本文關(guān)鍵詞：猴腦選擇性超深低溫?cái)嘌鲝?fù)蘇對(duì)腦電生理影響的研究

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【摘要】：第一部分猴腦選擇性超深低溫?cái)嘌鲝?fù)蘇的動(dòng)物模型建立和對(duì)腦電圖影響的研究目的：建立猴腦嚴(yán)重缺血后性選擇性腦超深低溫灌注動(dòng)物模型,探討嚴(yán)重腦缺血后行選擇性腦深低溫灌注對(duì)腦電圖的影響。材料和方法：健康成年恒河猴8只(由中國(guó)科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所提供),雄性,反應(yīng)靈敏,神經(jīng)功能正常,年齡5-8歲,平均6.43±1.58歲,體重6.73-9.86Kg,平均7.42±2.51Kg,隨機(jī)分為三組：四血管(雙側(cè)頸總動(dòng)脈及椎動(dòng)脈)阻斷冷灌注組(簡(jiǎn)稱四血管組,n=3),兩血管(雙側(cè)頸總動(dòng)脈)阻斷冷灌注組(簡(jiǎn)稱兩血管組,n=3),兩血管(雙側(cè)頸總動(dòng)脈)阻斷等溫灌注組(簡(jiǎn)稱等溫灌注組,n=2)。選擇性超深低溫阻斷血流安全復(fù)蘇動(dòng)物模型的制備： (1)降溫前準(zhǔn)備：麻醉后行氣管插管以維持動(dòng)物自主呼吸。切開(kāi)雙側(cè)腹股溝區(qū)顯露左側(cè)股靜脈連接超濾復(fù)溫裝置輸出端,顯露右側(cè)股靜脈連接超濾復(fù)溫裝置輸入端,顯露右側(cè)股動(dòng)脈插管監(jiān)測(cè)平均動(dòng)脈壓；切開(kāi)雙側(cè)頸動(dòng)脈鞘,顯露右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈遠(yuǎn)心端連接超濾復(fù)溫裝置輸入端,右側(cè)頸內(nèi)靜脈遠(yuǎn)心端連接超濾復(fù)溫裝置輸出端,從而建立腦局部體外循環(huán),右側(cè)頸內(nèi)靜脈近心端插管監(jiān)測(cè)中心靜脈壓。采用相同方法分離雙側(cè)頸外靜脈、左側(cè)頸總動(dòng)脈和頸內(nèi)靜脈備用。 四血管阻斷組于頸動(dòng)脈鞘后方、頸6橫突前結(jié)節(jié)內(nèi)下方分離雙側(cè)椎動(dòng)脈備用。 經(jīng)右額部開(kāi)顱,于額葉安放針形腦溫傳感器和腦電圖電極。預(yù)備溫度為(4.00±0.50)℃的林格液4000 ml； (2)降溫方法：降溫前測(cè)腦電圖,全身肝素化,夾閉雙側(cè)頸外靜脈、左側(cè)頸總動(dòng)脈和頸內(nèi)靜脈,四血管阻斷冷灌注組須夾閉雙側(cè)椎動(dòng)脈,于缺血10min后經(jīng)降溫系統(tǒng)(林格液-動(dòng)脈輸液加壓器)向右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈輸入林格液,維持動(dòng)脈壓與腹股溝動(dòng)脈壓相等,同時(shí)自右側(cè)頸內(nèi)靜脈頭端及左側(cè)股靜脈遠(yuǎn)心端回流靜脈血�；亓饕簽V去多余水分后復(fù)溫至38℃,經(jīng)右側(cè)股靜脈近心端回輸至體循環(huán),降溫19.03±4.72min,待腦溫降至≤16℃減慢輸注速率,腦溫維持于14.70-16.00℃,共60 min。 (3)復(fù)溫和恢復(fù)正常血供：停止低溫灌注液灌注,恢復(fù)被阻斷血管的正常血流,自然復(fù)溫至正常腦溫。 待動(dòng)物呼吸平穩(wěn)后去除氣管插管,密切監(jiān)測(cè)生命體征72 h,待其恢復(fù)自然狀態(tài)。兩血管阻斷常溫灌注組動(dòng)物除輸注37℃林格液、不行腦溫降低措施外,其余模型建立過(guò)程與其他兩組相同。結(jié)果：兩血管阻斷冷灌注組3只動(dòng)物均成功建立選擇性超深低溫阻斷血流安全復(fù)蘇動(dòng)物模型,復(fù)蘇后長(zhǎng)期正常存活；四血管阻斷冷灌注組3只動(dòng)物復(fù)蘇困難,手術(shù)后血壓不穩(wěn)定,持續(xù)應(yīng)用升壓藥物維持血壓,均于手術(shù)后24 h內(nèi)死亡(2只灌注后2 h死亡,1只存活6h后死亡)；兩血管阻斷常溫灌注組2只動(dòng)物灌注后即刻死亡。手術(shù)前后腦電圖變化：3組動(dòng)物均于手術(shù)前獲得正常狀態(tài)下的腦電活動(dòng)圖像,節(jié)律規(guī)整,以α波為主,波幅正常。 (1)兩血管阻斷冷灌注組：為雙側(cè)頸總動(dòng)脈阻斷,手術(shù)中隨腦溫的下降,腦電圖表現(xiàn)為正常α波背景消失,腦電波波幅降低,慢波增多；當(dāng)腦溫降至≤18℃時(shí)腦電圖呈直線狀態(tài),低電壓或等電位；復(fù)溫至33℃時(shí)腦電圖基本恢復(fù)正常。 (2)兩血管阻斷常溫灌注組：雙側(cè)頸總動(dòng)脈阻斷后,在灌注過(guò)程中正常的α波背景減弱或消失,節(jié)律不規(guī)則呈低-中-高幅慢波節(jié)律,有中等量中-高幅棘慢綜合波,呈節(jié)律性爆發(fā)；灌注后腦電圖波形未恢復(fù)至正常狀態(tài),仍呈低-中-高幅慢波節(jié)律,可見(jiàn)中-高幅棘慢綜合波呈節(jié)律性爆發(fā)。 (3)四血管阻斷冷灌注組：4只動(dòng)物均為全腦血管阻斷,其腦電圖改變與兩血管阻斷冷灌注組基本相同,手術(shù)中隨著腦溫的下降,腦電圖波幅降低,當(dāng)降至≤18℃時(shí)腦電波幾乎呈一直線;復(fù)溫至33℃后腦電波基本恢復(fù)正常。結(jié)論：通過(guò)灌注過(guò)程中及灌注后的持續(xù)監(jiān)測(cè)顯示,與正常體溫相比,超深低溫狀態(tài)對(duì)大腦皮質(zhì)具有明顯的保護(hù)作用；阻斷雙側(cè)頸總動(dòng)脈血流后并未造成低溫組動(dòng)物的缺血缺氧性損傷,無(wú)明顯的顱內(nèi)壓增高性改變,證明超深低溫在神經(jīng)外科手術(shù)中安全有效;雙側(cè)頸總動(dòng)脈阻斷血流動(dòng)物模型對(duì)實(shí)驗(yàn)猴復(fù)蘇后的神經(jīng)功能無(wú)不良影響,不引起缺血、缺氧性損傷,顯示出較好的腦保護(hù)作用。第二部分猴腦選擇性超深低溫?cái)嘌鲝?fù)蘇對(duì)腦電功率譜的影響目的：建立猴腦嚴(yán)重缺血后性選擇性腦超深低溫灌注動(dòng)物模型,探討嚴(yán)重腦缺血后行選擇性腦深低溫灌注對(duì)腦電功率譜的影響。材料和方法：健康成年恒河猴3只(由中國(guó)科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所提供),雄性,反應(yīng)靈敏,神經(jīng)功能正常,年齡6-8歲,平均6.73±1.18歲,體重7.68-9.26Kg,平均8.22±1.32Kg。選擇性超深低溫阻斷血流安全復(fù)蘇動(dòng)物模型的制備：(1)降溫前準(zhǔn)備：麻醉后行氣管插管以維持動(dòng)物自主呼吸。切開(kāi)雙側(cè)腹股溝區(qū)顯露左側(cè)股靜脈連接超濾復(fù)溫裝置輸出端,顯露右側(cè)股靜脈連接超濾復(fù)溫裝置輸入端,顯露右側(cè)股動(dòng)脈插管監(jiān)測(cè)平均動(dòng)脈壓;切開(kāi)雙側(cè)頸動(dòng)脈鞘,顯露右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈遠(yuǎn)心端連接超濾復(fù)溫裝置輸入端,右側(cè)頸內(nèi)靜脈遠(yuǎn)心端連接超濾復(fù)溫裝置輸出端,從而建立腦局部體外循環(huán),右側(cè)頸內(nèi)靜脈近心端插管監(jiān)測(cè)中心靜脈壓。 同法分離雙側(cè)頸外靜脈、左側(cè)頸總動(dòng)脈和頸內(nèi)靜脈備用。預(yù)備溫度為(4.00±0.50)℃的林格液4000 m1; (2)降溫方法：降溫前測(cè)腦電圖,全身肝素化,夾閉雙側(cè)頸外靜脈、左側(cè)頸總動(dòng)脈和頸內(nèi)靜脈,于缺血10 min后經(jīng)降溫系統(tǒng)(林格液-動(dòng)脈輸液加壓器)向右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈輸入林格液,維持動(dòng)脈壓與腹股溝動(dòng)脈壓相等,同時(shí)自右側(cè)頸內(nèi)靜脈頭端及左側(cè)股靜脈遠(yuǎn)心端回流靜脈血。回流液濾去多余水分后復(fù)溫至38℃,經(jīng)右側(cè)股靜脈近心端回輸至體循環(huán),降溫19.03±4.72min,待腦溫降至≤16℃減慢輸注速率,腦溫維持于14.70-16.00℃,共60 min。 (3)復(fù)溫和恢復(fù)正常血供：停止低溫灌注液灌注,恢復(fù)被阻斷血管的正常血流,自然復(fù)溫至正常腦溫。 待動(dòng)物呼吸平穩(wěn)后去除氣管插管,密切監(jiān)測(cè)生命體征72 h,待其恢復(fù)自然狀態(tài)。在動(dòng)物模型制備過(guò)程中監(jiān)測(cè)腦電圖,將所描記的常規(guī)EEG電極信號(hào)隨機(jī)采樣,選擇無(wú)干擾或偽差30秒輸入計(jì)算機(jī)處理出4個(gè)頻段即δ波(0.5-3.9Hz),θ波(4.0-7.9Hz)α波(8.0-13.9Hz),β波(14-30Hz)的絕對(duì)功率值。