目的:口腔種植體表面形成的細(xì)菌生物膜(biofilm)易引起種植體周?chē)膊〉陌l(fā)生,最終可導(dǎo)致種植體脫落、種植失敗。種植體表面初期附著鏈球菌是生物膜形成的基礎(chǔ),因此抑制種植體表面鏈球菌的初期粘附及干擾后續(xù)生物膜形成,有利于種植初期骨結(jié)合的形成,實(shí)現(xiàn)種植體初期穩(wěn)定性。人類(lèi)β-防御素-3(human beta-defensin3,h BD-3)是一種人體產(chǎn)生的陽(yáng)離子抗菌肽,具有廣譜的抗菌性能。特異性鈦結(jié)合肽:RKLPDAGPMHTW(Ti-binding peptide-l,TBP-l)可特異性識(shí)別鈦并與其表面穩(wěn)定結(jié)合。本研究將源于h BD-3的3個(gè)片段通過(guò)3個(gè)甘氨酸(G)連接鏈與TBP-1合成3段嵌合肽(TBP-1-GGG-h BD3-1、TBP-1-GGG-h BD3-2、TBP-1-GGG-h BD3-3),既能吸附在鈦片表面又能有效地發(fā)揮抗菌作用,且不易產(chǎn)生耐藥性,實(shí)現(xiàn)步驟簡(jiǎn)單過(guò)程環(huán)保的種植體表面改性。應(yīng)用雙功能嵌合肽修飾鈦片表面,并對(duì)改性后的表面進(jìn)行性質(zhì)表征以及對(duì)體外細(xì)胞學(xué)和細(xì)菌學(xué)等效應(yīng)進(jìn)行評(píng)價(jià),以期獲得提高種植體成功率的改良種植體。方法:1.嵌合肽的基本性質(zhì)和抗菌性能的檢測(cè):通過(guò)...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、嵌合肽基本性質(zhì)和抗菌性能的檢測(cè)
    1.1 對(duì)象和方法
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.1.3 嵌合肽合成及溶液制備
        1.1.4 嵌合肽理化特性及二級(jí)結(jié)構(gòu)分析
            1.1.4.1 軟件預(yù)測(cè)
            1.1.4.2 拉曼光譜檢測(cè)
            1.1.4.3 圓二色光譜(CD)檢測(cè)
        1.1.5 嵌合肽抗菌特性的檢測(cè)
            1.1.5.1 培養(yǎng)基配制
            1.1.5.2 細(xì)菌凍干粉的復(fù)蘇及凍存
            1.1.5.3 細(xì)菌凍存液復(fù)蘇及菌懸液制備
            1.1.5.4 細(xì)菌最小抑菌濃度和最小殺菌濃度的測(cè)定
            1.1.5.5 生物膜易感性實(shí)驗(yàn)
        1.1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 嵌合肽理化特性及二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)結(jié)果
        1.2.2 圓二色光譜(CD)和拉曼光譜實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1.2.3 嵌合肽最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度實(shí)驗(yàn)(MBC)結(jié)果
        1.2.4 生物膜敏感性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、嵌合肽修飾鈦片表面抗菌性能表征
    2.1 對(duì)象和方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.3 嵌合肽修飾鈦片表面后的表征觀察
            2.1.3.1 光滑鈦片的制備
            2.1.3.2 嵌合肽修飾鈦片樣本的制備
            2.1.3.3 X射線光電子能譜分析嵌合肽修飾鈦片表面元素組成
        2.1.4 嵌合肽修飾鈦片表面后抗菌性檢測(cè)
            2.1.4.1 鏈球菌培養(yǎng)基配制
            2.1.4.2 鏈球菌菌懸液配制
            2.1.4.3 激光共聚焦電子顯微鏡實(shí)驗(yàn)
            2.1.4.4 抗菌效率(R)實(shí)驗(yàn)
            2.1.4.5 掃描電子顯微鏡(SEM)實(shí)驗(yàn)
            2.1.4.6 透射電子顯微鏡(TEM)實(shí)驗(yàn)
        2.1.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)實(shí)驗(yàn)
            2.1.5.1 RNA的提取
            2.1.5.2 瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)
            2.1.5.3 反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)
            2.1.5.4 qRT-PCR實(shí)驗(yàn)
        2.1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 嵌合肽在鈦片樣本表面的吸附情況
        2.2.2 TBP-1-GGG-hBD3-3修飾鈦片樣本抗菌性檢測(cè)結(jié)果
            2.2.2.1 激光共聚焦電子顯微鏡實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            2.2.2.2 抗菌效率(R)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            2.2.2.3 SEM和TEM結(jié)果
            2.2.2.4 TBP-1-GGG-hBD3-3對(duì)基因sspA和sspB表達(dá)的影響
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、嵌合肽體外生物相容性評(píng)價(jià)
    3.1 對(duì)象和方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.3 嵌合肽對(duì)MC3T3-E1成骨細(xì)胞毒性檢測(cè)試驗(yàn)
            3.1.3.1 MC3T3-E1成骨細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑配制
            3.1.3.2 MC3T3-E1成骨細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)及凍存
            3.1.3.3 CCK-8檢測(cè)MC3T3-E1細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
            3.1.3.4 AO/EB熒光染色
        3.1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 嵌合肽的生物相容性檢測(cè)結(jié)果
            3.2.1.1 CCK-8檢測(cè)成骨細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.2.1.2 AO/EB熒光染色實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述 抗菌肽機(jī)制的相關(guān)研究
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3794596