本文關(guān)鍵詞： DHA 甘油三酯 磷脂 仔豬 大腦 營養(yǎng)　出處：《吉林大學(xué)》2014年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：二十二碳六烯酸（22:6n-3，DHA）是哺乳類大腦含量最為豐富的n-3脂肪酸，約占總脂肪酸的8%-14%(w/w)。人類胎兒腦部DHA蓄積在妊娠中期開始加速，一直持續(xù)到出生后前幾個(gè)月，隨后DHA在大腦重量不再增加的情況下繼續(xù)沉積，直至18歲，此后大腦DHA含量保持穩(wěn)定。嬰兒，包括早產(chǎn)兒，可以利用前體物質(zhì)18:3n-3(ALA)或20:5n-3(EPA)從頭合成DHA。但普遍認(rèn)為此過程效率低下，特別在目前n-6脂肪酸攝入相對較高的飲食背景下。許多以人類為對象的研究均證實(shí)DHA在大腦發(fā)育和視覺發(fā)展的重要作用，還有研究指出給嬰兒補(bǔ)充DHA會(huì)帶來長期的益處，但對于公認(rèn)的貝利嬰幼兒發(fā)展量表(Bayley scales)，補(bǔ)充DHA并沒有表現(xiàn)出優(yōu)勢。 本世紀(jì)初期，歐美開始在嬰幼兒奶粉中添加長鏈不飽和脂肪酸（LCPUFA）。雖然補(bǔ)充的DHA都是一樣，但DHA的“載體”卻有差別。自然界LCPUFA的載體主要有兩種：甘油三酯(TG)或磷脂（PL）。奶制品中及人乳中DHA在PL較為富集，但由于TG含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過PL，大部分DHA還是以TG形式存在。DHA-TG是目前嬰幼兒奶粉中最常見的分子形式，但在LCPUFA來源轉(zhuǎn)向單細(xì)胞生物及魚油之前，市場上擁有大量富含DHA-PL和ARA-PL嬰幼兒產(chǎn)品。由此看來，PL是DHA潛在的替代來源，且適用于嬰幼兒奶粉。不同酯化形式的LCPUFA在體內(nèi)的代謝、分布及吸收是不同的。十多年前本實(shí)驗(yàn)室給新生狒狒灌服13C標(biāo)記的不同酯化形式ARA制劑，發(fā)現(xiàn)PL形式ARA在大腦整合效能是TG形式的2.1倍。而目前對于DHA類似的研究較少。本研究選用相似的方法探索不同酯化形式DHA在各組織器官，尤其大腦，整合效能的差異，并對效能差異及DHA的大腦整合的機(jī)制進(jìn)行初步分析。 選取20只2-4日齡仔豬，飼喂同種、等量的商品化仔豬代乳品。飼喂14d后把仔豬分為對照組（n=4）、PL組（n=8）和TG組（n=8），給予實(shí)驗(yàn)組16只仔豬一次同位素標(biāo)記DHA灌服，對照組不作處理。PL組仔豬灌服約20mg13C-DHA-phosphatidylcholine（13C-DHA-PC），DHA位于13C-DHA-PC的sn-2位置，16:0處于sn-1位置。TG組仔豬灌服約86mg13C-DHA-TG，DHA位于13C-DHA-TG的sn-2位置，sn-1和sn-3位置的脂肪酸均為16:0。灌服后6d，麻醉處死仔豬，取大腦、肝臟、心臟、視網(wǎng)膜、肌肉和血液樣本，閃凍于液氮，，日后提取脂肪酸，選用GC-FID分析各組織脂肪酸的組成，使用GC-C-IRMS分析13C-DHA在大腦皮層灰質(zhì)、突觸體、視網(wǎng)膜、肝臟、紅細(xì)胞及血漿磷脂組分等的蓄積。 為進(jìn)一步探討DHA在腦部整合機(jī)制，體外培養(yǎng)仔豬腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞，觀察加入DHA對脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)因子CD36、FATP1基因表達(dá)的影響，并檢測相關(guān)核轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)錄水平。 總體來說，灌服DHA制劑并未顯著改變各組織器官的脂肪酸組成，但實(shí)驗(yàn)組之間13C-DHA在各組織的蓄積有差異。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，灌服13C-DHA-PC仔豬大腦皮層13C-DHA蓄積量為0.37%Dose，灌服13C-DHA-TG仔豬的蓄積量為0.19%Dose。PL-DHA在大腦皮層蓄積效能是TG-DHA的1.9倍。與大腦皮層類似，突觸體PL-DHA蓄積效能是TG-DHA的1.7倍。肝臟是蓄積13C-DHA最多的器官，PL組仔豬含有6.8%Dose，TG組含3.5%Dose。PL-DHA在肝臟蓄積的效能也是TG的1.9倍。在視網(wǎng)膜和紅細(xì)胞也有類似發(fā)現(xiàn)。PL組視網(wǎng)膜13C-DHA蓄積的效能是TG組的2.2倍，紅細(xì)胞為1.5倍。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)不同酯化形式DHA生成22:5n-3(DPAn-3)也有差異。PL組大腦13C-DHA轉(zhuǎn)化為13C-DPAn-3的量是TG組的2倍，且該轉(zhuǎn)化過程在大腦比在肝臟和紅細(xì)胞更為活躍。這些結(jié)果直接證實(shí)了磷脂作為DHA的“載體”相比TG具有更高的效能。 體外培養(yǎng)仔豬大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞實(shí)驗(yàn)顯示，DHA能顯著提高細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)因子CD36、FATP1的基因轉(zhuǎn)錄水平，DHA發(fā)揮基因調(diào)節(jié)的作用是通過核轉(zhuǎn)錄因子PPARγ實(shí)現(xiàn)的。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：S828

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本文編號：1467539