本文關(guān)鍵詞：猴腦選擇性超深低溫斷血流復(fù)蘇對腦電生理影響的研究

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【摘要】：第一部分猴腦選擇性超深低溫斷血流復(fù)蘇的動物模型建立和對腦電圖影響的研究目的：建立猴腦嚴重缺血后性選擇性腦超深低溫灌注動物模型,探討嚴重腦缺血后行選擇性腦深低溫灌注對腦電圖的影響。材料和方法：健康成年恒河猴8只(由中國科學院昆明動物研究所提供),雄性,反應(yīng)靈敏,神經(jīng)功能正常,年齡5-8歲,平均6.43±1.58歲,體重6.73-9.86Kg,平均7.42±2.51Kg,隨機分為三組：四血管(雙側(cè)頸總動脈及椎動脈)阻斷冷灌注組(簡稱四血管組,n=3),兩血管(雙側(cè)頸總動脈)阻斷冷灌注組(簡稱兩血管組,n=3),兩血管(雙側(cè)頸總動脈)阻斷等溫灌注組(簡稱等溫灌注組,n=2)。選擇性超深低溫阻斷血流安全復(fù)蘇動物模型的制備： (1)降溫前準備：麻醉后行氣管插管以維持動物自主呼吸。切開雙側(cè)腹股溝區(qū)顯露左側(cè)股靜脈連接超濾復(fù)溫裝置輸出端,顯露右側(cè)股靜脈連接超濾復(fù)溫裝置輸入端,顯露右側(cè)股動脈插管監(jiān)測平均動脈壓；切開雙側(cè)頸動脈鞘,顯露右側(cè)頸內(nèi)動脈遠心端連接超濾復(fù)溫裝置輸入端,右側(cè)頸內(nèi)靜脈遠心端連接超濾復(fù)溫裝置輸出端,從而建立腦局部體外循環(huán),右側(cè)頸內(nèi)靜脈近心端插管監(jiān)測中心靜脈壓。采用相同方法分離雙側(cè)頸外靜脈、左側(cè)頸總動脈和頸內(nèi)靜脈備用。 四血管阻斷組于頸動脈鞘后方、頸6橫突前結(jié)節(jié)內(nèi)下方分離雙側(cè)椎動脈備用。 經(jīng)右額部開顱,于額葉安放針形腦溫傳感器和腦電圖電極。預(yù)備溫度為(4.00±0.50)℃的林格液4000 ml； (2)降溫方法：降溫前測腦電圖,全身肝素化,夾閉雙側(cè)頸外靜脈、左側(cè)頸總動脈和頸內(nèi)靜脈,四血管阻斷冷灌注組須夾閉雙側(cè)椎動脈,于缺血10min后經(jīng)降溫系統(tǒng)(林格液-動脈輸液加壓器)向右側(cè)頸內(nèi)動脈輸入林格液,維持動脈壓與腹股溝動脈壓相等,同時自右側(cè)頸內(nèi)靜脈頭端及左側(cè)股靜脈遠心端回流靜脈血。回流液濾去多余水分后復(fù)溫至38℃,經(jīng)右側(cè)股靜脈近心端回輸至體循環(huán),降溫19.03±4.72min,待腦溫降至≤16℃減慢輸注速率,腦溫維持于14.70-16.00℃,共60 min。 (3)復(fù)溫和恢復(fù)正常血供：停止低溫灌注液灌注,恢復(fù)被阻斷血管的正常血流,自然復(fù)溫至正常腦溫。 待動物呼吸平穩(wěn)后去除氣管插管,密切監(jiān)測生命體征72 h,待其恢復(fù)自然狀態(tài)。兩血管阻斷常溫灌注組動物除輸注37℃林格液、不行腦溫降低措施外,其余模型建立過程與其他兩組相同。結(jié)果：兩血管阻斷冷灌注組3只動物均成功建立選擇性超深低溫阻斷血流安全復(fù)蘇動物模型,復(fù)蘇后長期正常存活；四血管阻斷冷灌注組3只動物復(fù)蘇困難,手術(shù)后血壓不穩(wěn)定,持續(xù)應(yīng)用升壓藥物維持血壓,均于手術(shù)后24 h內(nèi)死亡(2只灌注后2 h死亡,1只存活6h后死亡)；兩血管阻斷常溫灌注組2只動物灌注后即刻死亡。