本文關鍵詞：轉(zhuǎn)錄因子Isl1基因在小鼠下頜發(fā)育過程中的功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：頜面部發(fā)育畸形的發(fā)病率位于新生兒先天性發(fā)育畸形的首位。作為多基因易感性疾病,頜面部發(fā)育畸形病因復雜。由第一鰓弓(下頜弓)發(fā)育而來的下頜包括下頜骨、下顎以及牙齒等器官,下頜突的發(fā)育是上皮和間充質(zhì)相互作用的結果,多種信號分子和轉(zhuǎn)錄因子參與了下頜骨的發(fā)育。Islet 1是屬于LIM-Homeodomain(LIM-HD)家族的一個轉(zhuǎn)錄因子,在胰島的成熟、運動神經(jīng)元特化及心臟發(fā)育過程中都起著重要作用。本實驗研究目前尚無報道的Isl1基因?qū)ο骂M發(fā)育的功能。我們研究用Shh-Cre小鼠與Isl1loxp/loxp小鼠交配,得到Isl1在下頜上皮細胞條件性敲除小鼠。結果首次發(fā)現(xiàn),Isl1突變型小鼠表現(xiàn)出下頜發(fā)育異常,下頜骨顯著變短且在中線處融合、下門牙與舌發(fā)育缺陷。通過研究發(fā)現(xiàn),下頜發(fā)育過程中Isl1基因調(diào)控WTN通路和SHH通路的活性,進而影響下頜發(fā)育的多個重要基因,改變下頜細胞的增殖與凋亡,最終調(diào)節(jié)下頜的生長發(fā)育。
【關鍵詞】：下頜 Isl1 shh 通路 wnt 通路
【學位授予單位】：杭州師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R782.6
【目錄】：

• 致謝4-5
• 摘要5-6
• ABSTRACT6-10
• 1 引言10-15
• 1.1 下頜發(fā)育介紹10-11
• 1.1.1 下頜骨的發(fā)育10-11
• 1.1.2 下頜發(fā)育的相關基因11
• 1.2 轉(zhuǎn)錄因子ISL1的介紹11-12
• 1.3 SHH通路和它與下頜發(fā)育的關系12-14
• 1.4 經(jīng)典WNT通路與它和下頜發(fā)育的關系14-15
• 2 實驗內(nèi)容與設計15-17
• 2.1 實驗的目的與意義15
• 2.2 實驗內(nèi)容15-16
• 2.3 試驗流程圖16-17
• 3 實驗試劑與方法17-32
• 3.1 ISL1老鼠的背景和基因型鑒定17-18
• 3.2 試劑與配方18-20
• 3.2.1 原位雜交試劑配方（除特殊說明外，其他試劑均要 121℃，20min滅菌）18-19
• 3.2.2 免疫組化試劑配方19
• 3.2.3 分子生物學實驗試劑19-20
• 3.2.4 原位雜交的探針制備相關試劑20
• 3.2.5 免疫組化實驗相關試劑20
• 3.2.6 骨骼染色相關試劑20
• 3.2.7 X-gal染色相關試劑20
• 3.3 實驗方法20-32
• 3.3.1 小鼠材料的準備20
• 3.3.2 總RNA提取與cDNA的獲得20-21
• 3.3.3 基因克隆與載體構建21
• 3.3.4 原位雜交探針的制備21-23
• 3.3.5 石蠟切片的蘇木精，，伊紅染色法(簡稱H·E染色)23
• 3.3.6 原位雜交試驗方法23-27
• 3.3.7 免疫組織化學試驗方法27-28
• 3.3.8 Brdu與Tunel染色28-29
• 3.3.9 掃描電鏡樣品處理29-30
• 3.3.10 骨骼染色30
• 3.3.11 X-gal染色30
• 3.3.12 Real-time PCR30
• 3.3.13 Microarray分析30-31
• 3.3.14 下頜體外質(zhì)粒轉(zhuǎn)染和體外培養(yǎng)（beads）31-32
• 4 實驗結果32-42
• 4.1 CRE~(SHH)和ISL1在小鼠胚胎的表達32-33
• 4.2 CRE~(SHH)/ISL1（FLOX/FLOX）小鼠的表型33-36
• 4.3 CRE~(SHH)/ISL1（FLOX/FLOX）小鼠下頜細胞的命運36-38
• 4.4 CRE~(SHH)/ISL1（FLOX/FLOX）小鼠下頜相關基因的表達38-40
• 4.5 CRE~(SHH)/ISL1（FLOX/FLOX）小鼠下頜中ISL1和WNT通路、SHH通路的聯(lián)系40
• 4.6 CRE~(SHH)/ISL1（FLOX/FLOX）小鼠下頜中SHH通路與細胞增殖的聯(lián)系40-42
• 5 實驗總結與討論：42-45
• 5.1 實驗總結42
• 5.2 討論42-45
• 5.2.1 論文研究的方法可行性42-43
• 5.2.2 實驗數(shù)據(jù)的討論43
• 5.2.3 實驗其他討論43-45
• 參考文獻45-49
• 作者簡介49

