聚丙烯酸和谷氨酸促進(jìn)牙表面釉質(zhì)樣羥基磷灰石仿生再礦化的體外研究
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【摘要】:背景齲病是常見(jiàn)口腔疾病之一。除根部齲外,絕大部分齲損都從釉質(zhì)開(kāi)始,故研究釉質(zhì)齲的發(fā)病機(jī)制對(duì)于齲病的防治十分重要。齲病的早期表現(xiàn)為釉質(zhì)脫礦形成白堊色病變,以后,由于色素沉著,白色斑塊狀病變有黃棕色色素沉著,并向周圍組織擴(kuò)展,病變區(qū)逐漸變得粗糙,最終組織崩潰,齲洞形成。在齲病防治中,早期未形成齲洞可采用再礦化療法進(jìn)行治療;形成齲洞后需進(jìn)行充填治療。因此,齲病的早期預(yù)防和控制尤為重要,F(xiàn)有針對(duì)釉質(zhì)脫礦常采用的再礦化材料主要有氟化物溶液、含氟涂料、含氟牙膏等。然而過(guò)高濃度的氟又存在潛在毒副作用。故尋找安全有效的再礦化制劑尤為重要。根據(jù)已有研究,谷氨酸(glutamic acid, Glu)作為有機(jī)模板對(duì)于牙釉質(zhì)再礦化的作用已被證實(shí),在高濃度Glu存在下,其有效絡(luò)合溶液中的鈣離子,從而大幅度降低溶液的過(guò)飽和度,最終抑制了磷酸鈣的生成,但在一定范圍內(nèi)Glu濃度越高,促進(jìn)礦化效果越明顯。前期研究證實(shí)含有谷氨酸和聚丙烯酸(polyacrylic acid, PAA)的仿生策略能促進(jìn)脫礦牙本質(zhì)的仿生再礦化,據(jù)此我們推測(cè),含有谷氨酸和聚丙烯酸的礦化液同樣能促進(jìn)牙釉質(zhì)的仿生再礦化。目的通過(guò)Glu調(diào)控PAA穩(wěn)定的無(wú)定形磷酸鈣(amorphous phosphate calcium,ACP)的結(jié)晶動(dòng)力學(xué),加快脫礦牙釉質(zhì)的仿生再礦化。方法本實(shí)驗(yàn)分為兩部分,首先應(yīng)用含相同濃度Glu但不同濃度的PAA調(diào)控ACP的結(jié)晶動(dòng)力學(xué),并將合成的ACP顆粒應(yīng)用于脫礦牙釉質(zhì)的仿生再礦化。通過(guò)掃描電子顯微鏡(Scanning Electron Microscope, SEM)、透射電鏡(Transmission Electron Microscope, TEM)表征合成的ACP的相變時(shí)間以及再礦化牙釉質(zhì)形貌及結(jié)構(gòu)。最后應(yīng)用顯微硬度儀檢測(cè)再礦化牙釉質(zhì)層的顯微機(jī)械性能。1.將新近因正畸治療拔除的牙體去凈軟垢、牙石和軟組織,用硬組織切片機(jī)切割為0.5×0.5×0.2cm3大小的牙釉質(zhì)片,共計(jì)40個(gè)樣本,放入超聲清洗機(jī)中清洗10min,干燥后涂布臨床用37%磷酸酸蝕劑輕酸蝕60S,用去離子水反復(fù)沖洗后自然干燥,將牙釉質(zhì)片隨機(jī)分為4組(N=10),放入含有濃度為0μg/ml、50μg/ml、 200 μg/ml、 350 μg/ml的PAA再礦化液的礦化液中,Glu濃度均為20mmol/L,置于37.5℃恒溫水浴箱中培養(yǎng)一周,根據(jù)掃描電鏡結(jié)果選擇出礦化結(jié)果最好的PAA濃度a。2.設(shè)置實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組PAA濃度分別為a和0μg/ml,每組10個(gè)牙釉質(zhì)片,按照既定的時(shí)間點(diǎn)取樣,選擇出牙釉質(zhì)最短礦化時(shí)間。3.應(yīng)用顯微硬度儀檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組不同礦化時(shí)間點(diǎn)的再礦化牙釉質(zhì)的顯微機(jī)械性能。