本文關(guān)鍵詞：成纖維細(xì)胞激活蛋白及其突變體真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定

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【摘要】：目的構(gòu)建并鑒定人成纖維細(xì)胞激活蛋白(FAPα)真核表達(dá)質(zhì)粒pc DNA-w FAPα(野生型FAPα)、pc DNA-t FAPα(胞外段FAPα)和pc DNA-m FAPα(缺失624~704位氨基酸的突變型FAPα)。方法以口腔癌組織總RNA為模板,采用RT-PCR方法擴(kuò)增w FAPαc DNA基因片段,連接至真核表達(dá)質(zhì)粒pc DNA3.1(+)獲得重組pc DNA-w FAPα質(zhì)粒。以重組pc DNA-w FAPα為模板,擴(kuò)增t FAPα基因片段;用overlap PCR技術(shù),獲得m FAPα基因;分別連接至pc DNA3.1(+)獲得重組pc DNA-t FAPα和pc DNA-m FAPα質(zhì)粒。結(jié)果酶切鑒定和測(cè)序驗(yàn)證皆顯示pc DNA-w FAPα、pc DNA-t FAPα和pc DNA-m FAPα為正確重組質(zhì)粒。結(jié)論成功構(gòu)建人野生型FAPα(w FAPα)、胞外段FAPα(t FAPα)和突變型FAPα(m FAPα)真核表達(dá)質(zhì)粒,為進(jìn)一步研究FAPα在口腔鱗癌發(fā)病過(guò)程中的分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院口腔科南方醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 成纖維細(xì)胞激活蛋白 真核表達(dá)載體 pc DNA.(+)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81472536) 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):2012B031800139,2014A020212440)
【分類(lèi)號(hào)】：R739.85
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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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4 劉開(kāi)智;新型激活蛋白對(duì)棉花主要農(nóng)藝及經(jīng)濟(jì)性狀影響的初步研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

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6 董健伸;交鏈孢菌激活蛋白抗體制備及免疫檢測(cè)[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2006年

7 繆成貴;新癌基因NGAL的新型TPA反應(yīng)激活蛋白的分離與初步鑒定[D];吉林大學(xué);2007年

8 鄭文濤;轉(zhuǎn)錄因子激活蛋白-2（AP-2）在Buerger's病中的表達(dá)與意義[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

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10 曹振華;5脂氧合酶激活蛋白基因單核苷酸多態(tài)性與冠心病的關(guān)聯(lián)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2008年

本文編號(hào)：533523