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Connexin43和ERK調(diào)節(jié)牽張力誘導(dǎo)人牙周膜成纖維細(xì)胞的信號傳導(dǎo)

發(fā)布時間:2017-09-08 19:06

  本文關(guān)鍵詞:Connexin43和ERK調(diào)節(jié)牽張力誘導(dǎo)人牙周膜成纖維細(xì)胞的信號傳導(dǎo)


  更多相關(guān)文章: 牙周膜細(xì)胞 機(jī)械拉力 Cx43 成骨 破骨


【摘要】:在正畸骨改建的過程中,牙周膜細(xì)胞調(diào)節(jié)及傳遞力學(xué)信號,并持續(xù)分泌大量的細(xì)胞因子和生長因子,作用于骨改建相關(guān)效應(yīng)細(xì)胞,引起牙槽骨的改建并最終引起牙齒的移動。牙周膜成纖維細(xì)胞是牙周膜中最廣泛的細(xì)胞,在維持牙周內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定性、傳遞力學(xué)信號等方面具有重要的意義。間隙連接蛋白Connexin 43 (Cx43)在維持骨環(huán)境穩(wěn)定性和骨改建中起著至關(guān)重要的作用。但是Cx43在人牙周膜成纖維細(xì)胞(human periodontal ligament fibroblasts, hPDLFs)中調(diào)節(jié)骨改建的作用機(jī)理還不是很清楚。本研究檢測了人牙周膜成纖維細(xì)胞受拉力刺激后成骨、破骨相關(guān)信號分子的表達(dá)量及與Cx43對表達(dá)的相關(guān)關(guān)系,并且進(jìn)一步觀察了力信號通過Cx43在牙周膜細(xì)胞內(nèi)的信號傳導(dǎo)通路。方法:對體外培養(yǎng)的人牙周膜成纖維細(xì)胞施加基底變形量為5%的周期性牽張力,分別檢測其成骨、破骨相關(guān)信號分子在基因和蛋白水平的表達(dá)與Cx43的相關(guān)關(guān)系:采用siRNA干擾技術(shù)抑制hPDLFs中Cx43基因表達(dá)和化學(xué)抑制劑PD98059抑制ERK信號通路后周期性牽張力,對相關(guān)信號分子的表達(dá)影響結(jié)果:細(xì)胞受力后,Cx43、Osterix、RUNX2、OPG表達(dá)隨加力時間增加表達(dá)均明顯增強(qiáng),而RANKL表達(dá)隨時間變化逐漸降低。應(yīng)用siRNA抑制Cx43的表達(dá)后,成骨相關(guān)因子的表達(dá)量也被抑制,RANKL表達(dá)量反而增加。與Cx43相類似,受力后磷酸化的ERKl/2表達(dá)量也增強(qiáng),隨著Cx43表達(dá)量的降低而受到抑制。應(yīng)用PD98059抑制ERKl/2信號通路后,Osterix、RUNX2、OPG表達(dá)量也受到明顯抑制,而RANKL表達(dá)量則明顯增加。結(jié)論:周期性牽張力可以通過Cx43-ERK1/2信號通路調(diào)節(jié)人牙周膜成纖維細(xì)胞的成骨、破骨相關(guān)信號分子的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】:牙周膜細(xì)胞 機(jī)械拉力 Cx43 成骨 破骨
【學(xué)位授予單位】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R783.5
【目錄】:
  • 縮略詞表5-7
  • 中文摘要7-8
  • 英文摘要8-9
  • 引言9-11
  • 實(shí)驗一 周期性牽張力對人牙周膜成纖維細(xì)胞間隙連接蛋白Cx43的影響11-21
  • 1、材料與方法11-17
  • 1.1 主要材料與設(shè)備11-13
  • 1.2 方法13-17
  • 1.3 統(tǒng)計分析17
  • 2、結(jié)果17-19
  • 2.1 hPDLFs的形態(tài)學(xué)觀察17-18
  • 2.2 hPDLFs間隙連接蛋白Cx43分布18
  • 2.3 周期性牽張為對hPDLFs中Cx43基因和蛋白表達(dá)的影響18-19
  • 3、討論19-21
  • 實(shí)驗二 周期性牽張力作用下Cx43對人牙周膜成纖維細(xì)胞骨改建相關(guān)信號因子表達(dá)的影響21-28
  • 1、材料和方法21-23
  • 1.1 主要材料和設(shè)備21
  • 1.2 方法21-22
  • 1.3 統(tǒng)計分析22-23
  • 2、結(jié)果23-26
  • 2.1 周期性牽張力對hP化Fs中骨改建相關(guān)信號因子基因和蛋白表達(dá)的影響23-24
  • 2.2 抑制間隙連接蛋白Cx43對hPDLFs中骨改建相關(guān)信號因子基因和功能蛋白表達(dá)的影響24-26
  • 3、討論26-28
  • 3.1 間隙連接蛋白Cx43介導(dǎo)人牙周膜成纖維細(xì)胞內(nèi)成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)26-27
  • 3.2 間隙連接蛋白Cx43介導(dǎo)的人牙周膜成纖維細(xì)胞內(nèi)破骨細(xì)胞生成相關(guān)因子的表迭27-28
  • 實(shí)驗三 周期性牽張力作用下E版1/2對人牙周膜成纖維細(xì)胞骨改建相關(guān)信號因子表達(dá)的影響28-33
  • 1、材料和方法28-29
  • 1.1 主要材料和設(shè)備28
  • 1.2 方法28-29
  • 1.3 統(tǒng)計分析29
  • 2、結(jié)果29-30
  • 2.1 周期性牽張力刺激對hPDLFs中ERK1/2信號分子的作用29
  • 2.2 阻斷E版1/2信號通路對hPDLFs中骨改建相關(guān)信號因子基因和功能蛋白表泣的影響29-30
  • 3、討論30-33
  • 3.1 周期性牽張力對hPDLFs中ERKl/2信號通路的影響30-31
  • 3.2 ERK1/2信號通路介導(dǎo)周期性拉力刺激下人牙周膜成纖維細(xì)胞成骨、破骨相關(guān)蛋白的表達(dá)31-33
  • 總結(jié)33-34
  • 參考文獻(xiàn)34-38
  • 文獻(xiàn)綜述38-45
  • 參考文獻(xiàn)41-45
  • 附錄45-48
  • 致謝48-49
  • 個人簡歷49

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本文編號:815776

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