本文選題：瑞芬太尼　切入點(diǎn)：痛覺過敏　出處：《天津醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:阿片類藥物是全身麻醉過程中首選的鎮(zhèn)痛藥物,但臨床研究發(fā)現(xiàn),其在發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的同時,會引起患者對傷害性刺激的感受增強(qiáng),即阿片類藥物誘發(fā)的痛覺過敏(OIH)。瑞芬太尼作為一種μ-阿片受體激動劑,其起效快、半衰期短、代謝不依賴肝腎功能,在全身麻醉維持過程中應(yīng)用廣泛。經(jīng)證實(shí),瑞芬太尼誘發(fā)痛覺過敏發(fā)生的概率遠(yuǎn)高于其他阿片類藥物。作為α2腎上腺素受體(α2AR)高度選擇性的激動劑,右美托咪定具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抗焦慮等諸多作用,是理想的麻醉輔助用藥。一些臨床研究發(fā)現(xiàn),右美托咪定對OIH有一定的預(yù)防作用,但具體機(jī)制尚不清楚。本研究通過評價右美托咪定引起瑞芬太尼痛覺過敏大鼠脊髓NMDA受體的亞基表達(dá)、亞基運(yùn)輸、功能和PKCγ、CaMKⅡα表達(dá)及磷酸化水平的變化,探討右美托咪定對瑞芬太尼痛覺過敏的影響及可能的機(jī)制。方法:第一部分:尾靜脈置管成功的雄性SD大鼠96只,隨機(jī)分為6組(n=16):空白對照組(C組)、瑞芬太尼組(R組)、切口痛組(I組)、右美托咪定組(D組)、瑞芬太尼+切口痛組(R+I組)、右美托咪定+瑞芬太尼+切口痛組(D+R+I組)。切口痛模型采用足底切口的方法制備。瑞芬太尼以1.2μg· kg-1 · min-1的速度經(jīng)尾靜脈輸注90min。右美托咪定于術(shù)前30min經(jīng)皮下注射,劑量為50μg/kg。分別于輸注前24h(T0)、輸注后2h、6h、24h和48h(T1-4)測定縮足潛伏期(PWL)和縮足閾值(PWT)。行為學(xué)測試完成后處死大鼠,取脊髓L4-6節(jié)段。采用western blot法測定脊髓膜蛋白(m)及總蛋白(t)NMDA受體NR1、NR2A和NR2B亞基的表達(dá),并計(jì)算mNR1/tNR1、mNR2A/tNR2A及mNR2B/tNR2B的比值。采用免疫組織化學(xué)法檢測脊髓背角NR1、NR2A和NR2B亞基的表達(dá)。第二部分:雄性SD幼鼠48只,隨機(jī)分為6組(n=8):空白對照組(C組)、瑞芬太尼組(R組)、右美托咪定組(D組)、右美托咪定+瑞芬太尼組1、2、3(D1、D2、D3組)。取腰段脊髓,制備脊髓切片并孵育。C組置于人工腦脊液(ACSF)中孵育90min; R組置于含4nM瑞芬太尼的ACSF中孵育90min; D組置于含4nM右美托咪定的ACSF中孵育90min; D1、D2、D3組分別置于含4nM瑞芬太尼及2nM、4nM、6nM右美托咪定的ACSF中孵育90min。采用全細(xì)胞膜片鉗檢測脊髓背角神經(jīng)元NMDA受體介導(dǎo)的微小興奮性突觸后膜電流(mEPSCs)的振幅與時間間隔。第三部分:尾靜脈置管成功的雄性SD大鼠40只,隨機(jī)分為5組(n=8):空白對照組(C組)、瑞芬太尼+切口痛組(R+I組)、右美托咪定+瑞芬太尼+切口痛組(D+R+I組)、右美托咪定+瑞芬太尼+切口痛+佛波醇酯(PMA)+二甲基亞砜(DMSO)組(D+R+I+P+DMSO組)、右美托咪定+瑞芬太尼+切口痛+DMSO組(D+R+I+DMSO組)。切口痛模型采用足底切口的方法制備。瑞芬太尼以1.2μg· kg-1 · min-1的速度經(jīng)尾靜脈輸注90min。右美托咪定于術(shù)前30min經(jīng)皮下注射,劑量為50μg/kg。PMA和DMSO均為鞘內(nèi)注射,劑量為10μl。分別于輸注前24h(T0)、輸注后2h、6h、24h和48h(T1～4)測定PWL值和PWT值。行為學(xué)測試完成后處死大鼠,取脊髓L4-6節(jié)段。采用western b1ot法測定脊髓PKCγ和CaMK Ⅱ α的表達(dá)及磷酸化水平。結(jié)果:第一部分:與C組比較,除T0外,除D組外的其余各組PWL縮短、PWT降低,mNR1、tNR1、mNR2B、tNR2B 的表達(dá)上調(diào),mNR1/tNR1 及 mNR2B/tNR2B比值增加(P0.01)。與R組或Ⅰ組或D組比較,除T0外,R+I組PWL縮短、PWT 降低,mNR1、tNR1、mNR2B、tNR2B 的表達(dá)上調(diào),mNR1/tNR1 及mNR2B/tNR2B比值增加(P0.01)。與R+I組比較,除T0外,D+R+I組PWL延長、PWT 升高,mNR1、tNR1、mNR2B、tNR2B 的表達(dá)下調(diào),mNR1/tNR1 及mNR2B/tNR2B 比值下降(P 0.01)。而各組 mNR2A、tNR2A 表達(dá)及mNR2A/tNR2A比值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。第二部分:與C組比較,R、D1、D2、D3組mEPSCs的振幅增大、時間間隔減小(P0.01)。與R組比較,D1、D2、D3組mEPSCs的振幅減小、時間間隔增大(P0.01)。與D1組比較,D2、D3組mEPSCs的振幅減小、時間間隔增大(P0.01)。與D2組比較,D3組mEPSCs的振幅減小、時間間隔增大(P0.01)。第三部分:與C組比較,除T0外,其余各組PWL縮短、PWT降低,PKCγ、CaMKⅡα及pCaMKⅡα表達(dá)上調(diào)(P0.01)。與R+I組比較,除To外,D+R+I組、D+R+I+DMSO 組 PWL 延長、PWT 升高,PKCγ、CaMKⅡα及 pCaMKⅡα表達(dá)下調(diào)(P0.01)。與 D+R+I 組比較,除 To 外,D+R+I+P+DMSO 組 PWL 縮短、PWT 降低,PKCy、CaMK Ⅱ α 及 pCaMK Ⅱ α 表達(dá)上調(diào)(P 0.01)。與D+R+I+P+DMSO 組比較,除T0 外,D+R+I+DMSO 組 PWL 延長、PWT 升高,PKCγ、CaMK Ⅱ α及 pCaMK Ⅱ α表達(dá)下調(diào)(P0.01)。結(jié)論:輸注右美托咪定可引起瑞芬太尼痛覺過敏大鼠脊髓NMDA受體NR1和NR2B亞基的表達(dá)以及由胞漿向胞膜的運(yùn)輸減少、PKCγ和CaMKⅡα的表達(dá)及磷酸化減少;右美托咪定可劑量依賴性減弱由瑞芬太尼引起的脊髓背角NMDA受體電生理功能的增強(qiáng),這些變化可能與右美托咪定預(yù)防瑞芬太尼痛覺過敏的機(jī)制相關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R614

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1613602