滋水清肝飲對內(nèi)分泌治療后乳腺癌小鼠單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的調(diào)節(jié)作用
本文關(guān)鍵詞:滋水清肝飲對內(nèi)分泌治療后乳腺癌小鼠單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的調(diào)節(jié)作用 出處:《南京中醫(yī)藥大學(xué)》2016年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
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【摘要】:目的觀察滋水清肝飲對內(nèi)分泌治療后的乳腺癌移植小鼠腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響,探討其改善內(nèi)分泌治療后類絕經(jīng)期綜合征的機(jī)制,為滋水清肝飲在乳腺癌內(nèi)分泌治療領(lǐng)域的推廣和應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法 選用40只雌性BALB/c小鼠,在乳腺癌造模及卵巢去勢術(shù)成功后隨機(jī)分為4組:a)實(shí)驗(yàn)組1(來曲唑+低劑量滋水清肝飲);b)實(shí)驗(yàn)組2(來曲唑+高劑量滋水清肝飲);c)空白組(蒸餾水);d)陽性對照組(來曲唑),每組各10只。實(shí)驗(yàn)組1中低劑量組小鼠灌服滋水清肝飲11.28g/Kg/d+來曲唑0.379mg/kg/d;實(shí)驗(yàn)組2中高劑量組小鼠灌服滋水清肝飲45.1g/Kg/d+來曲唑0.379mg/kg/d;空白組小鼠灌服等量蒸餾水;陽性對照組小鼠灌服來曲唑0.379mg/kg/d;喂養(yǎng),第2、4周,分別從4組中各取5只小鼠,腹腔麻醉,腹主動脈取血2ml,檢測外周血雌二醇(E2)、促卵泡刺激素(FSH)、促黃體生成素(LH)、去甲腎上腺素(NE)的水平。用1%戊巴比妥鈉(40mL/kg)麻醉大鼠,開胸暴露心臟,剪開右心耳,經(jīng)左心室插管至升主動脈,200mL生理鹽水沖洗血液,然后用含4%多聚甲醛的0. 1mol/L的磷酸鹽緩沖液(phosphate buffer solution, PBS, pH7.4,4℃,300mL灌注固定,先快后慢,灌畢,立即取腦,在金屬平臺上迅速分離出海馬區(qū),恒冷箱切片機(jī)切制含下丘腦的腦橋冠狀切片。每只大鼠選取4套切片。1、用ELISA法檢測E2、FSH、LH、NE.5-HT水平。2、Western Blot檢測小鼠下丘腦組織中5-HT1AR、5-HT2AR蛋白的表達(dá)。結(jié)果通過熒光免疫測定ER、PR陽性證實(shí)乳腺癌4T1細(xì)胞株為激素依賴性乳腺癌細(xì)胞株。通過去卵巢小鼠陰道細(xì)胞涂片連續(xù)5天出現(xiàn)外底層細(xì)胞證實(shí)雌激素水平下降,卵巢摘除手術(shù)成功。與空白組及實(shí)驗(yàn)組1相比,實(shí)驗(yàn)組2能降低內(nèi)分泌治療后乳腺癌移植小鼠血清E2、FSH及LH水平,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與對照組相比,實(shí)驗(yàn)組2能降低E2、FSH、LH水平,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與對照組相比,實(shí)驗(yàn)組1不能降低E2、FSH、LH水平,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與空白組及實(shí)驗(yàn)組1相比,實(shí)驗(yàn)組2能增加內(nèi)分泌治療后的乳腺癌移植小鼠腦內(nèi)5-HT、 NE的表達(dá),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05):與對照組相比,實(shí)驗(yàn)組1不增加5-HT、NE的表達(dá),無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與空白組及對照相比,實(shí)驗(yàn)組均能提高絕經(jīng)后乳腺癌移植小鼠下丘腦5-HT1AR蛋白表達(dá)水平,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);但實(shí)驗(yàn)組2相比實(shí)驗(yàn)組1效果更明顯,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與空白組及對照相比,實(shí)驗(yàn)組均能降低絕經(jīng)后乳腺癌移植小鼠下丘腦5-HT2AR蛋白表達(dá)水平,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);但實(shí)驗(yàn)組2相比實(shí)驗(yàn)組1效果更明顯,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1、高劑量組滋水清肝飲能夠降低內(nèi)分泌治療后乳腺癌移植小鼠血清E2、 FSH及LH水平,同時增加腦海馬回5-HT及NE的表達(dá)。2、高劑量組滋水清肝飲能提高小鼠下丘腦具有散熱降溫作用的5-HT1AR蛋白表達(dá)水平,且能降低具有產(chǎn)熱升溫作用的5-HT2AR蛋白表達(dá)水平。3、滋水清肝飲在改善絕經(jīng)后乳腺癌移植小鼠下丘腦-垂體-卵巢軸(HPOA軸)或腎上腺軸等軸功能紊亂及調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)方面具有明顯的作用,從而為滋水清肝飲在乳腺癌內(nèi)分泌治療領(lǐng)域的推廣應(yīng)用提供了理論依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】:南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R273
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,本文編號:1337197
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