目的:研究乳牙高致齲性變異鏈球菌(streptococcus mutans,S.mutans)高溫需要蛋白A(high temperature requirement serine proteinase A,HtrA)基因缺陷株和HtrA高毒力株在體外非應(yīng)激環(huán)境中的果糖基轉(zhuǎn)移酶(fructosyltransferase,FTF)表達(dá)能力的差異。方法:選用課題前期已獲得的HtrA高毒力株及以此構(gòu)建的HtrA基因缺陷株、S.mutans國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)株UA159在腦心浸出液肉湯(brain heart infusion broth,BHI)培養(yǎng)基培養(yǎng)16 h后,用實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增檢測(cè)系統(tǒng)(real-time quantitative PCR detecting system,RT-qPCR),檢測(cè)三菌株FTF基因的擴(kuò)增情況。用相對(duì)定量分析-2-△△Ct法計(jì)算并比較HtrA基因缺陷株與HtrA高毒力株和UA159標(biāo)準(zhǔn)株FTF基因的相對(duì)表達(dá)能力的差異。結(jié)果:HtrA高毒力株的FTF基因的表達(dá)量約是HtrA基因缺陷株23.588倍;UA159標(biāo)準(zhǔn)株的FTF基因的表達(dá)量約是HtrA基因缺陷株10.5...

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圖4三菌株FTF擴(kuò)增曲線

4.4.1總RNA濃度及純度檢測(cè)（表1)4.4.2S.mutans菌株FTF及內(nèi)參16SrRNA基因RT-qPCR擴(kuò)增結(jié)果

圖5三菌株16SrRNA擴(kuò)增曲線

在相同時(shí)間內(nèi)，HtrA高毒力株FTF基因的擴(kuò)增效率高于UA159標(biāo)準(zhǔn)株、高于HtrA基因缺陷株。而三種菌株內(nèi)參基因16SrRNA基因的擴(kuò)增曲線差異不大（圖4、圖5)4.4.2.2三菌株的FTF基因及16SrRNA基因擴(kuò)增曲線的CT值（SPSS24.0計(jì)算）三菌株16Sr....

圖1HtrA高毒力株(×40)

4.3S.mutans菌株革蘭氏染色鑒定鏡下形態(tài)觀察，如下圖1-3。圖2HtrA缺陷株(×40)

圖3UA159標(biāo)準(zhǔn)株(×40)

圖2HtrA缺陷株(×40)4.4S.mutans菌株FTF基因表達(dá)情況的測(cè)定RNA1

本文編號(hào)：3924093