目的:探討靜壓力對(duì)聚乳酸-乙醇酸聚合物(PLGA)上人牙齦成纖維細(xì)胞(HGFs)中Rho A/ROCK通路及F-肌動(dòng)蛋白(F-actin)表達(dá)的影響,以進(jìn)一步了解Rho A/ROCK信號(hào)通路與細(xì)胞骨架在HGFs力學(xué)響應(yīng)機(jī)制中的作用。方法:1、用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行HGFs的原代培養(yǎng)并鑒定細(xì)胞來(lái)源,建立HGFs系。2、將第4-6代的HGFs懸液接種于PLGA支架上,構(gòu)建HGFs-PLGA三維培養(yǎng)模型。3、采用重物加載模型,對(duì)三維培養(yǎng)的HGFs施加25g/cm²的靜壓力,作用時(shí)間分別為0、6、24、48、72小時(shí)。采用RT-qPCR技術(shù)與Western blot技術(shù)檢測(cè)三維培養(yǎng)的HGFs中Rho A和ROCK的mRNA與蛋白表達(dá)變化情況。4、采用羅丹明標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽對(duì)HGFs F-actin進(jìn)行特異性染色,聯(lián)合激光掃描共聚焦顯微鏡觀察靜壓力作用下HGFs中F-actin的變化特征。結(jié)果:1、采用組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)出的原代細(xì)胞,經(jīng)進(jìn)行細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察與免疫來(lái)源鑒定,證實(shí)為HGFs。2、第4-6代HGFs性狀穩(wěn)定,接種于PLGA支架后,經(jīng)激光掃描共聚焦顯微鏡觀察,細(xì)胞能依附于P...

【文章頁(yè)數(shù)】：84 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
個(gè)人簡(jiǎn)歷
英文縮略詞表
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 PLGA支架復(fù)合培養(yǎng)HGFs模型的建立
    1.主要試劑與儀器
    2.實(shí)驗(yàn)方法
    3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.討論
    5.小結(jié)
第二部分 靜壓力對(duì)PLGA支架上HGFsRhoA/ROCK及F-actin表達(dá)的影響
    1.主要試劑與儀器
    2.實(shí)驗(yàn)方法
    3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.討論
    5.小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附圖
綜述
    參考文獻(xiàn)
臨床病例
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表論文



本文編號(hào)：3872524