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 溫進坤;;磷酸化作用對轉(zhuǎn)錄因子活性的調(diào)節(jié)[J];生命的化學(中國生物化學會通訊);1993年05期

2 劉楠;陳依軍;;轉(zhuǎn)錄因子——新型抗腫瘤藥物作用靶點[J];中國藥科大學學報;2010年02期

3 張春霞;任少敏;李維才;;兒童急性特發(fā)性血小板減少性紫癜轉(zhuǎn)錄因子的表達[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學雜志;2013年10期

4 林玫;劉輝國;;氧化還原敏感轉(zhuǎn)錄因子與阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征[J];國際呼吸雜志;2006年09期

5 金紅;邱文冰;彭庚;王東明;李玉光;;睪酮對人臍靜脈內(nèi)皮細胞部分轉(zhuǎn)錄因子活性的影響[J];中國應用生理學雜志;2008年03期

6 張維山,冷啟新;轉(zhuǎn)錄因子假結合體的基因治療作用[J];解剖科學進展;2003年01期

7 陳子興;轉(zhuǎn)錄因子和造血分化調(diào)控及其意義[J];國外醫(yī)學(生理、病理科學與臨床分冊);2003年03期

8 李德,何國祥;血管平滑肌細胞增殖相關轉(zhuǎn)錄因子的研究進展[J];中國介入心臟病學雜志;2004年03期

9 江洪;基因表達與轉(zhuǎn)錄因子[J];生物學通報;1998年04期

10 李揚秋;轉(zhuǎn)錄因子GATA的發(fā)現(xiàn)及其在造血系統(tǒng)的研究進展[J];國外醫(yī)學.輸血及血液學分冊;1996年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳秀麗;李揚秋;王震;楊力建;陳少華;張洹;朱康兒;韓忠朝;;轉(zhuǎn)錄因子GATA-1基因在白血病骨髓基質(zhì)細胞中的表達[A];第九屆全國實驗血液學會議論文摘要匯編[C];2003年

2 易可可;吳忠長;周潔;張麝龍;吳運榮;劉非燕;吳平;;植物磷饑餓調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子研究[A];中國植物生理學會全國學術年會暨成立40周年慶祝大會學術論文摘要匯編[C];2003年

3 宗英;袁伯俊;陸國才;;活化轉(zhuǎn)錄因子4在輻射誘導的損傷中的作用及機制[A];中國藥理學與毒理學雜志(2013年6月第27卷第3期)[C];2013年

4 易可可;吳忠長;周潔;吳運榮;吳平;;植物耐低磷轉(zhuǎn)錄因子研究[A];中國植物生理學會全國學術年會暨成立40周年慶祝大會學術論文摘要匯編[C];2003年

5 胡明輝;胡令彥;周永明;陳海琳;;Th17/Treg相關轉(zhuǎn)錄因子在非重型再生障礙性貧血中的意義及與中醫(yī)腎虛分型相關性[A];中華中醫(yī)藥學會第二屆岐黃論壇——血液病中醫(yī)藥防治分論壇論文集[C];2014年

6 何男男;王文潔;薛曉鋒;魏琦超;周巖;;HD-Zip轉(zhuǎn)錄因子研究進展[A];河南省細胞生物學學會第二屆會員代表大會暨學術研討會論文摘要集[C];2009年