手術(shù)前后腦電圖變化：3組動物均于手術(shù)前獲得正常狀態(tài)下的腦電活動圖像,節(jié)律規(guī)整,以α波為主,波幅正常。 (1)兩血管阻斷冷灌注組：為雙側(cè)頸總動脈阻斷,手術(shù)中隨腦溫的下降,腦電圖表現(xiàn)為正常α波背景消失,腦電波波幅降低,慢波增多；當腦溫降至≤18℃時腦電圖呈直線狀態(tài),低電壓或等電位；復(fù)溫至33℃時腦電圖基本恢復(fù)正常。 (2)兩血管阻斷常溫灌注組：雙側(cè)頸總動脈阻斷后,在灌注過程中正常的α波背景減弱或消失,節(jié)律不規(guī)則呈低-中-高幅慢波節(jié)律,有中等量中-高幅棘慢綜合波,呈節(jié)律性爆發(fā)；灌注后腦電圖波形未恢復(fù)至正常狀態(tài),仍呈低-中-高幅慢波節(jié)律,可見中-高幅棘慢綜合波呈節(jié)律性爆發(fā)。 (3)四血管阻斷冷灌注組：4只動物均為全腦血管阻斷,其腦電圖改變與兩血管阻斷冷灌注組基本相同,手術(shù)中隨著腦溫的下降,腦電圖波幅降低,當降至≤18℃時腦電波幾乎呈一直線;復(fù)溫至33℃后腦電波基本恢復(fù)正常。結(jié)論：通過灌注過程中及灌注后的持續(xù)監(jiān)測顯示,與正常體溫相比,超深低溫狀態(tài)對大腦皮質(zhì)具有明顯的保護作用；阻斷雙側(cè)頸總動脈血流后并未造成低溫組動物的缺血缺氧性損傷,無明顯的顱內(nèi)壓增高性改變,證明超深低溫在神經(jīng)外科手術(shù)中安全有效;雙側(cè)頸總動脈阻斷血流動物模型對實驗猴復(fù)蘇后的神經(jīng)功能無不良影響,不引起缺血、缺氧性損傷,顯示出較好的腦保護作用。第二部分猴腦選擇性超深低溫斷血流復(fù)蘇對腦電功率譜的影響目的：建立猴腦嚴重缺血后性選擇性腦超深低溫灌注動物模型,探討嚴重腦缺血后行選擇性腦深低溫灌注對腦電功率譜的影響。材料和方法：健康成年恒河猴3只(由中國科學院昆明動物研究所提供),雄性,反應(yīng)靈敏,神經(jīng)功能正常,年齡6-8歲,平均6.73±1.18歲,體重7.68-9.26Kg,平均8.22±1.32Kg。選擇性超深低溫阻斷血流安全復(fù)蘇動物模型的制備：(1)降溫前準備：麻醉后行氣管插管以維持動物自主呼吸。切開雙側(cè)腹股溝區(qū)顯露左側(cè)股靜脈連接超濾復(fù)溫裝置輸出端,顯露右側(cè)股靜脈連接超濾復(fù)溫裝置輸入端,顯露右側(cè)股動脈插管監(jiān)測平均動脈壓;切開雙側(cè)頸動脈鞘,顯露右側(cè)頸內(nèi)動脈遠心端連接超濾復(fù)溫裝置輸入端,右側(cè)頸內(nèi)靜脈遠心端連接超濾復(fù)溫裝置輸出端,從而建立腦局部體外循環(huán),右側(cè)頸內(nèi)靜脈近心端插管監(jiān)測中心靜脈壓。 同法分離雙側(cè)頸外靜脈、左側(cè)頸總動脈和頸內(nèi)靜脈備用。預(yù)備溫度為(4.00±0.50)℃的林格液4000 m1; (2)降溫方法：降溫前測腦電圖,全身肝素化,夾閉雙側(cè)頸外靜脈、左側(cè)頸總動脈和頸內(nèi)靜脈,于缺血10 min后經(jīng)降溫系統(tǒng)(林格液-動脈輸液加壓器)向右側(cè)頸內(nèi)動脈輸入林格液,維持動脈壓與腹股溝動脈壓相等,同時自右側(cè)頸內(nèi)靜脈頭端及左側(cè)股靜脈遠心端回流靜脈血�；亓饕簽V去多余水分后復(fù)溫至38℃,經(jīng)右側(cè)股靜脈近心端回輸至體循環(huán),降溫19.03±4.72min,待腦溫降至≤16℃減慢輸注速率,腦溫維持于14.70-16.00℃,共60 min。 (3)復(fù)溫和恢復(fù)正常血供：停止低溫灌注液灌注,恢復(fù)被阻斷血管的正常血流,自然復(fù)溫至正常腦溫。 