實(shí)驗(yàn)一人成釉蛋白C端肽的原核誘導(dǎo)表達(dá)及表達(dá)條件的優(yōu)化目的:對(duì)人成釉蛋白C端肽原核表達(dá)條件進(jìn)行優(yōu)化,以獲得高表達(dá)量的AMBN-C重組蛋白。方法:1.將pET15b-AMBN-C重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞并進(jìn)行培養(yǎng);2.當(dāng)OD值達(dá)到0.6時(shí),加入誘導(dǎo)劑0.5mM IPTG,在不同溫度、時(shí)間下培養(yǎng),SDS-PAGE電泳檢測(cè)表達(dá)情況,蛋白免疫印記法分析目的蛋白的表達(dá),確定pET15b-AMBN-C重組質(zhì)粒優(yōu)化的表達(dá)條件。結(jié)果:1.將pET15b-AMBN-C重組質(zhì)粒成功轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞,對(duì)重組表達(dá)菌進(jìn)行大量培養(yǎng);2.pET15b-AMBN-C重組質(zhì)粒優(yōu)化表達(dá)條件的確定:通過(guò)分析SDS-PAGE電泳和蛋白免疫印記結(jié)果確定為當(dāng)OD值達(dá)到0.6時(shí),加入0.5mM誘導(dǎo)劑IPTG,20℃條件下培養(yǎng)16h,重組蛋白在沉淀中以包涵體的形式表達(dá)。實(shí)驗(yàn)二AMBN-C重組蛋白的大量表達(dá)、純化及鑒定目的:獲得高表達(dá)量、高純度的重組人成釉蛋白C端肽(AMBN-C)。方法:1.AMBN-C重組蛋白在加入0.5mM誘導(dǎo)劑IPTG,20℃條件下培養(yǎng)16h,以包涵體形式大量表達(dá);...

【文章頁(yè)數(shù)】：90 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
實(shí)驗(yàn)一 AMBN-C蛋白的原核誘導(dǎo)表達(dá)及表達(dá)條件的優(yōu)化
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
實(shí)驗(yàn)二 AMBN-C蛋白大量表達(dá)、純化及鑒定
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
實(shí)驗(yàn)三 AMBN-C蛋白引導(dǎo)礦化能力的研究
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
參考文獻(xiàn)
英漢縮略詞對(duì)照表
釉基質(zhì)蛋白引導(dǎo)牙釉質(zhì)仿生再礦化的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號(hào)：3823653