兩種方法DVT模型的建立與GP1b-α在DVT模型中表達(dá)變化及其意義的相關(guān)性研究
本文選題:DVT 切入點(diǎn):動(dòng)物模型 出處:《昆明醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:[目的] 1、建立SD大鼠、日本大耳白兔下腔靜脈結(jié)扎法/狹窄法DVT動(dòng)物模型;確定DVT形成前、形成高峰、消退等狀態(tài)對應(yīng)的關(guān)鍵時(shí)間點(diǎn);確定兩種造模方法的優(yōu)缺點(diǎn)和SD大鼠、日本大耳白兔在制備DVT模型中的優(yōu)缺點(diǎn);下一步研究提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。 2、成功建立的模型后,采用ELISA法定量檢測GP1b-α蛋白在DVT模型中表達(dá)變化,并初步探討該分子表達(dá)變化在DVT形成中的意義。 [材料與方法] 第一部分下腔靜脈結(jié)扎法/狹窄法在大鼠、兔DVT模型中建立與研究 1、SD大鼠220只,雌性,體重為190±20g,隨機(jī)分為:正常對照組10只、假手術(shù)組10只、下腔靜脈結(jié)扎組100只、下腔靜脈狹窄組100只;日本大耳白兔140只,雌性,體重為2.20±0.35kg,隨機(jī)分為:正常對照組10只、假手術(shù)組10只、下腔靜脈結(jié)扎組60只、下腔靜脈狹窄組60只; 2、兩種動(dòng)物的正常對照組不做任何手術(shù)處理;假手術(shù)組暴露下腔靜脈后關(guān)腹;下腔靜脈結(jié)扎組和下腔靜脈狹窄組分別以下腔靜脈結(jié)扎法和下腔靜脈狹窄法建立SD大鼠DVT動(dòng)物模型和日本大耳白兔DVT動(dòng)物模型,記錄結(jié)扎前/后下腔靜脈直徑、造模時(shí)間等情況; 3、造模后2h、4h、6h、8h、12h、24h、3d、7d、14d、21d時(shí)間位點(diǎn)上,SD大鼠的正常對照組和假手術(shù)組各處死1只,下腔靜脈結(jié)扎組和狹窄組各處死10只。日本大耳白兔的正常對照組和假手術(shù)組各處死1只,下腔靜脈結(jié)扎組和狹窄組各處死6只。觀察動(dòng)物雙側(cè)后肢的腫脹等情況;觀察造模段下腔靜脈腫脹度、顏色、局部組織反應(yīng)程度等;測量取材時(shí)下腔靜脈直徑;采集下腔靜脈血液5ml;獲取血栓及相應(yīng)靜脈壁組織;測量血栓長度;稱量血栓及對應(yīng)靜脈壁的總濕重; 4、采集的下腔靜脈血液,離心分離血漿,-80℃保存?zhèn)溆;獲取的血栓及相應(yīng)靜脈壁組織進(jìn)行切片及HE染色,光鏡下觀察不同時(shí)間位點(diǎn)所取材微觀情況; 5、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:采用SPSS17.0軟件,對所有測量的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示,兩組數(shù)據(jù)間采用t檢驗(yàn)分析,各組間用單因素方差分析(One-Way ANOVA),P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 第二部分GPlb-α在SD大鼠DVT模型血漿中的表達(dá)變化 1、根據(jù)第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果和實(shí)驗(yàn)采集離心保存的血漿,選取SD大鼠正常對照組血漿10份,假手術(shù)組血漿10份,和下腔靜脈狹窄組造模后2h血漿10份、8h血漿10份、24h血漿10份、7d血漿10份,采用ELISA法,測量各組SD大鼠血漿中GP1b-α的表達(dá)變化。 