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VEGFs與其受體在小鼠牙胚發(fā)育過程中的表達研究

發(fā)布時間:2017-09-11 18:36

  本文關(guān)鍵詞:VEGFs與其受體在小鼠牙胚發(fā)育過程中的表達研究


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【摘要】:目的:初步明確VEGFs與VEGFRs在不同發(fā)育時期BALB/c小鼠的下頜磨牙牙胚中基因的表達變化與蛋白表達定位,探索VEGFs與VEGFRs在牙胚發(fā)育過程中可能的作用。材料與方法:(1)通過顯微分離獲得BALB/c小鼠E11.5、E13.5下頜骨和E15.5、E16.5、E18.5、PN1胎鼠下頜磨牙牙胚并制備c DNA文庫。通過RT-PCR法明確了VEGFs與VEGFRs基因在牙胚發(fā)生發(fā)育過程中的表達趨勢。(2)通過熒光免疫技術(shù)檢測VEGFs與VEGFRs蛋白的在E12、E14、E15、E16、E18、PN1牙胚中的定位。結(jié)果:(1)通過本研究獲得E11.5、E13.5下頜骨,E15.5、E16.5、E18.5、PN1胎鼠下頜磨牙牙胚c DNA文庫,為評估其他基因在BALB/c小鼠下頜骨與下頜磨牙牙胚發(fā)育過程中的表達變化的研究提供c DNA來源。VEGFs與VEGFRs的基因表達貫穿于牙胚蕾狀期到牙胚鐘狀期牙胚發(fā)育的各個階段。(2)通過熒光免疫染色技術(shù)并未檢測出VEGF-A、VEGF-C、VEGFR-1蛋白的在牙胚中的定位,卻在頜面部其他器官發(fā)現(xiàn)VEGF-B、VEGF-D、VEGFR-2、VEGFR-3等蛋白的表達定位。結(jié)論:本研究通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)和免疫熒光技術(shù)相結(jié)合的方法,初步明確了VEGFs與VEGFRs在不同發(fā)育時期BALB/c小鼠的下頜磨牙牙胚中基因的表達變化,以及VEGF-B、VEGF-D、VEGFR-2、VEGFR-3的蛋白表達定位。本研究還不能解釋VEGFs與VEGFRs蛋白在牙胚及頜面部其他器官的發(fā)育過程中的明確作用,仍需要利用蛋白與核酸的定量定性分析、器官培養(yǎng)等方法繼續(xù)研究。
【關(guān)鍵詞】:血管內(nèi)皮生長因子 牙形成 BALB/c小鼠 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng) 免疫熒光技術(shù)
【學(xué)位授予單位】:上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R781
【目錄】:
  • 摘要5-6
  • ABSTRACT6-9
  • 前言9-11
  • 第一部分 VEGFs和VEGFRs基因在小鼠下頜磨牙牙胚發(fā)育過程中表達變化11-24
  • 1 材料與方法11-16
  • 2 結(jié)果16-22
  • 3 討論22-23
  • 4 小結(jié)23-24
  • 第二部分 VEGFs和VEGFRs蛋白在小鼠頜面部器官發(fā)育過程中的組織學(xué)定位24-36
  • 1 材料與方法24-27
  • 2 結(jié)果27-33
  • 3 討論33-35
  • 4 小結(jié)35-36
  • 全文總結(jié)36-37
  • 參考文獻37-40
  • 附錄:綜述40-46
  • 參考文獻43-46
  • 致謝46-47
  • 在讀期間發(fā)表文章及成果47

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本文編號:832404


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