采用分貝的方式計(jì)算出絕對(duì)功率值(dBm)。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,所有數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差表示,多組均數(shù)比較采用重復(fù)測(cè)量設(shè)計(jì)方差分析,結(jié)果顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義時(shí),再用LSD-t檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較,P0.05說(shuō)明差別在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著意義。具體說(shuō)明如下：F1、P1表示同一導(dǎo)聯(lián)的功率值隨時(shí)間延長(zhǎng)的變化情況,當(dāng)P10.05時(shí)4個(gè)時(shí)期的功率值不全相同,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。此時(shí)再進(jìn)行兩兩比較,以麻醉期作為對(duì)照組,其他3個(gè)時(shí)期的功率值均與麻醉期相比較,當(dāng)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義時(shí)用*表示。F2、P2表示導(dǎo)聯(lián)的配對(duì)比較,即左右相對(duì)應(yīng)的導(dǎo)聯(lián)(如01/02)的LSD-t檢驗(yàn),當(dāng)P20.05時(shí)說(shuō)明左右相對(duì)應(yīng)的導(dǎo)聯(lián)(如01/02)的功率值在4個(gè)時(shí)期不相同,可認(rèn)為左右腦區(qū)的功率值不同。結(jié)果：4個(gè)時(shí)期(麻醉期、灌注期、低溫維持期、復(fù)溫期)4個(gè)頻段的腦電波(δ、θ、α、β)絕對(duì)功率值不全相同,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P10.05)。此時(shí)再進(jìn)行兩兩比較,與麻醉期相比,灌注期和低溫維持期的絕對(duì)功率值與其有顯著差異(*表示P0.05),相反,復(fù)溫期的絕對(duì)功率值與其無(wú)顯著差異(P0.05)。說(shuō)明隨著猴腦低溫灌注開(kāi)始,4個(gè)頻段的腦電波各腦區(qū)的絕對(duì)功率值均開(kāi)始下降,到低溫維持期時(shí)各腦區(qū)絕對(duì)功率值均最低。復(fù)溫期時(shí)各腦區(qū)的絕對(duì)功率值恢復(fù)到低溫灌注前的水平。對(duì)左右相對(duì)應(yīng)的導(dǎo)聯(lián)(如01/02)的絕對(duì)功率值進(jìn)行LSD-t檢驗(yàn),4個(gè)頻段的腦電波絕對(duì)值各時(shí)段左右對(duì)應(yīng)導(dǎo)聯(lián)之間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P20.05),提示低溫灌注過(guò)程中左右腦區(qū)的4個(gè)頻段的腦電波絕對(duì)功率值變化無(wú)差異。結(jié)論：1在低溫維持期(腦溫降至≤18℃時(shí))腦電功率譜四個(gè)頻段波(δ、 θ、α、β)的絕對(duì)功率值雖最低但存在,提示在超深低溫狀態(tài)下仍有腦電活動(dòng),且以慢波(δ、θ)為主；2低溫灌注過(guò)程中腦代謝速率降低,神經(jīng)功能受抑制,復(fù)溫后腦代謝和神經(jīng)功能逐漸恢復(fù)降溫前水平,從腦電生理角度上證實(shí)了低溫的腦保護(hù)作用；3低溫灌注過(guò)程中左右兩側(cè)腦代謝可能在低溫灌注過(guò)程中無(wú)差異。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R651

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1 胡小剛;猴腦選擇性超深低溫?cái)嘌鲝?fù)蘇對(duì)腦電生理影響的研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2016年

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本文編號(hào)：1168409