本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)錄因子Isl1基因在小鼠下頜發(fā)育過程中的功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：頜面部發(fā)育畸形的發(fā)病率位于新生兒先天性發(fā)育畸形的首位。作為多基因易感性疾病,頜面部發(fā)育畸形病因復(fù)雜。由第一鰓弓(下頜弓)發(fā)育而來的下頜包括下頜骨、下顎以及牙齒等器官,下頜突的發(fā)育是上皮和間充質(zhì)相互作用的結(jié)果,多種信號(hào)分子和轉(zhuǎn)錄因子參與了下頜骨的發(fā)育。Islet 1是屬于LIM-Homeodomain(LIM-HD)家族的一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子,在胰島的成熟、運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元特化及心臟發(fā)育過程中都起著重要作用。本實(shí)驗(yàn)研究目前尚無報(bào)道的Isl1基因?qū)ο骂M發(fā)育的功能。我們研究用Shh-Cre小鼠與Isl1loxp/loxp小鼠交配,得到Isl1在下頜上皮細(xì)胞條件性敲除小鼠。結(jié)果首次發(fā)現(xiàn),Isl1突變型小鼠表現(xiàn)出下頜發(fā)育異常,下頜骨顯著變短且在中線處融合、下門牙與舌發(fā)育缺陷。通過研究發(fā)現(xiàn),下頜發(fā)育過程中Isl1基因調(diào)控WTN通路和SHH通路的活性,進(jìn)而影響下頜發(fā)育的多個(gè)重要基因,改變下頜細(xì)胞的增殖與凋亡,最終調(diào)節(jié)下頜的生長發(fā)育。
【關(guān)鍵詞】：下頜 Isl1 shh 通路 wnt 通路
【學(xué)位授予單位】：杭州師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R782.6
【目錄】：

• 致謝4-5
• 摘要5-6
• ABSTRACT6-10
• 1 引言10-15
• 1.1 下頜發(fā)育介紹10-11
• 1.1.1 下頜骨的發(fā)育10-11
• 1.1.2 下頜發(fā)育的相關(guān)基因11
• 1.2 轉(zhuǎn)錄因子ISL1的介紹11-12
• 1.3 SHH通路和它與下頜發(fā)育的關(guān)系12-14
• 1.4 經(jīng)典WNT通路與它和下頜發(fā)育的關(guān)系14-15
• 2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與設(shè)計(jì)15-17
• 2.1 實(shí)驗(yàn)的目的與意義15
• 2.2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容15-16
• 2.3 試驗(yàn)流程圖16-17
• 3 實(shí)驗(yàn)試劑與方法17-32
• 3.1 ISL1老鼠的背景和基因型鑒定17-18
• 3.2 試劑與配方18-20
• 3.2.1 原位雜交試劑配方（除特殊說明外，其他試劑均要 121℃，20min滅菌）18-19
• 3.2.2 免疫組化試劑配方19
• 3.2.3 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)試劑19-20
• 3.2.4 原位雜交的探針制備相關(guān)試劑20
• 3.2.5 免疫組化實(shí)驗(yàn)相關(guān)試劑20
• 3.2.6 骨骼染色相關(guān)試劑20
• 3.2.7 X-gal染色相關(guān)試劑20
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法20-32
• 3.3.1 小鼠材料的準(zhǔn)備20
• 3.3.2 總RNA提取與cDNA的獲得20-21
• 3.3.3 基因克隆與載體構(gòu)建21
• 3.3.4 原位雜交探針的制備21-23
• 3.3.5 石蠟切片的蘇木精，，伊紅染色法(簡稱H·E染色)23
• 3.3.6 原位雜交試驗(yàn)方法23-27
• 3.3.7 免疫組織化學(xué)試驗(yàn)方法27-28
• 3.3.8 Brdu與Tunel染色28-29
• 3.3.9 掃描電鏡樣品處理29-30
• 3.3.10 骨骼染色30
• 3.3.11 X-gal染色30
• 3.3.12 Real-time PCR30
• 3.3.13 Microarray分析30-31
• 3.3.14 下頜體外質(zhì)粒轉(zhuǎn)染和體外培養(yǎng)（beads）31-32
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果32-42
• 4.1 CRE~(SHH)和ISL1在小鼠胚胎的表達(dá)32-33
• 4.2 CRE~(SHH)/ISL1（FLOX/FLOX）小鼠的表型33-36
• 4.3 CRE~(SHH)/ISL1（FLOX/FLOX）小鼠下頜細(xì)胞的命運(yùn)36-38
• 4.4 CRE~(SHH)/ISL1（FLOX/FLOX）小鼠下頜相關(guān)基因的表達(dá)38-40
• 4.5 CRE~(SHH)/ISL1（FLOX/FLOX）小鼠下頜中ISL1和WNT通路、SHH通路的聯(lián)系40
• 4.6 CRE~(SHH)/ISL1（FLOX/FLOX）小鼠下頜中SHH通路與細(xì)胞增殖的聯(lián)系40-42
• 5 實(shí)驗(yàn)總結(jié)與討論：42-45
• 5.1 實(shí)驗(yàn)總結(jié)42
• 5.2 討論42-45
• 5.2.1 論文研究的方法可行性42-43
• 5.2.2 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的討論43
• 5.2.3 實(shí)驗(yàn)其他討論43-45
• 參考文獻(xiàn)45-49
• 作者簡介49

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  本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)錄因子Isl1基因在小鼠下頜發(fā)育過程中的功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：467201