本文關(guān)鍵詞：牙齦蛋白酶對M1型巨噬細(xì)胞表達(dá)抑菌細(xì)胞因子的調(diào)控作用

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【摘要】：目的:探討牙齦蛋白酶對M1型巨噬細(xì)胞表達(dá)抑菌細(xì)胞因子的調(diào)控作用。方法:采用sheets改良法從Pg ATCC 33277培養(yǎng)物上清中制備牙齦蛋白酶,應(yīng)用質(zhì)譜法鑒定牙齦蛋白酶,底物發(fā)色法測定酶活性,鱟試劑檢測牙齦蛋白酶中LPS殘留量。體外細(xì)胞模型實(shí)驗(yàn)評價(jià)牙齦蛋白酶對大腸桿菌脂多糖(Ec-LPS)誘導(dǎo)的M1型巨噬細(xì)胞表達(dá)抑菌細(xì)胞因子的影響。實(shí)驗(yàn)分為3組:陰性對照組、Ec-LPS組和Ec-LPS+牙齦蛋白酶組,采用qRTPCR和ELISA法檢測M1型巨噬細(xì)胞表達(dá)的抑菌細(xì)胞因子白細(xì)胞介素12(IL-12)、一氧化氮合酶(iNOS)和白細(xì)胞介素10(IL-10)在基因和蛋白水平的表達(dá)情況。結(jié)果:制備的牙齦蛋白酶為RgpA,活性20U/L,LPS殘留量0.01EU/mL。qRT-PCR和ELISA結(jié)果顯示,與陰性對照組相比,Ec-LPS組IL-12和iNOS基因和蛋白的表達(dá)水平明顯升高,IL-10的表達(dá)降低,即成功誘導(dǎo)M1型巨噬細(xì)胞,組間有顯著差異(P0.01);Ec-LPS+牙齦蛋白酶組IL-12、iNOS和IL-10基因和蛋白的表達(dá)較Ec-LPS組顯著降低,但高于陰性對照組,組間有顯著差異(P0.01)。結(jié)論:牙齦蛋白酶具有抑制M1型巨噬細(xì)胞表達(dá)抑菌細(xì)胞因子IL-12、iNOS的作用。
【作者單位】： 吉林大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院牙周病科;吉林大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院種植科;吉林省牙發(fā)育及頜骨重塑與再生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 吉林大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 牙齦卟啉單胞菌 牙齦蛋白酶 M型巨噬細(xì)胞 細(xì)胞因子
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(編號:81570983) 吉林省科技廳自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號:20150101076JC) 吉林大學(xué)研究生創(chuàng)新基金資助項(xiàng)目(編號:2016107)
【分類號】：R780.2
【正文快照】： 牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivlis,Pg)被認(rèn)為是牙周炎的關(guān)鍵致病菌[1],該菌能產(chǎn)生牙齦蛋白酶(gingipain)、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和菌毛(fimbria)等多種毒力因子,其中牙齦蛋白酶的致病作用近年來備受關(guān)注。牙齦蛋白酶是一種半胱氨酸蛋白酶,具有蛋白水解活性,

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1 陳萍萍,張朝武,謝東,韓良峰,吳逸明,陳玲玲;人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶M1真核表達(dá)系統(tǒng)序列分析[J];中國公共衛(wèi)生;2004年09期

2 王國彬;陳海珍;楊杏芬;陳瑞梅;yと炅，

本文編號：559275