本文關(guān)鍵詞：體外共培養(yǎng)人牙髓干細(xì)胞對人牙囊干細(xì)胞增殖及成骨分化的影響

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【摘要】：目的:牙囊是牙齒發(fā)育早期包繞牙胚表面的疏松結(jié)締組織,牙囊與牙周相關(guān)組織的形成有密切關(guān)系。牙囊細(xì)胞存在于牙囊組織中,其已被證明在適當(dāng)?shù)臈l件下具有向成牙骨質(zhì)或成骨方向分化的潛力。但時下我們對于牙囊細(xì)胞成骨分化具體的機制仍不十分清楚。牙髓中的主要細(xì)胞是成牙本質(zhì)細(xì)胞,成牙本質(zhì)細(xì)胞在牙齒發(fā)育早期與牙囊細(xì)胞存在交互信號傳導(dǎo),彼此間有可能存在相互影響。因此本研究的目的是在體外條件下探索人牙髓干細(xì)胞(HDPSCs)對人牙囊干細(xì)胞(HDFSCs)增殖及成骨分化作用的影響。方法:1.利用改良的組織塊-消化聯(lián)合法對HDFSCs和HDPSCs進行分離、培養(yǎng),并采用細(xì)胞免疫組化方法、流式細(xì)胞術(shù)以及多向誘導(dǎo)方法對兩種細(xì)胞進行鑒定;2.體外共培養(yǎng)模型的構(gòu)建:采用0.4μm孔徑的Transwell小室構(gòu)建HDFSCs和HDPSCs體外共培養(yǎng)體系;3.HDFSCs增殖活性變化的檢測:采用24孔板規(guī)格的Transwell小室構(gòu)建共培養(yǎng)體系,應(yīng)用CCK-8檢測法對HDFSCs增殖活性進行檢測;4.HDFSCs成骨相關(guān)基因表達(dá)的檢測:采用6孔板規(guī)格的Transwell小室構(gòu)建共培養(yǎng)體系,共培養(yǎng)一周后,采用q RT-PCR對HDFSCs成骨相關(guān)基因ALP、Runx2、OPN、BSP及Col-1進行定量檢測,并運用2-△△Ct法進行結(jié)果分析。結(jié)果:1.成功分離、培養(yǎng)、鑒定HDFSCs和HDPSCs;2.HDFSCs增殖活性檢測結(jié)果:與對照組相比,與HDPSCs共培養(yǎng)后前3天,HDFSCs增值活性未見明顯變化,從第4天開始,共培養(yǎng)組HDFSCs增殖活性明顯高于對照組(P0.05);3.HDFSCs成骨相關(guān)基因表達(dá)結(jié)果:與對照組相比,共培養(yǎng)組HDFSCs成骨基因ALP、Runx2、OPN、BSP、Col-1的表達(dá)均明顯增高(P0.05)。結(jié)論:與HDPSCs共培養(yǎng)后,HDFSCs的增殖活性及成骨相關(guān)基因ALP、Runx2、OPN、BSP、Col-1的表達(dá)均增強。HDFSCs和HDPSCs共培養(yǎng)在骨再生研究中具有潛在的應(yīng)用價值。
【關(guān)鍵詞】：人牙囊干細(xì)胞 人牙髓干細(xì)胞 體外共培養(yǎng) 細(xì)胞增殖 成骨分化
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R781
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照4-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-13
• 第一部分 人牙囊干細(xì)胞和人牙髓干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定13-25
• 1 材料和方法14-20
• 2 結(jié)果20-23
• 3 討論23-25
• 第二部分 體外共培養(yǎng)人牙髓干細(xì)胞對人牙囊干細(xì)胞增殖活力的影響25-28
• 1 材料和方法25-26
• 2 結(jié)果26-27
• 3 討論27-28
• 第三部分 體外共培養(yǎng)人牙髓干細(xì)胞對人牙囊干細(xì)胞成骨分化的影響28-34
• 1 材料和方法29-32
• 2 結(jié)果32-33
• 3 討論33-34
• 全文總結(jié)34-35
• 參考文獻(xiàn)35-40
• 文獻(xiàn)綜述40-49
• 參考文獻(xiàn)45-49
• 致謝49-50
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文50

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本文編號：704616