7 王黎芳;;轉(zhuǎn)錄因子FBI-1的研究進展[A];華東六省一市生物化學與分子生物學學會2006年學術交流會論文集[C];2006年

8 魏海明;田志剛;;轉(zhuǎn)錄因子對Th1/Th2分化的調(diào)控作用[A];第七屆全國腫瘤生物治療學術會議論文集[C];2001年

9 呂彥霞;張海娟;張梅;余小林;;植物NAC轉(zhuǎn)錄因子的研究進展[A];中國園藝學會十字花科蔬菜分會第十屆學術研討會論文集[C];2012年

10 金肆;;基于ELISA技術的轉(zhuǎn)錄因子檢測方法[A];新觀點新學說學術沙龍文集23：新藥發(fā)現(xiàn)——尋找維護人類健康的武器[C];2008年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 郭洋;植物也會“抗洪”[N];大眾科技報;2011年

2 白毅;UXT蛋白可增強轉(zhuǎn)錄因子NF—κB活性[N];中國醫(yī)藥報;2007年

3 胡德榮;“轉(zhuǎn)錄蛋白”調(diào)控異�？杉せ钅[瘤細胞[N];健康報;2007年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄭廣勇;哺乳動物轉(zhuǎn)錄因子及其靶基因的挖掘分析[D];復旦大學;2009年

2 剛毅;功能封閉性雙鏈RNA在胃癌耐藥相關轉(zhuǎn)錄因子驗證中的應用[D];第四軍醫(yī)大學;2012年

3 李婧;小鼠bHLH轉(zhuǎn)錄因子家族預測及其大腦調(diào)控網(wǎng)絡的構建[D];上海交通大學;2007年

4 田云;轉(zhuǎn)錄因子JERFs功能的初步研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學;2008年

5 張洪博;ERF轉(zhuǎn)錄因子TSRF1的功能分析[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2005年

6 王雪根;以轉(zhuǎn)錄因子為靶的抗腫瘤藥物DECOY寡聚核苷酸研究[D];南京工業(yè)大學;2003年

7 周潔;水稻低磷脅迫相關轉(zhuǎn)錄因子OsPHR1和OsPHR2的功能研究[D];浙江大學;2007年

8 王穎;調(diào)控橡膠樹HbSRPP的轉(zhuǎn)錄因子HbWRKY1的分離與功能分析[D];海南大學;2012年

9 何莉;轉(zhuǎn)錄因子CTCF的功能研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2004年

10 張麗娜;小麥抗逆相關轉(zhuǎn)錄因子bZIP和NAC基因的功能研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2014年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 郭文婕;雞轉(zhuǎn)錄因子GATA2影響單糖轉(zhuǎn)運蛋白基因GLUT2、GLUT5和SGLT1表達的研究[D];山西農(nóng)業(yè)大學;2015年

2 王昕嘉;轉(zhuǎn)錄因子GmbHLH30在丹波黑大豆響應鋁脅迫過程中調(diào)控靶基因的作用機理研究[D];昆明理工大學;2015年

3 張永興;水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子TF865調(diào)控株高的功能研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2015年

4 牛芳芳;油菜NAC103與擬南芥WSK1轉(zhuǎn)錄因子分別調(diào)控ROS依賴的細胞死亡與低鉀應答的分子機制解析[D];西北農(nóng)林科技大學;2015年

5 陳為峰;黃瓜轉(zhuǎn)錄因子CsbZIP家族基因部分成員的克隆及表達分析[D];西北農(nóng)林科技大學;2015年

6 周陽云;茉莉酸信號途徑關鍵轉(zhuǎn)錄因子SmMYC2調(diào)控丹參有效成分生物合成的功能解析[D];福建中醫(yī)藥大學;2015年

7 高秀梅;豆科植物中轉(zhuǎn)錄因子NSP1、NSP2和IPN2對結瘤起始基因調(diào)控的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2015年

8 陳泓宇;桑樹MYB轉(zhuǎn)錄因子家族的生物信息學及黃酮合成相關基因的表達分析[D];西南大學;2015年

9 高婷;基于限制性內(nèi)切酶構建的熒光生物傳感器用于轉(zhuǎn)錄因子檢測[D];山東大學;2015年

10 湯旋;玉米紋枯病菌自激活轉(zhuǎn)錄因子的系統(tǒng)篩選[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2015年

  本文關鍵詞：轉(zhuǎn)錄因子Isl1基因在小鼠下頜發(fā)育過程中的功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：467201