目的電壓門控鈉離子通道(voltage gated sodium channel,VGSC) Nav1.7主要表達(dá)于外周神經(jīng)系統(tǒng)中,對(duì)動(dòng)作電位有顯著調(diào)節(jié)作用,參與炎癥刺激和神經(jīng)損傷所致疼痛過(guò)程。支配牙髓感覺(jué)功能的神經(jīng)纖維是疼痛感受器。正常的牙髓組織對(duì)外界刺激不敏感,然而在病變狀態(tài)下,電源性、熱源性、機(jī)械性以及化學(xué)性的刺激均會(huì)伴隨著傷害感受器的反應(yīng)。通過(guò)檢測(cè)大鼠實(shí)驗(yàn)性牙髓炎牙髓中電壓門控鈉離子通道Nav1.7的表達(dá),探討Nav1.7的表達(dá)與牙髓炎痛覺(jué)致敏的關(guān)系,為尋找切實(shí)有效的緩解牙痛的方法提供新的思路。 方法48只大鼠隨機(jī)均分為正常對(duì)照(A)組,炎癥組：封LPS1d(B)組、3d(C)組、5d(D)組。炎癥組大鼠切牙髓腔暴露,置入脂多糖(LPS)誘導(dǎo)產(chǎn)生牙髓炎。HE染色觀察上述各組牙髓組織病理學(xué)改變,并分別采用免疫組織化學(xué)染色、ELISA和反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)等方法檢測(cè)大鼠正常牙髓和炎癥牙髓中Nav1.7的表達(dá)。 結(jié)果處理后1d組,牙髓中未見(jiàn)明顯炎癥,而處理后3d組和5d組牙髓中炎癥反應(yīng)程度逐漸上升。免疫組化結(jié)果顯示,Nav1.7在所有牙髓中均有表達(dá),處理后3d組和5d...

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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中文摘要
Abstract
1 引言
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 常用試劑
        2.1.4 主要儀器設(shè)備
        2.1.5 其他實(shí)驗(yàn)用品
        2.1.6 實(shí)驗(yàn)中的常用試劑配制
    2.2 方法
        2.2.1 動(dòng)物分組和實(shí)驗(yàn)性牙髓炎模型的建立
        2.2.2 動(dòng)物一般情況觀察
        2.2.3 心臟灌流和牙髓切片常規(guī)HE染色觀察
            2.2.3.1 心臟灌流
            2.2.3.2 牙髓切片常規(guī)HE染色觀察
        2.2.4 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)法檢測(cè)大鼠實(shí)驗(yàn)性牙髓炎模型牙髓組織中Nav1.7 蛋白的表達(dá)
            2.2.4.1 取材
            2.2.4.2 ELISA法檢測(cè)牙髓組織中Nav1.7蛋白的表達(dá)
        2.2.5 免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)大鼠實(shí)驗(yàn)性牙髓炎模型牙髓組織中Nav1.7蛋白的表達(dá)
            2.2.5.1 取材
            2.2.5.2 免疫組織化學(xué)染色
        2.2.6 大鼠實(shí)驗(yàn)性牙髓炎模型牙髓組織中Nav1.7-mRNA的相對(duì)表達(dá)量檢測(cè)
            2.2.6.1 總RNA的抽提、cDNA的逆轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增
            2.2.6.2 瓊脂糖凝膠電泳和圖像分析
        2.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
3 結(jié)果
    3.1 動(dòng)物一般情況觀察結(jié)果
    3.2 牙髓切片常規(guī)HE染色觀察結(jié)果
    3.3 Nav1.7 在大鼠實(shí)驗(yàn)性牙髓炎模型牙髓組織中的表達(dá)情況
        3.3.1 Nav1.7 ELISA結(jié)果
    3.4 Nav1.7 在大鼠實(shí)驗(yàn)性牙髓炎模型牙髓組織中的表達(dá)情況
        3.4.1 Nav1.7免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
    3.5 Nav1.7 -mRNA在大鼠實(shí)驗(yàn)性牙髓炎模型牙髓組織中的相對(duì)表達(dá)情況
        3.5.1 總RNA純度及完整性檢測(cè)
        3.5.2 RT-PCR檢測(cè)Nav1.7-mRNA的相對(duì)表達(dá)量
4 討論
    4.1 Nav1.7 與疼痛
    4.2 口頜面疼痛的傳導(dǎo)機(jī)制
    4.3 Nav1.7 與口頜面疼痛的潛在關(guān)聯(lián)
    4.4 臨床應(yīng)用前景
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3836821