發(fā)布時間：2017-06-29 05:14

  本文關(guān)鍵詞：重離子束與X射線輻照對人舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞株CXCR4與RhoC表達的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：1.探討不同輻射方式對Tca8113細胞株細胞中CXCR4及RhoC mRNA的表達量的影響。2.探討不同輻射方式對Tca8113細胞株細胞中CXCR4及RhoC的蛋白表達量的影響。3.以CXCR4與RhoC的基因與蛋白的表達量變化為指標,探討重離子束與X射線對人舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞株侵襲能力的影響,從而為臨床采用重離子束作為舌癌放射治療的新方法提供新的理論依據(jù)。方法：人舌鱗癌Tca8113細胞株由武漢大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院惠贈,于中國科學(xué)院近代物理研究所凍存保藏。細胞經(jīng)傳代培養(yǎng)后,采用不同劑量的重離子束與X-ray對細胞進行輻射,輻射后分別提取不同組別的細胞的總RNA。采用熒光實時定量PCR法觀察細胞中CXCR4與RhoC mRNA表達量的變化。同時提取細胞總蛋白,采用Western-blot方法對CXCR4與RhoC的蛋白表達量進行檢測。X線照射系統(tǒng)采用美國Faxition43885D型X線儀,照射能量為50kVp,劑量率為0.5Gy/min。重離子束輻射于中國科學(xué)院蘭州分院近代物理研究所HIRFL重離子終端進行,照射能量為250MeV；LET為75KeV,劑量率約為1Gy/min、空白對照組輻射劑量為0,X線組與重離子組則分別設(shè)1Gy,2Gy,4Gy的輻射劑量組別,并于各劑量組下依據(jù)RNA和蛋白的實驗設(shè)計設(shè)4小時、8小時、12小時、24小時等時間點。結(jié)果：1.與空白對照組比較,在相同輻射劑量下,X線輻照組細胞中CXCR4的表達量在8h時較低,于12h達到高峰,該峰值在1Gy、4Gy組較為顯著(p0.05),在2Gy組則差異不明顯(p0.05)；而重離子輻照組細胞中CXCR4的mRNA表達水平在輻照后12小時內(nèi)均明顯降低(p0.05)。在相同時間點時,重離子組CXCR4的表達量與X線組比較則有顯著降低(p0.01)。2.不同輻射方式對RhoC的mRNA的相對表達量均有所抑制(p0.05),且在1Gy、2Gy與4Gy不同輻射劑量下,其受到抑制的表達趨勢基本一致。在X射線組,目的基因的表達隨劑量上升,受到抑制的作用則減弱；而重離子組目的基因的表達則隨劑量的上升,受到的抑制作用不變或增強。且重離子組細胞輻射后各個時間點的RhoC mRNA的表達較空白對照組的表達量均有顯著下降(p0.05)。3. Western blt實驗結(jié)果顯示：在輻射后第12小時,RhoC表達隨劑量上升而有所上升,CXCR4的表達變化不大；在輻射后第24小時,RhoC的表達隨劑量上升而下降,CXCR4也呈現(xiàn)出同樣趨勢但不明顯。與real-time PCR結(jié)果基本吻合。結(jié)論：與常規(guī)X線相比,重離子束對體外培養(yǎng)的人舌鱗癌細胞中CXCR4的表達的抑制能力更強,而盡管RhoC的表達在X射線與重離子組都受到抑制,重離子束對RhoC的表達的抑制作用要優(yōu)于X射線,提示重離子抑制舌鱗癌細胞侵襲的能力優(yōu)于常規(guī)X射線。這可能為臨床采用重離子束對舌癌進行放射治療提供新思路。
【關(guān)鍵詞】：重離子束 X射線 人舌鱗狀細胞癌 CXCR4 RhoC 腫瘤細胞侵襲
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R739.86
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-10
• 第一章 緒論10-16
• 1.1 舌癌的治療現(xiàn)狀10-11
• 1.2 腫瘤的放射治療進展11-14
• 1.2.1 傳統(tǒng)放射醫(yī)學(xué)與腫瘤的治療11
• 1.2.2 重離子束與臨床治療研究11-14
• 1.2.2.1 重離子束的劑量分布11-12
• 1.2.2.2 重離子束與DNA雙鏈損傷12
• 1.2.2.3 重離子束輻射的氧效應(yīng)12
• 1.2.2.4 國內(nèi)外重離子的臨床研究現(xiàn)狀12-14
• 1.3 RhoC與腫瘤的進展14-15
• 1.3.1 Rho亞家族的組成14
• 1.3.2 RhoC與腫瘤的侵襲14-15
• 1.4 CXCR4與腫瘤的進展15
• 1.5 本實驗研究目的與內(nèi)容15-16
