發(fā)布時間：2024-06-03 20:29

　　目的:全脫位牙外傷是指牙齒完全從牙槽窩中脫出,牙周膜和牙髓同時損傷,是牙外傷中最為嚴重的一種,約占恒牙外傷的16%。牙周膜在牙脫位時撕裂,隨體外干燥環(huán)境保存時間增長,細胞逐漸脫水壞死。牙再植后,壞死的細胞不能發(fā)揮正常的再生功能。脂肪干細胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)作為新一代的種子細胞,與其他干細胞相比,在體外獲取和培養(yǎng)上存在許多優(yōu)勢。大量研究也證明脂肪干細胞具有多向分化能力,能夠向成脂、成骨等分化。正是由于具有這些優(yōu)勢,脂肪干細胞在很多領(lǐng)域作為種子細胞應(yīng)用于組織工程中。富血小板纖維蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)作為新一代富血小板濃縮物,其取自于自體血、制備簡單,避免了倫理道德的爭議及免疫排斥和血液交叉感染的風(fēng)險;同時PRF中含有大量生長因子,有研究證實對ADSCs的增殖,分化具有促進作用,因此對脫位再植牙牙周修復(fù)再生提供了可能性。因此,本實驗通過對PRF的制備與檢測,將ADSCs作為種子細胞,并制備成細胞膜片形式,同時將PRF作為支架材料和生長因子的來源,構(gòu)建ADSCs/PRF的復(fù)合體移植物,最大程度上促進牙周組織的修...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.A-B:PRF的大體觀Figure1.A-B：GeneralobservationofPRF

F的制備及大體觀察周歲比格犬一只，肌肉注射3%的戊巴比妥1mL/kg和陸醉，一次性抽血針于犬前肢靜脈處一次性抽取靜脈血5玻璃離心管中，臺式離心機中以3000rpm/min的速度間后可以看見離心管中最上層為少量透明淺黃色的血漿的富血小板纖維蛋白（PRF）約1mL，....

圖1.C-E：PRF的組織學(xué)結(jié)構(gòu)

F組織學(xué)觀染色光鏡觀察：PRF的主要成分為膠原纖維，PRF膜片上端為染色白結(jié)構(gòu)；PRF下端則為含有少量紅細胞和部分藍染細胞核的白細中（圖1.C）。F超微結(jié)構(gòu)電鏡觀察：PRF膜片為三維立體的纖維蛋白網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，呈現(xiàn)為條松多孔，在纖維蛋白網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中可見由膠原原纖維和膠原纖....

圖2.A-B：脂肪的分離與獲取

碘伏與酒精消毒后鋪巾，沿皮紋方向切開皮膚及皮下組織約3cm，充分止血后分離獲得脂肪組織約5mL（圖2.A.B），并放入含青霉素和鏈霉素的PBS溶液中。將獲得的脂肪組織轉(zhuǎn)移至超靜臺內(nèi)，用含有雙抗的PBS反復(fù)沖洗，去除肉眼可見的血管及筋膜組織，充分剪碎后加入等體積的Ｉ型膠....

圖2.C-D：脂肪干細胞的培養(yǎng)

倒置相差顯微鏡鏡下觀察脂滴的形成并拍照。果脂肪干細胞的分離與培養(yǎng)eagle犬腹股溝處取出約5ml脂肪組織并消化，體外分離養(yǎng)的脂肪干細胞可見到貼壁的細胞，剛貼壁的細胞生長時呈短梭型（圖2.C），每2d換液細胞迅速生長，3-4d即可鋪滿瓶底80%，此時細胞呈長梭型，進....

本文編號：3988449