應(yīng)用基因工程技術(shù)重組表達人β-防御素2(HBD-2),并檢測了牙齦上皮細胞中HBD-2 mRNA的表達。建立了從獲得基因、載體構(gòu)建,到表達優(yōu)化,直至產(chǎn)物分離純化、生物活性測定等整套工藝。本研究的主要創(chuàng)新之處在于構(gòu)建了TrxA、His?Tag、腸激酶和HBD-2融合蛋白表達,使對宿主有危害的表達產(chǎn)物在細胞內(nèi)作用被掩蔽而得以表達,同時使得純化蛋白的程序減少,提高目的蛋白的回收率,在國內(nèi)尚未見到與本研究相同的報道。HBD-2在慢性牙周炎牙齦上皮中的表達,證實HBD-2在牙齦組織中既有固有表達又有誘導(dǎo)性表達,可以其雙重作用來輔助傳統(tǒng)抗生素預(yù)防和治療口腔微生物感染。由于防御素具有高效、廣譜的抗微生物活性和潛在的抗腫瘤活性等,可望作為一類新型的多肽抗生素在臨床上應(yīng)用。

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
英文縮寫詞
前言
綜述一:β-防御素的研究進展
綜述二:牙周病的發(fā)病機制和藥物治療現(xiàn)狀
實驗一 HBD-2mRNA 在牙齦上皮細胞中的表達
    材料與方法
        1. 材料
        2. 方法
    結(jié)果
    討論
實驗二 HBD-2 融合蛋白的基因構(gòu)建和高效表達
    材料與方法
        1. 材料
        2. 方法
    結(jié)果
    討論
實驗三 HBD-2 工程菌表達條件的優(yōu)化和產(chǎn)物結(jié)構(gòu)分析
    材料與方法
        1. 材料
        2. 方法
    結(jié)果
    討論
實驗四 HBD-2 工程菌發(fā)酵及純化工藝的研究
    材料與方法
        1. 材料
        2. 方法
    結(jié)果
    討論
實驗五 HBD-2 重組蛋白體外抑菌和腫瘤細胞毒性實驗
    材料與方法
        1. 材料
        2. 方法
    結(jié)果
    討論
結(jié)論
附圖
參考文獻
攻博期間發(fā)表的論文
致謝
中文摘要
英文摘要



本文編號：3865417