本文關(guān)鍵詞：VEGFs與其受體在小鼠牙胚發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)研究

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【摘要】：目的:初步明確VEGFs與VEGFRs在不同發(fā)育時(shí)期BALB/c小鼠的下頜磨牙牙胚中基因的表達(dá)變化與蛋白表達(dá)定位,探索VEGFs與VEGFRs在牙胚發(fā)育過(guò)程中可能的作用。材料與方法:(1)通過(guò)顯微分離獲得BALB/c小鼠E11.5、E13.5下頜骨和E15.5、E16.5、E18.5、PN1胎鼠下頜磨牙牙胚并制備c DNA文庫(kù)。通過(guò)RT-PCR法明確了VEGFs與VEGFRs基因在牙胚發(fā)生發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)趨勢(shì)。(2)通過(guò)熒光免疫技術(shù)檢測(cè)VEGFs與VEGFRs蛋白的在E12、E14、E15、E16、E18、PN1牙胚中的定位。結(jié)果:(1)通過(guò)本研究獲得E11.5、E13.5下頜骨,E15.5、E16.5、E18.5、PN1胎鼠下頜磨牙牙胚c DNA文庫(kù),為評(píng)估其他基因在BALB/c小鼠下頜骨與下頜磨牙牙胚發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)變化的研究提供c DNA來(lái)源。VEGFs與VEGFRs的基因表達(dá)貫穿于牙胚蕾狀期到牙胚鐘狀期牙胚發(fā)育的各個(gè)階段。(2)通過(guò)熒光免疫染色技術(shù)并未檢測(cè)出VEGF-A、VEGF-C、VEGFR-1蛋白的在牙胚中的定位,卻在頜面部其他器官發(fā)現(xiàn)VEGF-B、VEGF-D、VEGFR-2、VEGFR-3等蛋白的表達(dá)定位。結(jié)論:本研究通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和免疫熒光技術(shù)相結(jié)合的方法,初步明確了VEGFs與VEGFRs在不同發(fā)育時(shí)期BALB/c小鼠的下頜磨牙牙胚中基因的表達(dá)變化,以及VEGF-B、VEGF-D、VEGFR-2、VEGFR-3的蛋白表達(dá)定位。本研究還不能解釋VEGFs與VEGFRs蛋白在牙胚及頜面部其他器官的發(fā)育過(guò)程中的明確作用,仍需要利用蛋白與核酸的定量定性分析、器官培養(yǎng)等方法繼續(xù)研究。
【關(guān)鍵詞】：血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 牙形成 BALB/c小鼠 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 免疫熒光技術(shù)
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R781
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-9
• 前言9-11
• 第一部分 VEGFs和VEGFRs基因在小鼠下頜磨牙牙胚發(fā)育過(guò)程中表達(dá)變化11-24
• 1 材料與方法11-16
• 2 結(jié)果16-22
• 3 討論22-23
• 4 小結(jié)23-24
• 第二部分 VEGFs和VEGFRs蛋白在小鼠頜面部器官發(fā)育過(guò)程中的組織學(xué)定位24-36
• 1 材料與方法24-27
• 2 結(jié)果27-33
• 3 討論33-35
• 4 小結(jié)35-36
• 全文總結(jié)36-37
• 參考文獻(xiàn)37-40
• 附錄：綜述40-46
• 參考文獻(xiàn)43-46
• 致謝46-47
• 在讀期間發(fā)表文章及成果47

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本文編號(hào)：832404