發(fā)布時間：2017-09-14 03:37

  本文關(guān)鍵詞：B細(xì)胞活化因子在牙周炎與肥胖關(guān)系中作用的初步研究

  更多相關(guān)文章： B細(xì)胞活化因子 牙周炎 肥胖 出血指數(shù) 牙齦組織 人牙齦成纖維細(xì)胞 高糖

【摘要】：目的:通過流行病學(xué)調(diào)查及生化檢測,分析血清B細(xì)胞活化因子(B cell activating factor,BAFF)水平與牙周臨床指標(biāo)的關(guān)系;通過檢測人牙齦成纖維細(xì)胞(human gingival fibroblasts,HGFs)是否表達(dá)BAFF及其受體,比較慢性牙周炎患者和健康志愿者牙齦組織BAFF及其受體表達(dá)變化,推測BAFF及其受體是否參與牙周炎癥過程;通過分析血清BAFF與肥胖的關(guān)系,以及高糖刺激HGFs后BAFF、脂肪分化標(biāo)志基因、炎癥趨化因子的表達(dá),初步探索BAFF在牙周炎和肥胖之間的作用。方法:1.調(diào)查中老年人群身高、體重等一般情況,根據(jù)社區(qū)牙周指數(shù)(community periodontal index,CPI)選取指數(shù)牙,檢查其菌斑指數(shù)(plaque index,PLI)、探診深度(probing depth,PD)、附著喪失(attachment loss,AL)、出血指數(shù)(bleeding index,BI)等牙周臨床指標(biāo),獲得空腹血糖、甘油三酯等輔助檢查結(jié)果,酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測血清BAFF水平,分析血清BAFF水平與牙周臨床指標(biāo)的關(guān)系。2.收集健康成人HGFs及外周血,組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)HGFs,取第2-3代細(xì)胞采用流式細(xì)胞術(shù)及逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測BAFF及其受體B細(xì)胞活化因子受體(B cell activating factor receptor,BAFF-R)、B細(xì)胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)、跨膜激活劑和鈣調(diào)素相互作用因子(transmembrane activator and calcium-modulating cyclophilin ligand interactor,TACI)的表達(dá),密度梯度離心法分離外周血單個核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),以B細(xì)胞的表達(dá)為陽性對照;收集正常和慢性牙周炎患者牙齦組織,實時定量PCR(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)檢測BAFF及其受體表達(dá)變化。3.根據(jù)體質(zhì)指數(shù)(body mass index,BMI)將調(diào)查人群分為正常、超重、肥胖三組,采用方差分析三組間輔助檢查結(jié)果、牙周臨床指標(biāo)及血清BAFF水平與肥胖的關(guān)系。4.采用高糖刺激HGFs 1d、3d、5d、7d、9d,real-time PCR檢測BAFF、過氧化物酶增殖物活化受體γ2(peroxisome proliferator-activated receptorγ2,PPARγ2)、細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制物3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)、CC趨化因子配體2(CC chemokine ligand2,CCL2)的表達(dá)情況。結(jié)果:1.隨著PLI、PD、AL的升高,血清BAFF有升高趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。當(dāng)BI≥2時,血清BAFF水平明顯升高,有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。2.流式細(xì)胞檢測發(fā)現(xiàn):健康成人HGFs幾乎不表達(dá)BAFF-R、BCMA、TACI。RT-PCR顯示健康成人HGFs中BAFF mRNA水平較弱,BAFF-R、BCMA、TACI的mRNA水平極弱。3.與健康牙齦組織比較,慢性牙周炎牙齦組織BAFF、TACI mRNA表達(dá)水平明顯升高(P0.05)。而BAFFR、BCMA mRNA表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。4.正常、超重、肥胖三組間人群的基本情況無差異,血常規(guī)指標(biāo)在正常范圍內(nèi),空腹血糖、甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇及牙周指標(biāo)中的PLI、PD、AL在三組間無差異(P0.05);而BI在肥胖組中明顯升高(P0.05);血清BAFF水平在肥胖組比正常組升高(P0.05)。