本文關(guān)鍵詞：胰島素對(duì)高糖環(huán)境下人牙周膜成纖維細(xì)胞生物學(xué)活性影響的體外研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：通過觀察胰島素(INS)對(duì)于高糖條件下人牙周膜成纖維細(xì)胞(hPDLFs)細(xì)胞增殖及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、骨鈣素(OCN)、白介素-6(IL-6)表達(dá)水平的影響,了解牙周病在其發(fā)生發(fā)展過程中與血糖水平的關(guān)系,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞增殖和凋亡的有效調(diào)控機(jī)制,為臨床治療糖尿病伴慢性牙周病提供新臨床思路。方法：采用健康人群因正畸拔除的前磨牙體外培養(yǎng)人牙周膜成纖維細(xì)胞(hPDLFs),然后采用5.5、25、45mmol/L高糖環(huán)境和胰島素(INS)終濃度為10-6mol/L不同干預(yù)模式,分別作用體外培養(yǎng)人牙周膜成纖維細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)分為5組：A組為正常對(duì)照組(5.5 mmol/L). B組為中高糖組(25 mmol/L葡萄糖)、C組為高糖組(45mmol/L葡萄糖)、B + INS組、C + INS組。分別對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞進(jìn)行刺激和誘導(dǎo)培養(yǎng),使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)人牙周膜成纖維細(xì)胞在不同高糖濃度刺激下細(xì)胞增殖及凋亡的情況；使用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)不同高糖濃度刺激下人牙周膜成纖維細(xì)腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、白介素1β(IL-1β)、骨鈣素(OCN)、白介素-6(IL-6)的表達(dá)水平,使用SPSS 17.0軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)方差分析檢驗(yàn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果以X±S表示,p0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果：1.不同糖濃度對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖活性的影響A組正常對(duì)照組(5.5 mmol/L Glu)的結(jié)果表達(dá)顯示對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞的增殖無顯著影響B(tài)組中高糖組(25 mmol/L Glu) Glu的結(jié)果表達(dá)顯示開始出現(xiàn)濃度依賴性抑制人牙周膜成纖維細(xì)胞的增殖,細(xì)胞生長速度比正常組減慢,細(xì)胞凋亡比例增加。C組為高糖組(45mmol/L Glu)的結(jié)果表達(dá)顯示對(duì)抑制人牙周膜成纖維細(xì)胞的增殖最為顯著,細(xì)胞生長速度減慢、細(xì)胞凋亡比例顯著增加。B + INS組,中高糖組(25 mmol/L Glu)中加入胰島素后對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞細(xì)胞生長速度恢復(fù)、細(xì)胞凋亡比例顯著減少。但仍低于于正常糖濃度組。C+INS組,加入胰島素后對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞生長速度及凋亡比例有所下降,但仍顯著低于于正常糖濃度組和中糖濃度組。五組細(xì)胞對(duì)抑制人牙周膜成纖維細(xì)胞的增殖,細(xì)胞生長速度、細(xì)胞凋亡比例相互比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)2.不同糖濃度對(duì)人牙周膜細(xì)胞腫瘤壞死因子-a (TNF-a)、白介素1β (IL-1β)、骨鈣素(OCN),白介素-6(IL-6)的表達(dá)A組正常對(duì)照組(5.5 mmol/L Glu)對(duì)TNF-α、IL-1β、IL-6、OCN的表達(dá)低于中糖濃度組及高糖濃度組；對(duì)OCN的表達(dá)高于中糖濃度組及高糖濃度組。B組中高糖組(25 mmol/L Glu);對(duì)OCN的表達(dá)低于正常濃度組。C組為高糖組(45mmol/L Glu)對(duì)TNF-α、IL-1β、IL-6、OCN的表達(dá)顯著高于正常濃度組和中糖濃度組；對(duì)OCN的表達(dá)顯著低于正常濃度組和中糖濃度組。B + INS組,中高糖組(25 mmol/L Glu)加入胰島素后對(duì)‘TNF-α、IL-1β、IL-6、 OCN的表達(dá)仍高于正常濃度組；對(duì)OCN的表達(dá)升高。C + INS組,加入胰島素后對(duì)TNF-α、IL-1β、IL-6、OCN的表達(dá)顯著高于正常濃度組和中糖濃度組；對(duì)OCN的表達(dá)升高。五組細(xì)胞對(duì)TNF-α、IL-1β、IL-6、OCN的表達(dá)相互比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)結(jié)論：高糖環(huán)境可顯著抑制人牙周膜成纖維細(xì)胞的增殖、誘導(dǎo)HPDLFs凋亡,上調(diào)TNF-α、IL-1β、IL-6、OCN表達(dá)。胰島素可顯著調(diào)節(jié)糖環(huán)境誘導(dǎo)下的抑制的人牙周膜成纖維細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡和TNF-α、IL-1β、IL-6、OCN表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：人牙周膜成纖維細(xì)胞 胰島素 腫瘤壞死因子-α 白介素-6 骨鈣素 白介素-1β 細(xì)胞增殖
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R781.4;R587.1
【目錄】：