2、采用SPSS17.0軟件,對測量的表達(dá)變化值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示,各組間用單因素方差分析,P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 [結(jié)果] 1、SD大鼠、日本大耳白兔造模后,造模段下腔靜脈管腔內(nèi)先出現(xiàn)黑色凝塊物質(zhì),再出現(xiàn)黑白混合凝塊物質(zhì),后凝塊物質(zhì)變韌,逐漸消失;下腔靜脈先脹大后明顯萎縮;腸系膜靜脈擴(kuò)張逐漸加重;光鏡下見:內(nèi)皮細(xì)胞損傷、取代消失、再形成;炎性細(xì)胞明顯浸潤血管壁和血栓;SD大鼠在2h4h、8h、12h、24h、3d、7d、14d都可見血栓存在;日本大耳白兔在4h、8h、12h、24h、3d、7d、14d可見血栓存在;整個(gè)病理演變符合血栓從急性期到慢性期的病理進(jìn)展過程; 2、SD大鼠、日本大耳白兔下腔靜脈結(jié)扎組和下腔靜脈狹窄組DVT發(fā)生率顯著高于假手術(shù)組和正常對照組;造模前后血管增大的直徑、血栓的長度、血栓和相應(yīng)血管壁濕重中,結(jié)扎組和狹窄組較假手術(shù)組和正常對照組有明顯差異(P0.05),假手術(shù)組較正常對照組間無明顯差異(P0.05)。 3、SD大鼠:下腔靜脈結(jié)扎組2h可測得血栓的長度和血栓及相應(yīng)靜脈壁濕重,7d達(dá)到峰值,14d開始數(shù)值減小,21d未測得相應(yīng)數(shù)值。下腔靜脈狹窄組2h可測得血栓的長度和血栓及相應(yīng)靜脈壁濕重,3d達(dá)到峰值,7d開始數(shù)值減小,14d進(jìn)一步減小,21d未測得相應(yīng)數(shù)值;日本大耳白兔:下腔靜脈結(jié)扎組4h可測得血栓的長度和血栓及相應(yīng)靜脈壁濕重,7d達(dá)到峰值,14d開始數(shù)值減小,21d未測得相應(yīng)數(shù)值。下腔靜脈狹窄組4h可測得血栓的長度和血栓及相應(yīng)靜脈壁濕重,3d達(dá)到峰值,7d開始數(shù)值減小,14d進(jìn)一步減小,21d未測得相應(yīng)數(shù)值。 4、GPlb-a蛋白在SD大鼠下腔靜脈狹窄DVT模型血漿中的表達(dá),較正常對照組和假手術(shù)組有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);表達(dá)量在下腔靜脈狹窄組術(shù)后8h升高,24h達(dá)到高峰(P=0.000),術(shù)后7d較降低,但仍較正常對照組和假手術(shù)組高。 [結(jié)論] 1、成功建立了SD大鼠、日本大耳白兔下腔靜脈結(jié)扎法、狹窄法DVT模型。下腔靜脈狹窄法DVT動(dòng)物模型較下腔靜脈結(jié)扎法DVT動(dòng)物模型更適合動(dòng)態(tài)研究DVT的形成、高峰、消退;在行DVT造模SD大鼠較日本大耳白兔更經(jīng)濟(jì)、易于管理、麻醉較快,形成完全血栓的時(shí)間較短,手術(shù)操作時(shí)間較短;但較后者手術(shù)視野更小,手術(shù)操作精細(xì)程度要求相對高。 2、狹窄法DVT動(dòng)物模型:SD大鼠:2h可形成不完全血栓,8h可形成完全血栓,24h~3d血栓形成高峰段,7d~21d為血栓消退段:日本大耳白兔:4h可形成不完全血栓,12h可形成完全血栓,24h~3d為血栓高峰段,7d~21d為血栓消退段。 3、GP1b-α與DVT形成密切相關(guān)
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R543;R-332
【參考文獻(xiàn)】
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4 張春強(qiáng);黃河;趙學(xué)凌;何飛;殷亮;趙智;唐錫章;周兆文;李世和;;兩種創(chuàng)傷性深靜脈血栓大鼠模型中炎癥相關(guān)基因的表達(dá)研究[J];生物醫(yī)學(xué)工程研究;2007年01期
5 韓旭華,張乃鉦;科學(xué)研究中人類疾病動(dòng)物模型的應(yīng)用及特點(diǎn)[J];山西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2002年01期
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10 唐承富,潘長春,王玉博,胡偉堅(jiān);順行法靜脈溶栓治療惡性腫瘤并下肢深靜脈血栓形成[J];中國醫(yī)學(xué)工程;2005年04期
,本文編號:1566009
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