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人成釉蛋白C端肽的表達、純化及引導牙釉質仿生礦化能力的研究

發(fā)布時間:2023-05-27 01:41
  實驗一人成釉蛋白C端肽的原核誘導表達及表達條件的優(yōu)化目的:對人成釉蛋白C端肽原核表達條件進行優(yōu)化,以獲得高表達量的AMBN-C重組蛋白。方法:1.將pET15b-AMBN-C重組質粒轉入大腸桿菌BL21(DE3)感受態(tài)細胞并進行培養(yǎng);2.當OD值達到0.6時,加入誘導劑0.5mM IPTG,在不同溫度、時間下培養(yǎng),SDS-PAGE電泳檢測表達情況,蛋白免疫印記法分析目的蛋白的表達,確定pET15b-AMBN-C重組質粒優(yōu)化的表達條件。結果:1.將pET15b-AMBN-C重組質粒成功轉入大腸桿菌BL21(DE3)感受態(tài)細胞,對重組表達菌進行大量培養(yǎng);2.pET15b-AMBN-C重組質粒優(yōu)化表達條件的確定:通過分析SDS-PAGE電泳和蛋白免疫印記結果確定為當OD值達到0.6時,加入0.5mM誘導劑IPTG,20℃條件下培養(yǎng)16h,重組蛋白在沉淀中以包涵體的形式表達。實驗二AMBN-C重組蛋白的大量表達、純化及鑒定目的:獲得高表達量、高純度的重組人成釉蛋白C端肽(AMBN-C)。方法:1.AMBN-C重組蛋白在加入0.5mM誘導劑IPTG,20℃條件下培養(yǎng)16h,以包涵體形式大量表達;...

【文章頁數(shù)】:90 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
前言
實驗一 AMBN-C蛋白的原核誘導表達及表達條件的優(yōu)化
    材料與方法
    結果
    討論
    結論
實驗二 AMBN-C蛋白大量表達、純化及鑒定
    材料與方法
    結果
    討論
    結論
實驗三 AMBN-C蛋白引導礦化能力的研究
    材料與方法
    結果
    討論
    結論
參考文獻
英漢縮略詞對照表
釉基質蛋白引導牙釉質仿生再礦化的研究進展
    參考文獻
攻讀碩士學位期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號:3823653

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