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葛根芩連湯對慢性牙周炎合并動脈粥樣硬化大鼠模型TNF-α水平的影響

發(fā)布時間:2017-11-18 18:31

  本文關(guān)鍵詞:葛根芩連湯對慢性牙周炎合并動脈粥樣硬化大鼠模型TNF-α水平的影響


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【摘要】:目的通過建立牙周炎合并動脈粥樣硬化大鼠模型,檢測腫瘤壞死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)水平,應(yīng)用藥物治療,檢測TNF-α水平,分析葛根芩連湯對慢性牙周炎合并動脈粥樣硬化模型大鼠治療效果,為臨床治療提供實驗依據(jù)。方法46只健康Wistar大鼠,雌鼠和雄鼠各23只,分籠飼養(yǎng),按體重隨機(jī)分為兩組:正常對照N組8只,正常飼喂,普通飲食、飲水,在剩余大鼠的左上頜第二磨牙牙頸部用0.2mm鋼絲結(jié)扎,高脂飼料飼喂大鼠并配合藥物誘導(dǎo),用時12w建立慢性牙周炎合并動脈粥樣硬化的復(fù)合型大鼠模型。12w末,將正常組和模型組大鼠分別隨機(jī)處死3只,剩余模型組大鼠隨機(jī)分成5組,并進(jìn)行處理:空白對照(D0)組灌胃0.9%生理鹽水2ml"kg;甲硝唑(D1)組灌胃甲硝唑0.05g"kg;阿伐他汀(D2)組灌胃阿伐他汀0.08g"kg;聯(lián)合用藥(D3)組同時灌胃阿伐他汀0.08g"kg和甲硝唑0.05g"kg;葛根芩連湯(D4)組灌胃葛根芩連湯0.42g"kg,所有動物灌胃體積不超過4ml"kg,所有動物于12周末開始連續(xù)灌胃持續(xù)4w至實驗結(jié)束。于實驗12w末和16w末麻醉狀態(tài)下分別檢測各組大鼠牙周各項指標(biāo)(SBI、PD、AL)、腹主動脈采血后檢測血脂各項指標(biāo)(TC、TG、LDL、HDL)、腹主動脈取血采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)檢測血清TNF-α水平;將牙周組織、動脈血管組織制作成石蠟切片,一部分切片進(jìn)行HE染色光鏡下觀察病理學(xué)變化病理切片上測量牙周袋深度(PD)和附著喪失(AL),一部分切片用來做免疫組織化學(xué)染色(Immunohistochemistry,IHC),觀察TNF-α在牙周組織和腹主動脈中的陽性表達(dá)部位,半定量檢測TNF-α在牙周組織和腹主動脈中的表達(dá)水平。結(jié)果1一般情況觀察:正常組大鼠飲食活動規(guī)律。模型組大鼠飲食明顯減少,被毛雜亂,體重下降,牙周組織出現(xiàn)炎癥。2 HE染色光鏡下所見:正常組大鼠牙周組織中骨組織,牙周纖維,牙周膜寬度等無明顯改變;血管管壁均勻一致。模型組大鼠牙周組織中大量炎細(xì)胞浸潤,上皮釘突伸長,牙槽骨不規(guī)則吸收,牙周膜寬度增加出現(xiàn)牙周袋;腹主動脈血管內(nèi)膜增厚,血管壁出現(xiàn)不規(guī)則的改變,粗細(xì)不一,出現(xiàn)動脈斑塊并有脂質(zhì)沉積。各治療組炎癥減輕,腹主動脈內(nèi)膜厚度減小,部分血管管壁均勻一致。圖像分析軟件在病理切片上精確測定牙周探診深度及附著喪失,模型組牙周探診深度與附著喪失水平與正常對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3免疫組織化學(xué)檢測TNF-α的表達(dá)情況:TNF-α在胞漿和(或)細(xì)胞器內(nèi)呈陽性表達(dá),表現(xiàn)為呈黃色或棕黃色顆粒。半定量分析TNF-α的表達(dá)情況,即牙周組織和腹主動脈TNFα的OD值:12w時D組與N組比較明顯升高差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),16w時各治療組與D0組比較顯著降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。.4血清中TNF-α含量變化:12w時D組血清中TNF-α含量與N組比較明顯升高,差異具有顯著性(P0.01);16w時各治療組與D0組比較,TNF-α表達(dá)水平明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。5實驗12w末,D組血清中TC、TG、LDL水平均較N組升高,HDL降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。16w末,各治療組TC、TG、LDL水平均較D0組降低,HDL升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),D4組各項實驗指標(biāo)均與D3組無明顯改變,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1 TNF-α在牙周炎合并動脈粥樣硬化模型大鼠表達(dá)水平明顯高于正常對照組大鼠。2選用的各組藥物都有效的抑制了牙周炎合并動脈粥樣硬化大鼠模型TNF-α在血清、牙周組織、血管中的表達(dá)水平。其中,聯(lián)合用藥組與葛根芩連湯組的效果最好。3葛根芩連湯治療組對模型大鼠牙周和血脂等各指標(biāo)有明顯改善,說明該藥起到了一定的疾病防治作用,提示在傳統(tǒng)的治療法的基礎(chǔ)上適當(dāng)?shù)妮o以該類藥物,有助于增強(qiáng)療效。
【學(xué)位授予單位】:華北理工大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R285.5

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本文編號:1200760


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