目的電壓門控鈉離子通道(voltage gated sodium channel,VGSC) Nav1.7主要表達于外周神經(jīng)系統(tǒng)中,對動作電位有顯著調(diào)節(jié)作用,參與炎癥刺激和神經(jīng)損傷所致疼痛過程。支配牙髓感覺功能的神經(jīng)纖維是疼痛感受器。正常的牙髓組織對外界刺激不敏感,然而在病變狀態(tài)下,電源性、熱源性、機械性以及化學性的刺激均會伴隨著傷害感受器的反應。通過檢測大鼠實驗性牙髓炎牙髓中電壓門控鈉離子通道Nav1.7的表達,探討Nav1.7的表達與牙髓炎痛覺致敏的關系,為尋找切實有效的緩解牙痛的方法提供新的思路。 方法48只大鼠隨機均分為正常對照(A)組,炎癥組：封LPS1d(B)組、3d(C)組、5d(D)組。炎癥組大鼠切牙髓腔暴露,置入脂多糖(LPS)誘導產(chǎn)生牙髓炎。HE染色觀察上述各組牙髓組織病理學改變,并分別采用免疫組織化學染色、ELISA和反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)等方法檢測大鼠正常牙髓和炎癥牙髓中Nav1.7的表達。 結(jié)果處理后1d組,牙髓中未見明顯炎癥,而處理后3d組和5d組牙髓中炎癥反應程度逐漸上升。免疫組化結(jié)果顯示,Nav1.7在所有牙髓中均有表達,處理后3d組和5d...

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【學位級別】：碩士

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Abstract
1 引言
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 常用試劑
        2.1.4 主要儀器設備
        2.1.5 其他實驗用品
        2.1.6 實驗中的常用試劑配制
    2.2 方法
        2.2.1 動物分組和實驗性牙髓炎模型的建立
        2.2.2 動物一般情況觀察
        2.2.3 心臟灌流和牙髓切片常規(guī)HE染色觀察
            2.2.3.1 心臟灌流
            2.2.3.2 牙髓切片常規(guī)HE染色觀察
        2.2.4 酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法檢測大鼠實驗性牙髓炎模型牙髓組織中Nav1.7 蛋白的表達
            2.2.4.1 取材
            2.2.4.2 ELISA法檢測牙髓組織中Nav1.7蛋白的表達
        2.2.5 免疫組織化學染色法檢測大鼠實驗性牙髓炎模型牙髓組織中Nav1.7蛋白的表達
            2.2.5.1 取材
            2.2.5.2 免疫組織化學染色
        2.2.6 大鼠實驗性牙髓炎模型牙髓組織中Nav1.7-mRNA的相對表達量檢測
            2.2.6.1 總RNA的抽提、cDNA的逆轉(zhuǎn)錄和PCR擴增
            2.2.6.2 瓊脂糖凝膠電泳和圖像分析
        2.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
3 結(jié)果
    3.1 動物一般情況觀察結(jié)果
    3.2 牙髓切片常規(guī)HE染色觀察結(jié)果
    3.3 Nav1.7 在大鼠實驗性牙髓炎模型牙髓組織中的表達情況
        3.3.1 Nav1.7 ELISA結(jié)果
    3.4 Nav1.7 在大鼠實驗性牙髓炎模型牙髓組織中的表達情況
        3.4.1 Nav1.7免疫組織化學染色結(jié)果
    3.5 Nav1.7 -mRNA在大鼠實驗性牙髓炎模型牙髓組織中的相對表達情況
        3.5.1 總RNA純度及完整性檢測
        3.5.2 RT-PCR檢測Nav1.7-mRNA的相對表達量
4 討論
    4.1 Nav1.7 與疼痛
    4.2 口頜面疼痛的傳導機制
    4.3 Nav1.7 與口頜面疼痛的潛在關聯(lián)
    4.4 臨床應用前景
5 結(jié)論
6 參考文獻
附錄
致謝
綜述
    參考文獻



本文編號：3836821