• 英文縮略詞表7-8
• 中文摘要8-10
• Abstract10-13
• 前言13-17
• 實(shí)驗(yàn)一 胰島素對(duì)高糖環(huán)境下人牙周膜成纖維細(xì)胞(hPDLFs)增殖活性的影響17-31
• 1. 實(shí)驗(yàn)對(duì)象17
• 2. 實(shí)驗(yàn)材料、儀器17-19
• 2.1 實(shí)驗(yàn)試劑17-18
• 2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備18-19
• 2.3 實(shí)驗(yàn)試劑的配制19
• 3. 實(shí)驗(yàn)方法19-23
• 3.1 實(shí)驗(yàn)分組19-20
• 3.2 酶消化結(jié)合組織塊法hPDLCs原代培養(yǎng)20
• 3.3 人牙周膜成纖維細(xì)胞(hPDLFs)的傳代培養(yǎng)接種20-21
• 3.4 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察21
• 3.5 免疫熒光染色鑒定21
• 3.6 檢測(cè)細(xì)胞生長曲線21-22
• 3.7 噻唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)22
• 3.8 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡22-23
• 3.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析23
• 4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-28
• 4.1 人牙周膜成纖維細(xì)胞(hPDLFs)形態(tài)學(xué)觀察23
• 4.2 免疫組化23-24
• 4.3 MTT法檢測(cè)人牙周膜成纖維細(xì)胞(hPDLFs)生長曲線24-25
• 4.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè)人牙周膜成纖維細(xì)胞(hPDLFs)增殖活性25-27
• 4.5 流式細(xì)胞檢測(cè)人牙周膜成纖維細(xì)胞(hPDLFs)凋亡27-28
• 5. 討論28-31
• 實(shí)驗(yàn)二 胰島素對(duì)高糖環(huán)境下人牙周膜成纖維細(xì)胞(hPDLFs)炎癥因子的表達(dá)影響31-47
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料、儀器31-32
• 1.1 實(shí)驗(yàn)試劑31-32
• 1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備32
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法32-34
• 2.1 人牙周膜成纖維細(xì)胞(hPDLCs)炎癥因子的表達(dá)33
• 2.2 酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)33-34
• 2.3 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理34
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果34-42
• 3.1 24h、48h、72h五組培養(yǎng)基對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞(hPDLFs)TNF-α的表達(dá)34-36
• 3.2 24h、48h、72h,五組培養(yǎng)基對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞(hPDLFs)IL-1β的表達(dá)36-38
• 3.3 24h、48h、72h,五組培養(yǎng)基對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞(hPDLFs)IL-6的表達(dá)38-40
• 3.4 24h、48h、72h,五組培養(yǎng)基對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞(hPDLFs)人骨鈣素的表達(dá)40-42
• 4 討論42-47
• 參考文獻(xiàn)47-53
• 文獻(xiàn)綜述53-61
• 參考文獻(xiàn)56-61
• 在讀期間發(fā)表文章61-62
• 致謝62-63

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉加強(qiáng);劉洪臣;馮元;孫斌;;胰島素在高糖環(huán)境誘發(fā)牙周膜細(xì)胞凋亡過程中的調(diào)節(jié)作用[J];口腔頜面修復(fù)學(xué)雜志;2011年01期

  本文關(guān)鍵詞：胰島素對(duì)高糖環(huán)境下人牙周膜成纖維細(xì)胞生物學(xué)活性影響的體外研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：380349