目的:探討靜壓力對聚乳酸-乙醇酸聚合物(PLGA)上人牙齦成纖維細胞(HGFs)中Rho A/ROCK通路及F-肌動蛋白(F-actin)表達的影響,以進一步了解Rho A/ROCK信號通路與細胞骨架在HGFs力學響應機制中的作用。方法:1、用組織塊培養(yǎng)法進行HGFs的原代培養(yǎng)并鑒定細胞來源,建立HGFs系。2、將第4-6代的HGFs懸液接種于PLGA支架上,構建HGFs-PLGA三維培養(yǎng)模型。3、采用重物加載模型,對三維培養(yǎng)的HGFs施加25g/cm²的靜壓力,作用時間分別為0、6、24、48、72小時。采用RT-qPCR技術與Western blot技術檢測三維培養(yǎng)的HGFs中Rho A和ROCK的mRNA與蛋白表達變化情況。4、采用羅丹明標記的鬼筆環(huán)肽對HGFs F-actin進行特異性染色,聯(lián)合激光掃描共聚焦顯微鏡觀察靜壓力作用下HGFs中F-actin的變化特征。結(jié)果:1、采用組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)出的原代細胞,經(jīng)進行細胞的形態(tài)學觀察與免疫來源鑒定,證實為HGFs。2、第4-6代HGFs性狀穩(wěn)定,接種于PLGA支架后,經(jīng)激光掃描共聚焦顯微鏡觀察,細胞能依附于P...

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學位級別】：碩士

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個人簡歷
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摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 PLGA支架復合培養(yǎng)HGFs模型的建立
    1.主要試劑與儀器
    2.實驗方法
    3.實驗結(jié)果
    4.討論
    5.小結(jié)
第二部分 靜壓力對PLGA支架上HGFsRhoA/ROCK及F-actin表達的影響
    1.主要試劑與儀器
    2.實驗方法
    3.實驗結(jié)果
    4.討論
    5.小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻
附圖
綜述
    參考文獻
臨床病例
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表論文



本文編號：3872524