神經(jīng)套接修復(fù)大鼠神經(jīng)對脊髓前角GFAP表達(dá)的研究
發(fā)布時間:2017-10-14 10:28
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【摘要】:研究目的:應(yīng)用神經(jīng)套接修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)損傷,并觀察其坐骨神經(jīng)功能恢復(fù)情況,探討神經(jīng)套接修復(fù)是否能促進(jìn)大鼠脊髓前角膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)的表達(dá)。材料和方法:材料:健康成年SD大鼠78只,雄性,體重200-250g;Neurotube神經(jīng)套接管;免疫組織化學(xué)染色試劑盒,兔抗人GFAP多克隆抗體,TUNEL試劑盒,34X-雙人雙目手術(shù)顯微鏡方法:①取72只健康成年SD大鼠,采用100g/L水合氯醛0.5m L腹腔麻醉。股后部正中切口,參考Valero等的模型制備方法,無菌條件下顯露右坐骨神經(jīng),在坐骨結(jié)節(jié)下方8mm處,用17cm彎血管鉗尖端鉗夾坐骨神經(jīng)(鉗夾至第2扣,時間為30s),造成坐骨神經(jīng)重度鉗夾損傷模型。利用鉗夾法建立坐骨神經(jīng)鉗夾傷模型后隨機(jī)分為Neurotube神經(jīng)套接管修復(fù)組(A組)和對照組(B組),每組36只;剩余6只大鼠設(shè)為空白組(C組),不進(jìn)行任何處理;②A組建模后立即行Neurotube神經(jīng)套接管套接修復(fù)術(shù)(將Neurotube神經(jīng)套接管剪開包裹坐骨神經(jīng)損傷段,并與神經(jīng)外膜縫合),而B組不進(jìn)行處理。分別于術(shù)后1、3、7、14、21、28天隨機(jī)取空白組1只大鼠,實(shí)驗(yàn)組及對照組各6只大鼠,麻醉固定后取L 4~6節(jié)段脊髓約1 cm,石蠟包埋,切片,每只大鼠每種染色選2張切片。結(jié)果:對照組大鼠右后肢出現(xiàn)不同程度的水腫、自噬、臀部肌肉萎縮等現(xiàn)象及運(yùn)動功能障礙,如前后肢運(yùn)動不一致、軀體重心偏移等。相比較而言實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)這些癥狀的時間相對對照組晚、嚴(yán)重程度也相對比對照組輕,并能在對照組之前出現(xiàn)好轉(zhuǎn)。對照組大鼠在3周左右其右后肢的運(yùn)動功能開始有不同程度的恢復(fù),實(shí)驗(yàn)組則在一至兩周之后就有所好轉(zhuǎn)?瞻捉M大鼠光鏡下可見胞漿呈明顯的黃棕色星形膠質(zhì)細(xì)胞,胞體突起較多,核較小,呈圓形或橢圓形,染色質(zhì)少。術(shù)后星形膠質(zhì)細(xì)胞胞體大,胞體突起分枝多且粗大。統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示,從術(shù)后第一天開始實(shí)驗(yàn)組、對照組膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)的表達(dá)開始升高,第十四天時達(dá)到高峰,且實(shí)驗(yàn)組膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)的表達(dá)量明顯較對照組高(P0.01),對照組的膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)高表達(dá)僅持續(xù)到十四天,到第二十八天時基本恢復(fù)正常水平,而實(shí)驗(yàn)組的膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)到第二十八天時表達(dá)水平依然比較高。光鏡下,脊髓凋亡前角運(yùn)動神經(jīng)元細(xì)胞陽性表達(dá)在細(xì)胞核,表現(xiàn)為細(xì)胞核呈棕黃色,染色質(zhì)呈濃聚致密的斑點(diǎn)狀,核固縮,細(xì)胞皺縮、碎裂。對照組和實(shí)驗(yàn)組術(shù)后第一天即出現(xiàn)TUNEL染色陽性細(xì)胞,十四天達(dá)高峰,二十一天時明顯減少。實(shí)驗(yàn)組凋亡細(xì)胞較對照組明顯減少(P0.05或P0.01)。結(jié)論:神經(jīng)套接修復(fù)能促進(jìn)大鼠脊髓前角膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)的表達(dá),有利于神經(jīng)損傷的修復(fù)。
【關(guān)鍵詞】:神經(jīng)套接修復(fù) 周圍神經(jīng)損傷 星形膠質(zhì)細(xì)胞 膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP) 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R651.3
【目錄】:
- 中英文縮寫詞5-6
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-11
- 前言11-14
- 材料與方法14-17
- 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-19
- 討論19-25
- 結(jié)論25-26
- 參考文獻(xiàn)26-31
- 附圖31-34
- 綜述34-41
- 參考文獻(xiàn)38-41
- 成果目錄41-42
- 致謝42
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 楊志東,姚珍松,何振輝;補(bǔ)氣通絡(luò)方對大鼠坐骨神經(jīng)損傷后功能與結(jié)構(gòu)恢復(fù)的影響[J];新中醫(yī);2002年07期
,本文編號:1030572
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