本文關(guān)鍵詞：SGI-1776鈍化Pim-1對(duì)涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞的抑制作用

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【摘要】：目的檢測(cè)SGI-1776對(duì)涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞SACC-83、SACC-LM的增殖、遷移、侵襲、凋亡的影響。方法體外培養(yǎng)涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞SACC-83、SACC-LM;CCK-8法、克隆形成法及BrDU染色法檢測(cè)SGI-1776對(duì)SACC-LM細(xì)胞的增殖抑制作用;鬼筆環(huán)肽染色法測(cè)SGI-1776對(duì)細(xì)胞骨架的影響;PI/Annexin-V雙染法、Caspase-3酶活化試驗(yàn)及JC-1染色法檢測(cè)SGI-1776對(duì)SACC細(xì)胞凋亡的影響;劃痕試驗(yàn)及Transwell法檢測(cè)SGI-1776對(duì)SACC細(xì)胞遷移、侵襲的抑制作用;Western blot試驗(yàn)檢測(cè)SGI-1776對(duì)SACC細(xì)胞增殖、遷移、侵襲抑制作用的可能分子機(jī)制。結(jié)果SGI-1776在體外對(duì)SACC細(xì)胞增殖、遷移、侵襲呈現(xiàn)出濃度、時(shí)間依賴性的抑制作用;鬼筆環(huán)肽染色法提示SGI-1776作用于SACC細(xì)胞后,細(xì)胞骨架未發(fā)生明顯變化;PI/Annexin-V雙染色法及JC-1染色法顯示SGI-1776作用于SACC細(xì)胞后,凋亡率明顯升高;Caspase-3酶活化試驗(yàn)提示Caspase-3參與執(zhí)行細(xì)胞凋亡;Western blot試驗(yàn)提示Bcl-2可能參與Pim-1鈍化后誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。結(jié)論SGI-1776通過抑制Pim-1而發(fā)揮其抑制涎腺腺樣囊性癌SACC-83、SAC-LM細(xì)胞增殖、遷移和侵襲,并促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用,提示Pim-1可能是腺樣囊性癌新的治療靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：腺樣囊性癌 涎腺 Pim-1 SGI-1776
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R739.87
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-7
• 引言7-9
• 一 實(shí)驗(yàn)材料9-13
• 1. 實(shí)驗(yàn)菌株9
• 2. 實(shí)驗(yàn)試劑9-11
• 3. 實(shí)驗(yàn)儀器11-13
• 二 實(shí)驗(yàn)方法13-22
• 1. 藥物配制13
• 2. 細(xì)胞培養(yǎng)13
• 3. CCK-8 試驗(yàn)13-14
• 4. 蛋白提取及定量14
• 5. 蛋白質(zhì)免疫印跡試驗(yàn)(Western Blot)14-16
• 6. 細(xì)胞骨架制備與觀察16-17
• 7．BrdU摻入法測(cè)細(xì)胞周期17
• 8．克隆形成試驗(yàn)17-18
• 9．PI/Annexin-V雙染色法測(cè)細(xì)胞凋亡率18-19
• 10．Caspase-3 酶活化檢測(cè)19
• 11．Jc-1 法測(cè)線粒體膜電位19-20
• 12．劃痕試驗(yàn)20
• 13. Transwell侵襲試驗(yàn)20-22
• 三 實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-30
• 1．SGI-1776對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的影響22-23
• 2．蛋白質(zhì)免疫印跡試驗(yàn)(Western Blot)（Pim-1）23
• 3．細(xì)胞骨架的制備與觀察23-24
• 4．BrdU摻入法測(cè)細(xì)胞周期24
• 5. 克隆形成試驗(yàn)24-25
• 6. PI/Annexin-V雙染色法測(cè)細(xì)胞凋亡率25-26
• 7．Caspase-3 酶活化檢測(cè)26-27
• 8．JC-1 染色法測(cè)線粒體膜電位27-28
• 9．劃痕試驗(yàn)及Transwell侵襲試驗(yàn)28-29
• 10. 蛋白質(zhì)免疫印跡試驗(yàn)(Western Blot)（凋亡相關(guān)蛋白）29-30
• 四 討論30-32
• 五 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-35
• 綜述35-42
• 參考文獻(xiàn)40-42
• 附錄42-44
• 致謝44-45

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本文編號(hào)：599863