• 第二章 材料與方法16-31
• 1 材料16-19
• 1.1 實驗用細胞株來源16
• 1.2 實驗主要試劑及儀器16-19
• 1.2.1 實驗用主要儀器與設(shè)備16-17
• 1.2.2 實驗用主要試劑17-19
• 2 實驗方法19-31
• 2.1 人舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞株的培養(yǎng)及傳代19
• 2.2 細胞的凍存與復(fù)蘇19-20
• 2.2.1 細胞的凍存19-20
• 2.2.2 細胞的復(fù)蘇20
• 2.3 細胞的輻射20-21
• 2.4 Real-time PCR方法檢測CXCR4與RhoC mRNA的表達21-23
• 2.4.1 細胞的裂解21
• 2.4.2 細胞總RNA的提取21
• 2.4.3 RNA濃度的測定21-22
• 2.4.4 RNA逆轉(zhuǎn)錄22-23
• 2.4.5 Real-time PCR23
• 2.5 統(tǒng)計與分析23-24
• 2.6 Western blot方法檢測RhoC與CXCR4的蛋白表達24-31
• 2.6.1 配制WB蛋白印記實驗所用試劑24-26
• 2.6.2 提取細胞總蛋白26
• 2.6.3 蛋白濃度的測定26-27
• 2.6.4 制備蛋白電泳膠27-28
• 2.6.5 SDS-PAGE凝膠電泳28-29
• 2.6.6 轉(zhuǎn)膜29
• 2.6.7 目的蛋白與抗體的結(jié)合29-30
• 2.6.8 蛋白顯影30-31
• 第三章 實驗結(jié)果31-40
• 3.1 人舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞株常規(guī)形態(tài)31-32
• 3.2 不同傳能線密度(LET)射線對人舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞中CXCR4 mRNA表達的影響32-35
• 3.2.1 1Gy輻射劑量下CXCR4的表達變化32-33
• 3.2.2 2Gy輻射劑量下CXCR4的表達變化33-34
• 3.2.3 4Gy輻射劑量下CXCR4的表達變化34-35
• 3.3 不同傳能線密度(LET)射線對人舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞中RhoC mRNA表達的影響35-38
• 3.3.1 1Gy輻射劑量下RhoC的表達變化35-36
• 3.3.2 2Gy輻射劑量下RhoC的表達變化36-37
• 3.3.3 4Gy輻射劑量下RhoC的表達變化37-38
• 3.4 不同傳能線密度(LET)射線對人舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞中CXCR4及RhoC蛋白表達的影響38-40
• 3.4.1 重離子輻照后CXCR4與RhoC蛋白的表達38
• 3.4.2 X射線輻照后CXCR4與RhoC蛋白的表達38-40
• 第四章 討論40-43
• 4.1 惡性腫瘤的臨床治療現(xiàn)狀40
• 4.2 CXCR4與人舌鱗癌Tca8113細胞的體外侵襲能力40-41
• 4.3 RhoC與人舌鱗癌Tca8113細胞的體外侵襲能力41-42
• 4.4 實驗中存在的問題42
• 4.5 小結(jié)42-43
• 第五章 結(jié)論43-44
• 第六章 展望44-45
• 參考文獻45-49
• 中英文對照49-50
• 研究生期間交流工作50-51
• 在學(xué)期間主要研究成果51-52
• 病例報告52-61
• 1) 病歷摘要52-53
• 2) 術(shù)前準備及注意事項53
• 3) 手術(shù)過程：兩瓣術(shù)+提肌重建術(shù)53-54
• 4) 術(shù)后管理54
• 5) 出院診斷54-56
• 6) 病例討論與文獻回顧56-59
• 1. 腭裂的發(fā)病情況56
• 2. 非綜合征型腭裂與綜合征型腭裂56-57
• 3. 腭裂的治療與治療時機的把握57-58
• 4. 腭帆提肌重建與腭咽閉合58
• 5. 腭裂術(shù)后的其他治療58-59
• 參考文獻59-61
• 致謝61-62

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 徐琴;趙正言;;Wolf-Hirschhorn綜合征1例[J];中國實用兒科雜志;2012年09期

  本文關(guān)鍵詞：重離子束與X射線輻照對人舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞株CXCR4與RhoC表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：496690