結(jié)果1.掃描電鏡顯示:PAA濃度為0μg/ml礦化7天的釉質(zhì)表面,可見(jiàn)一層疏松的無(wú)規(guī)則礦化物,PAA濃度分別為50、200、350μg/ml礦化7天釉質(zhì)表面均可見(jiàn)到順著釉質(zhì)天然結(jié)構(gòu)形成的一層魚(yú)鱗狀再礦化物,且隨著PAA濃度的升高,魚(yú)鱗狀結(jié)構(gòu)愈為明顯。2.PAA濃度為50μg/ml,礦化3h時(shí),溶液中晶體TEM圖片,可見(jiàn)ACP由無(wú)定形狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榈湫推瑺盍u基磷灰石形貌;礦化24h時(shí)牙釉質(zhì)片SEM圖片,可見(jiàn)牙釉質(zhì)表面形成了一層致密的與天然牙釉質(zhì)結(jié)構(gòu)類似的短棒狀晶體。PAA濃度為0μg/ml,礦化24h時(shí)牙釉質(zhì)片SEM圖片,可見(jiàn)牙釉質(zhì)表面也形成了一層薄片狀的晶體。3.經(jīng)過(guò)1-7天礦化后,各組的釉質(zhì)表面顯微硬度值都有不同程度提高,且都隨再礦化時(shí)間的延長(zhǎng)而增加,相同時(shí)間點(diǎn)時(shí),含PAA的實(shí)驗(yàn)組硬度恢復(fù)顯著高于對(duì)照組(P0.05),實(shí)驗(yàn)組第一天硬度就恢復(fù)了約30%,以后隨礦化時(shí)間延長(zhǎng)緩慢增加。對(duì)照組整體都隨礦化時(shí)間延長(zhǎng)而緩慢增加。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了PAA在釉質(zhì)再礦化過(guò)程中與Glu的促進(jìn)作用,PAA濃度越高,生成的晶體結(jié)構(gòu)愈具規(guī)則。含有50ug/mlPAA的礦化液,其中Glu濃度均為20mmol/L能在24h時(shí)完成脫礦牙釉質(zhì)的仿生再礦化。并且含PAA的實(shí)驗(yàn)組形成的再礦化牙釉質(zhì)的顯微機(jī)械性能較對(duì)照組有顯著提升。當(dāng)有PAA參與時(shí),再礦化形成的晶體結(jié)構(gòu)為接近于天然釉質(zhì)的短棒狀結(jié)構(gòu),而無(wú)PAA參與時(shí)形成的則是片狀的晶體。PAA作為一種陰離子聚合物,在它的骨架上含有大量的羧酸基團(tuán),能固定含有氨基的生物分子,并且能夠在水溶液中解離成羧酸根離子,從而提供靜電和空間排斥來(lái)避免顆粒聚集。所以我們相信,PAA這樣的特性可使其更廣泛地應(yīng)用于不同領(lǐng)域,尤其是生物仿生礦化領(lǐng)域。
【關(guān)鍵詞】:PAA 促進(jìn) 牙釉質(zhì) 再礦化 谷氨酸
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R781
【目錄】:
- 致謝4-6
- 中文摘要6-9
- Abstract9-13
- 縮略詞表13-15
- 1. 引言15-18
- 2. 材料與方法18-21
- 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-27
- 4. 討論27-30
- 5. 結(jié)論30-31
- 參考文獻(xiàn)31-35
- 綜述35-48
- 參考文獻(xiàn)43-48
- 作者簡(jiǎn)歷及在讀期間所取得的科研成果48
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):805088
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