5.對比低糖對照組,高糖刺激會引起HGFs BAFF mRNA表達(dá)升高(P0.05);PPARγ2有升高趨勢;SOCS3在9d時升高明顯(P0.05);CCL2在3、5、7、9d逐漸升高,在5、7、9d升高明顯(P0.05)。結(jié)論:1.BAFF與牙齦出血指數(shù)有相關(guān)性,而且BAFF與其受體TACI在炎性牙齦組織中高表達(dá),提示BAFF可能參與牙周炎癥的過程。2.BAFF與肥胖、牙齦炎癥存在相關(guān)性,提示BAFF在肥胖患者的牙周炎中起著重要的作用。3.高糖能在一定程度上促進(jìn)HGFs脂肪向分化,促進(jìn)脂肪炎性因子如BAFF、SOCS3和炎性趨化因子CCL2的表達(dá),推測BAFF可能參與了牙周炎與肥胖間關(guān)系的調(diào)節(jié)。
【關(guān)鍵詞】：B細(xì)胞活化因子 牙周炎 肥胖 出血指數(shù) 牙齦組織 人牙齦成纖維細(xì)胞 高糖
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R781.42;R589.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 縮略語/符號說明11-13
• 前言13-16
• 研究現(xiàn)狀、成果13-15
• 研究目的、方法15-16
• 一、血清BAFF與牙周臨床指標(biāo)的關(guān)系16-26
• 1.1 對象和方法16-19
• 1.1.1 主要設(shè)備與儀器16
• 1.1.2 主要試劑16-17
• 1.1.3 調(diào)查對象17
• 1.1.4 調(diào)查17
• 1.1.5 酶聯(lián)免疫吸附試驗17-18
• 1.1.6 統(tǒng)計學(xué)方法18-19
• 1.2 結(jié)果19-22
• 1.2.1 調(diào)查人員的一般情況19-20
• 1.2.2 血清BAFF與牙周臨床指標(biāo)的關(guān)系分析20-22
• 1.3 討論22-25
• 1.4 小結(jié)25-26
• 二、BAFF在HGFs及正常、慢性牙周炎患者牙齦組織的表達(dá)26-41
• 2.1 實驗準(zhǔn)備26-28
• 2.1.1 主要設(shè)備與儀器26-27
• 2.1.2 主要試劑27-28
• 2.2 對象和方法28-33
• 2.2.1 PBMC的分離28-29
• 2.2.2 HGFs原代培養(yǎng)29
• 2.2.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測BAFF受體表達(dá)29-30
• 2.2.4 RT-PCR檢測BAFF及受體表達(dá)30-33
• 2.2.5 real-time PCR檢測正常、慢性牙周炎患者牙齦組織BAFF及三個受體的表達(dá)33
• 2.3 結(jié)果33-37
• 2.3.1 HGFs原代培養(yǎng)33-34
• 2.3.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測B細(xì)胞及HGFs上BAFF及受體表達(dá)34-35
• 2.3.3 RT-PCR檢測HGFs BAFF及三個受體的mRNA水平35
• 2.3.4 real-time PCR檢測正常、慢性牙周炎患者牙齦組織BAFF及三個受體的表達(dá)35-37
• 2.4 討論37-40
• 2.5 小結(jié)40-41
• 三、BAFF在牙周炎與肥胖間的作用41-47
• 3.1 實驗準(zhǔn)備41
• 3.1.1 主要設(shè)備與儀器41
• 3.1.2 主要試劑41
• 3.2 對象和方法41-42
• 3.2.1 實驗對象41
• 3.2.2 實驗分組41
• 3.2.3 統(tǒng)計學(xué)方法41-42
• 3.3 結(jié)果42-44
• 3.3.1 正常、超重、肥胖三組輔助檢查及牙周臨床指標(biāo)的比較42
• 3.3.2 正常、超重、肥胖三組血清BAFF水平的比較42-44
• 3.4 討論44-46
• 3.5 小結(jié)46-47
• 四、高糖刺激下HGFs BAFF、脂肪分化標(biāo)志基因及炎癥趨化因子的表達(dá)47-53
• 4.1 實驗準(zhǔn)備47
• 4.1.1 主要設(shè)備與儀器47
• 4.1.2 主要試劑47
• 4.2 對象和方法47-48
• 4.2.1 實驗分組47-48
• 4.2.2 real-time PCR檢測HGFs BAFF、脂肪分化標(biāo)志基因及炎癥趨化因子的表達(dá)變化48
• 4.3 結(jié)果48-51
• 4.3.1 real-time PCR檢測HGFs BAFF、脂肪分化標(biāo)志基因及炎癥趨化因子的表達(dá)變化48-51
• 4.4 討論51-52
• 4.5 小結(jié)52-53
• 結(jié)論53-54
• 參考文獻(xiàn)54-61
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明61-62
• 綜述 脂肪細(xì)胞因子在牙周炎中作用的研究進(jìn)展62-73
• 綜述參考文獻(xiàn)67-73
• 致謝73

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本文編號：847658