本文關(guān)鍵詞：地西他濱對(duì)人鱗狀上皮舌癌SCC-9細(xì)胞P16基因甲基化狀態(tài)及mRNA和蛋白表達(dá)的研究

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【摘要】：目的：本研究主要探討DNA甲基化抑制劑地西他濱(5-aza-2 deoxycytidine DAC)對(duì)體外培養(yǎng)的人鱗狀上皮舌癌SCC-9細(xì)胞P16基因甲基化狀態(tài)及mRNA和蛋白表達(dá)水平的影響,探討其抗腫瘤作用及其可能機(jī)理。方法：實(shí)驗(yàn)將體外培養(yǎng)的處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的人鱗狀上皮舌癌SCC-9細(xì)胞分為0、1、2、3四組。1、2、3三組樣本采用三個(gè)梯度濃度的DAC(1×10-7mol/L、1×100-6mol/L、1×10-5mol/L) DMEM培養(yǎng)液進(jìn)行處理,取不含DAC的等量培養(yǎng)液處理的0組作為對(duì)照組。細(xì)胞培養(yǎng)至48小時(shí)后,使用熒光甲基化特異聚合酶鏈反應(yīng)Q-MSP技術(shù)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組SCC-9細(xì)胞中P16基因甲基化狀態(tài)；實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)SCC-9細(xì)胞P16基因mRNA的表達(dá)水平；應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)SCC-9細(xì)胞P16的蛋白表達(dá)。結(jié)果：用不同濃度的DAC作用于SCC-9細(xì)胞處理48h后,Q-MSP檢測(cè)結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中SCC-9細(xì)胞P16基因甲基化與非甲基化呈雜合狀態(tài)。用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)四組P16基因的表達(dá)情況,結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組中SCC-9細(xì)胞P16基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量均高于對(duì)照組(2-△△cr1),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。免疫組化結(jié)果顯示經(jīng)DAC處理過(guò)后,P16蛋白較對(duì)照組呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài),空白對(duì)照組未見(jiàn)有蛋白表達(dá)。結(jié)論：1、DAC可能具有逆轉(zhuǎn)人鱗狀上皮舌癌SCC-9細(xì)胞P16基因甲基化作用；2、DAC可能通過(guò)其去甲基化作用促使因高甲基化而失活的P16基因mRNR和蛋白恢復(fù)表達(dá)；3、DAC可作為一種基因藥物治療舌鱗狀細(xì)胞癌；
【關(guān)鍵詞】：DAC 舌鱗狀細(xì)胞癌 P16 甲基化 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R739.86
【目錄】：

• 個(gè)人簡(jiǎn)歷3-5
• 英文縮略語(yǔ)表5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-12
• 材料與方法12-20
• 結(jié)果20-25
• 討論25-28
• 結(jié)論28-29
• 參考文獻(xiàn)29-33
• 綜述33-43
• 參考文獻(xiàn)39-43
• 致謝43

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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本文編號(hào)：582050