蛋白濃度顯著高于P3組大鼠(P0.05)。5.1-DE/Western共分離出5種差異性表達(dá)的血清AGE-修飾蛋白。糖尿病組大鼠(D1、D3)、葛根素干預(yù)組大鼠(P1、P3)上述5種血清AGE-修飾蛋白表達(dá)量均顯著高于正常對(duì)照組大鼠(N1、N3),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.05)。其中2種AGE-修飾蛋白D1組的表達(dá)量顯著高于P1組(P0.05),3種AGE-修飾蛋白D3組的表達(dá)量均顯著高于P3組(P0.05)。6.1-DE/Western在視網(wǎng)膜組織中共分離出4種差異性表達(dá)的AGE-修飾蛋白,其中3種AGE-修飾蛋白在糖尿病組大鼠(D1,D3)、葛根素干預(yù)組大鼠(P1,P3)均顯著高于正常對(duì)照組大鼠(N1,N3),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4種AGE-修飾蛋白的表達(dá)量在D3組均顯著高于P3組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但D1組與P1組之間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。研究結(jié)論:1.糖尿病大鼠血清及視網(wǎng)膜組織中AGE-修飾蛋白的表達(dá)水平顯著上調(diào),且隨著糖尿病病程的延長(zhǎng),AGE-修飾蛋白的表達(dá)水平增加。2.葛根素干預(yù)可以降低糖尿病大鼠血糖水平,改善糖尿病大鼠視網(wǎng)膜組織的病理學(xué)損害。3.葛根素干預(yù)可降低糖尿病大鼠血清及視網(wǎng)膜組織中AGE-修飾蛋白的總濃度,下調(diào)血清及視網(wǎng)膜組織中一些AGE-修飾蛋白的表達(dá)水平,其作用的強(qiáng)度與作用時(shí)間密切相關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R587.2;R774.1

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本文編號(hào)：1650398