待動物呼吸平穩(wěn)后去除氣管插管,密切監(jiān)測生命體征72 h,待其恢復(fù)自然狀態(tài)。在動物模型制備過程中監(jiān)測腦電圖,將所描記的常規(guī)EEG電極信號隨機采樣,選擇無干擾或偽差30秒輸入計算機處理出4個頻段即δ波(0.5-3.9Hz),θ波(4.0-7.9Hz)α波(8.0-13.9Hz),β波(14-30Hz)的絕對功率值。采用分貝的方式計算出絕對功率值(dBm)。統(tǒng)計學處理：采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理,所有數(shù)據(jù)以均數(shù)士標準差表示,多組均數(shù)比較采用重復(fù)測量設(shè)計方差分析,結(jié)果顯示有統(tǒng)計學意義時,再用LSD-t檢驗進行兩兩比較,P0.05說明差別在統(tǒng)計學上具有顯著意義。具體說明如下：F1、P1表示同一導(dǎo)聯(lián)的功率值隨時間延長的變化情況,當P10.05時4個時期的功率值不全相同,差異有統(tǒng)計學意義。此時再進行兩兩比較,以麻醉期作為對照組,其他3個時期的功率值均與麻醉期相比較,當差異有統(tǒng)計學意義時用*表示。F2、P2表示導(dǎo)聯(lián)的配對比較,即左右相對應(yīng)的導(dǎo)聯(lián)(如01/02)的LSD-t檢驗,當P20.05時說明左右相對應(yīng)的導(dǎo)聯(lián)(如01/02)的功率值在4個時期不相同,可認為左右腦區(qū)的功率值不同。結(jié)果：4個時期(麻醉期、灌注期、低溫維持期、復(fù)溫期)4個頻段的腦電波(δ、θ、α、β)絕對功率值不全相同,差異有統(tǒng)計學意義(P10.05)。此時再進行兩兩比較,與麻醉期相比,灌注期和低溫維持期的絕對功率值與其有顯著差異(*表示P0.05),相反,復(fù)溫期的絕對功率值與其無顯著差異(P0.05)。說明隨著猴腦低溫灌注開始,4個頻段的腦電波各腦區(qū)的絕對功率值均開始下降,到低溫維持期時各腦區(qū)絕對功率值均最低。復(fù)溫期時各腦區(qū)的絕對功率值恢復(fù)到低溫灌注前的水平。對左右相對應(yīng)的導(dǎo)聯(lián)(如01/02)的絕對功率值進行LSD-t檢驗,4個頻段的腦電波絕對值各時段左右對應(yīng)導(dǎo)聯(lián)之間差異均無統(tǒng)計學意義(P20.05),提示低溫灌注過程中左右腦區(qū)的4個頻段的腦電波絕對功率值變化無差異。結(jié)論：1在低溫維持期(腦溫降至≤18℃時)腦電功率譜四個頻段波(δ、 θ、α、β)的絕對功率值雖最低但存在,提示在超深低溫狀態(tài)下仍有腦電活動,且以慢波(δ、θ)為主；2低溫灌注過程中腦代謝速率降低,神經(jīng)功能受抑制,復(fù)溫后腦代謝和神經(jīng)功能逐漸恢復(fù)降溫前水平,從腦電生理角度上證實了低溫的腦保護作用；3低溫灌注過程中左右兩側(cè)腦代謝可能在低溫灌注過程中無差異。
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R651

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1 胡小剛;猴腦選擇性超深低溫斷血流復(fù)蘇對腦電生理影響的研究[D];昆明醫(yī)科大學;2016年

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本文編號：1168409