溶膠-凝膠法制備鈦酸鋇涂層對L929細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期及凋亡的影響
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【摘要】:目的本課題從細(xì)胞生物學(xué)角度對新型純鈦烤瓷冠的中間涂層進(jìn)行生物安全性檢測,應(yīng)用MTT比色法和流式細(xì)胞儀定量測試的方法,通過觀察鈦酸鋇涂層浸提液對L929細(xì)胞的活性、增殖抑制情況、細(xì)胞周期變化及凋亡情況的影響,評價鈦酸鋇涂層的生物安全性,以期為鈦酸鋇涂層應(yīng)用于臨床提供實驗依據(jù)。方法本研究分為三部分:1溶膠-凝膠法制備鈦酸鋇涂層對L929細(xì)胞增殖的影響,實驗分四組:鈦酸鋇涂層的鈦瓷試件(A組)、常規(guī)鈦瓷試件(B組),并以含10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基為陰性對照組(C組),1%苯酚溶液為陽性對照組(D組),測定加樣后1d、3d、5d各組的吸光度值(OD),計算細(xì)胞相對增殖率(RGR),評定細(xì)胞毒性等級。2溶膠-凝膠法制備鈦酸鋇涂層對L929細(xì)胞細(xì)胞周期的影響,本實驗分為三組:含鈦酸鋇涂層的鈦瓷試件組、常規(guī)鈦瓷試件組,陰性對照組,用流式細(xì)胞儀檢測各組浸提液培養(yǎng)48h的L929細(xì)胞周期的變化。3溶膠-凝膠法制備鈦酸鋇涂層對L929細(xì)胞凋亡的影響,本實驗分為三組:含鈦酸鋇涂層的鈦瓷試件組、常規(guī)鈦瓷試件組,陰性對照組,采用Annexin V/PI法染色法,用流式細(xì)胞儀對細(xì)胞凋亡進(jìn)行定量檢測。結(jié)果1鈦酸鋇涂層的制備:溶膠凝膠法制備出鈦酸鋇涂層,掃描電鏡下涂層組織致密,有一定粗糙度,表面有紋理,無明顯裂紋;能譜分析數(shù)據(jù):Ti的原子百分率為10.97%,Ba為74.22%,O為7.17%,Si為5.91%,Al為1.73%。2本實驗室條件下細(xì)胞生長曲線結(jié)果:細(xì)胞的鏡下觀察及A值分析,L929細(xì)胞在本實驗室的最適生長密度為6×104/ml。3 MTT法檢測L929細(xì)胞增殖率、評價細(xì)胞毒級結(jié)果:同一培養(yǎng)時間,不同濃度浸提液與陽性對照組的吸光度值比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),100%鈦酸鋇涂層組吸光度值大于陰性對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);除陽性對照組外,各組濃度浸提液的吸光度值均隨著培養(yǎng)時間的延長而增加(P0.05),25%、50%、75%鈦酸鋇涂層組第1d吸光度與陰性對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),而到第5d,25%、50%、75%鈦酸鋇涂層組吸光度與陰性對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4 PI法測細(xì)胞周期結(jié)果,G1期:鈦酸鋇涂層組和常規(guī)鈦瓷結(jié)合組與陰性組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),鈦酸鋇涂層組與常規(guī)鈦瓷結(jié)合組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);S期:鈦酸鋇涂層組和常規(guī)鈦瓷結(jié)合組與陰性組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),鈦酸鋇涂層組與常規(guī)鈦瓷結(jié)合組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);G2期:三組間數(shù)值無明顯差異(P0.05)。5 PI/Annexin V檢測細(xì)胞凋亡結(jié)果:鈦酸鋇涂層組和常規(guī)鈦瓷結(jié)合組凋亡與陰性組凋亡比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),鈦酸鋇涂層組與常規(guī)鈦瓷結(jié)合組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1含有鈦酸鋇涂層的鈦瓷結(jié)合組與常規(guī)鈦瓷結(jié)合組比體外毒性試驗中無短期細(xì)胞毒性,并且有促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用。2與常規(guī)鈦瓷結(jié)合組比較,細(xì)胞周期和凋亡的影響無顯著性差異。3建議臨床使用鈦酸鋇涂層來增加鈦瓷結(jié)合強度,減少崩瓷瓷裂的現(xiàn)象發(fā)生,從而提高修復(fù)治療的成功率。
【關(guān)鍵詞】:鈦酸鋇涂層 L929細(xì)胞 細(xì)胞毒性 細(xì)胞周期 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】:華北理工大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R783.1
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-11
- 引言11-12
- 第1章 溶膠-凝膠法制備鈦酸鋇涂層對L929細(xì)胞增殖的影響12-27
- 1.1 材料和方法12-17
- 1.2 結(jié)果17-24
- 1.3 討論24-25
- 1.4 本章結(jié)論25
- 參考文獻(xiàn)25-27
- 第2章 溶膠-凝膠法制備的鈦酸鋇涂層對L929細(xì)胞周期的影響27-35
- 2.1 材料與方法27-31
- 2.2 結(jié)果31-32
- 2.3 討論32-33
- 2.4 本章結(jié)論33-35
- 第3章 溶膠凝膠法制備的鈦酸鋇涂層對L929細(xì)胞凋亡的影響35-44
- 3.1 材料與方法35-39
- 3.2 結(jié)果39-40
- 3.3 討論40-42
- 3.4 結(jié)論42
- 參考文獻(xiàn)42-44
- 第4章 綜述 牙科材料細(xì)胞毒性的研究進(jìn)展44-56
- 4.1 生物學(xué)評價的細(xì)胞44-45
- 4.2 生物相容性的評價方法45-49
- 4.3 生物安全性評價在口腔材料領(lǐng)域的應(yīng)用49-53
- 參考文獻(xiàn)53-56
- 結(jié)論56-57
- 致謝57-58
- 導(dǎo)師簡介58-59
- 作者簡介59-60
- 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集60
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,本文編號:722412
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