目的:口腔種植體表面形成的細菌生物膜(biofilm)易引起種植體周圍疾病的發(fā)生,最終可導致種植體脫落、種植失敗。種植體表面初期附著鏈球菌是生物膜形成的基礎,因此抑制種植體表面鏈球菌的初期粘附及干擾后續(xù)生物膜形成,有利于種植初期骨結(jié)合的形成,實現(xiàn)種植體初期穩(wěn)定性。人類β-防御素-3(human beta-defensin3,h BD-3)是一種人體產(chǎn)生的陽離子抗菌肽,具有廣譜的抗菌性能。特異性鈦結(jié)合肽:RKLPDAGPMHTW(Ti-binding peptide-l,TBP-l)可特異性識別鈦并與其表面穩(wěn)定結(jié)合。本研究將源于h BD-3的3個片段通過3個甘氨酸(G)連接鏈與TBP-1合成3段嵌合肽(TBP-1-GGG-h BD3-1、TBP-1-GGG-h BD3-2、TBP-1-GGG-h BD3-3),既能吸附在鈦片表面又能有效地發(fā)揮抗菌作用,且不易產(chǎn)生耐藥性,實現(xiàn)步驟簡單過程環(huán)保的種植體表面改性。應用雙功能嵌合肽修飾鈦片表面,并對改性后的表面進行性質(zhì)表征以及對體外細胞學和細菌學等效應進行評價,以期獲得提高種植體成功率的改良種植體。方法:1.嵌合肽的基本性質(zhì)和抗菌性能的檢測:通過...

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【學位級別】：博士

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中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、嵌合肽基本性質(zhì)和抗菌性能的檢測
    1.1 對象和方法
        1.1.1 實驗材料
        1.1.2 實驗儀器
        1.1.3 嵌合肽合成及溶液制備
        1.1.4 嵌合肽理化特性及二級結(jié)構(gòu)分析
            1.1.4.1 軟件預測
            1.1.4.2 拉曼光譜檢測
            1.1.4.3 圓二色光譜(CD)檢測
        1.1.5 嵌合肽抗菌特性的檢測
            1.1.5.1 培養(yǎng)基配制
            1.1.5.2 細菌凍干粉的復蘇及凍存
            1.1.5.3 細菌凍存液復蘇及菌懸液制備
            1.1.5.4 細菌最小抑菌濃度和最小殺菌濃度的測定
            1.1.5.5 生物膜易感性實驗
        1.1.6 統(tǒng)計學分析
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 嵌合肽理化特性及二級結(jié)構(gòu)預測結(jié)果
        1.2.2 圓二色光譜(CD)和拉曼光譜實驗結(jié)果
        1.2.3 嵌合肽最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度實驗(MBC)結(jié)果
        1.2.4 生物膜敏感性實驗結(jié)果
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、嵌合肽修飾鈦片表面抗菌性能表征
    2.1 對象和方法
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 實驗儀器
        2.1.3 嵌合肽修飾鈦片表面后的表征觀察
            2.1.3.1 光滑鈦片的制備
            2.1.3.2 嵌合肽修飾鈦片樣本的制備
            2.1.3.3 X射線光電子能譜分析嵌合肽修飾鈦片表面元素組成
        2.1.4 嵌合肽修飾鈦片表面后抗菌性檢測
            2.1.4.1 鏈球菌培養(yǎng)基配制
            2.1.4.2 鏈球菌菌懸液配制
            2.1.4.3 激光共聚焦電子顯微鏡實驗
            2.1.4.4 抗菌效率(R)實驗
            2.1.4.5 掃描電子顯微鏡(SEM)實驗
            2.1.4.6 透射電子顯微鏡(TEM)實驗
        2.1.5 實時熒光定量PCR(qRT-PCR)實驗
            2.1.5.1 RNA的提取
            2.1.5.2 瓊脂糖凝膠電泳實驗
            2.1.5.3 反轉(zhuǎn)錄實驗
            2.1.5.4 qRT-PCR實驗
        2.1.6 統(tǒng)計學分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 嵌合肽在鈦片樣本表面的吸附情況
        2.2.2 TBP-1-GGG-hBD3-3修飾鈦片樣本抗菌性檢測結(jié)果
            2.2.2.1 激光共聚焦電子顯微鏡實驗結(jié)果
            2.2.2.2 抗菌效率(R)實驗結(jié)果
            2.2.2.3 SEM和TEM結(jié)果
            2.2.2.4 TBP-1-GGG-hBD3-3對基因sspA和sspB表達的影響
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、嵌合肽體外生物相容性評價
    3.1 對象和方法
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 實驗儀器
        3.1.3 嵌合肽對MC3T3-E1成骨細胞毒性檢測試驗
            3.1.3.1 MC3T3-E1成骨細胞培養(yǎng)相關(guān)試劑配制
            3.1.3.2 MC3T3-E1成骨細胞復蘇、培養(yǎng)及凍存
            3.1.3.3 CCK-8檢測MC3T3-E1細胞增殖實驗
            3.1.3.4 AO/EB熒光染色
        3.1.4 統(tǒng)計學分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 嵌合肽的生物相容性檢測結(jié)果
            3.2.1.1 CCK-8檢測成骨細胞增殖實驗結(jié)果
            3.2.1.2 AO/EB熒光染色實驗結(jié)果
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 抗菌肽機制的相關(guān)研究
    綜述參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：3794596