齲病是一種多因素引起的細菌感染性疾病，變形鏈球菌是其主要致病菌。葡聚糖結合蛋白是變形鏈球菌的主要致齲毒力因子之一，在細菌的黏附和聚集，促進菌斑的形成中起著重要作用。免疫防齲是目前齲病預防研究的熱點之一�；蛞呙缡巧鲜兰o90年代發(fā)展起來的一種誘導免疫治療的新方法，與減毒活疫苗、滅活疫苗、重組亞單位疫苗等疫苗相比，它具有長期穩(wěn)定表達抗原蛋白，在宿主體內表達的蛋白與天然構象更為接近，抗原性更強等優(yōu)點。目前，基因疫苗免疫防齲僅限于對變形鏈球菌表面蛋白、葡糖基轉移酶、葡聚糖結合蛋白A的研究，關于利用葡聚糖結合蛋白B構建防齲基因疫苗的研究國內外還未見報道。已有的研究證實，葡聚糖結合蛋白B具有良好的免疫原性，但能否作為免疫防齲的候選基因疫苗，正是本研究所要解決的問題。 本研究從變形鏈球菌S. mutans Ingbritt基因組DNA中克隆出gbpB的全長編碼區(qū)基因片段，進行原核表達，獲取大量純化蛋白，同時制備抗GbpB的特異性抗體；構建GbpB的真核表達質粒作為基因疫苗，通過不同途徑免疫動物，觀察基因疫苗的免疫效果；通過建立定菌鼠實驗模型，觀察了重組純化蛋白和基因疫苗的抑齲效果，充分說明了...

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學位級別】：博士

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縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻回顧
實驗研究
    第一部分 變形鏈球菌葡聚糖結合蛋白B基因的克隆和序列分析
    第二部分 變形鏈球菌葡聚糖結合蛋白B基因在原核和真核細胞中的表達
        實驗一 變形鏈球菌葡聚糖結合蛋白B基因在大腸桿菌中的表達
        實驗二 變形鏈球菌葡聚糖結合蛋白B的大量表達、純化和抗體制備
        實驗三 變形鏈球菌葡聚糖結合蛋白B基因在COS-7細胞中的表達
    第三部分 基因防齲疫苗免疫動物及抑齲實驗研究
        實驗一 基因防齲疫苗不同途徑免疫SD大鼠的實驗研究
        實驗二 防齲疫苗抑齲的動物實驗研究
全文總結
致謝
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