MMP-2、MMP-9在大鼠深靜脈血栓形成過程的表達及意義的實驗研究
本文關鍵詞:MMP-2、MMP-9在大鼠深靜脈血栓形成過程的表達及意義的實驗研究
更多相關文章: 深靜脈血栓形成 基質金屬蛋白酶-2 基質金屬蛋白酶-9
【摘要】:目的:構建成功的SD大鼠下腔靜脈血栓模型,研究深靜脈血栓形成過程。并初步探討MMP-2、MMP-9的表達情況在靜脈血栓形成過程中作用。方法:將體重約250-300g左右的60只SD大鼠隨機分為A、B、C、D四組,A組不作處理,對B、C、D組進行血栓模型建立,采用穩(wěn)定的血栓形成造模方法,采取腹腔麻醉大鼠,顯露下腔靜脈,將左腎靜脈與腹主動脈游離,在腎靜脈下方部分結扎下腔靜脈以及較大的屬支。將1mm直徑的導絲于下腔靜脈旁平行放置,在左腎靜脈匯入下腔靜脈下方用3-0普通絲線將下腔靜脈與導絲一起結扎,抽出導絲。在結扎線下方用蚊式鉗鉗夾下腔靜脈一次,時間約5秒鐘作用,鉗夾以蚊式鉗扣半齒為度。用生理鹽水沖洗腹腔,關腹縫合。取A、B、C、D組的靜脈壁及血栓標本用于病理形態(tài)學進行MMP-2、MMP-9的免疫組化觀察。應用熒光定量PCR技術分別檢測血栓形成過程中下腔靜脈壁內的MMP-2、MMP-9的mRNA的表達。結果:造模過程中實驗組大鼠均有一定量的血栓形成。造模過程中發(fā)現1d時有明顯血栓形成,3d血栓形成到達,7d為血栓形成減少。免疫組化及熒光定量PCR檢測提示:MMP-2、MMP-9的表達量在建模后1d至3d的過程中表達量明顯升高,在建模7d表達量減少,對照組與實驗組比較,具有統(tǒng)計學差異。結論:本實驗中大鼠靜脈血栓模型的建立操作上比較簡單,血栓形成率較高且血栓形成比較穩(wěn)定,對于大鼠下腔靜脈血栓形成過程為后續(xù)實驗研究對照提供了可行性。MMP-2、MMP-9在大鼠下腔靜脈血栓形成過程的不同時期成不同的趨勢表達與深靜脈血栓形成存在密切一定的相關性。
【關鍵詞】:深靜脈血栓形成 基質金屬蛋白酶-2 基質金屬蛋白酶-9
【學位授予單位】:南昌大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R543.6
【目錄】:
- 摘要3-4
- ABSTRACT4-8
- 第1章 前言8-12
- 第2章 材料與方法12-19
- 2.1 實驗對象12
- 2.2 試劑與器材12-13
- 2.2.1 主要實驗試劑12
- 2.2.2 實驗器材12-13
- 2.3 方法13-18
- 2.3.1 實驗分組:將60只SD大鼠隨機分為A、B、C、D四組13
- 2.3.2 血栓模型的建立13-14
- 2.3.3 標本收集14
- 2.3.4 組織學觀察14-15
- 2.3.5 RT-PCR檢測DVT大鼠中mmp2、mmp9的表達變化15-18
- 2.4 統(tǒng)計學處理18-19
- 第3章 結果19-23
- 3.1 免疫組化化學觀察結果19-20
- 3.2 熒光定量PCR檢測MMP2、MMP9 mRNA結果20-21
- 3.3 大鼠下腔靜脈壁內皮細胞MMP-2、MMP-9 熒光定量PCR結果21-23
- 第4章 討論23-29
- 第5章 結論29-30
- 致謝30-31
- 參考文獻31-33
- 附圖33-35
- 綜述 MMP-2、MMP-9 在深靜脈血栓形成、溶解過程中的作用研究進展35-43
- 參考文獻41-43
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