發(fā)布時間：2017-05-19 11:14

  本文關鍵詞：周期蛋白A2對功能性下頜前伸中髁突軟骨細胞周期的調控作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:髁突是整個下頜骨的生長發(fā)育中心,其表面覆蓋的薄層纖維軟骨為其終生處于生長改建的基礎。當髁突軟骨受到功能性下頜前伸矯治力的刺激時,其可將刺激轉化成生物學信號,從而引發(fā)一系列的信號傳導通路,最后匯集到對細胞有絲分裂的調節(jié),表現(xiàn)出髁突軟骨細胞的增殖。圍繞功能矯治對髁突軟骨改建中可能的信號通路學者們進行了多方面的研究,但對信號通路進入細胞核調節(jié)細胞有絲分裂的細胞學機制還不是十分明確。近年來研究發(fā)現(xiàn)周期蛋白A2(Cyclin A2)為細胞有絲分裂的最有力刺激因子,集中定位于細胞核中,與細胞周期依賴性激酶CDK1結合后可激活底物蛋白,將組蛋白H1磷酸化導致染色體凝集,核纖層蛋白磷酸化使核膜解體等。Cyclin A2在細胞周期的G1期后期出現(xiàn),S期高表達,M期早中期后開始被降解,既可控制DNA復制啟動又可促進細胞分裂。本實驗采用組織學染色和免疫組織化學染色的方法檢測大鼠下頜前伸過程中不同時間點內髁突軟骨的組織形態(tài)學變化及髁突軟骨細胞中Cyclin A2的表達及其變化規(guī)律,研究軟骨細胞中Cyclin A2在功能矯治下頜前伸過程的作用及意義,從而為臨床上下頜后縮的骨骼矯形治療提供一定的實驗依據(jù)。方法:4周齡健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠70只,體重約90克,適應性飼養(yǎng)一周后隨機等量分為實驗組和對照組,組內按照實驗周期(1、3、7、14、21、28、35天)分為7組,每組5只,共14組。實驗組將自制的下頜前伸斜面導板矯治器用3M玻璃離子粘接劑粘固于大鼠的上前牙,并通過橡皮圈經(jīng)大鼠鼻上頜復合體與自制矯治器的兩側口外弓固位臂連接,使得自制矯治器在大鼠口腔中獲得穩(wěn)定的固位�？紤]到大鼠前后爪對矯治器的破壞和對面部組織的損傷,將大鼠四肢用醫(yī)用橡皮膏緊緊包裹,矯治器每天24小時戴用;對照組不做相應的實驗處理。所有動物均自由飲水,軟食飼養(yǎng),同環(huán)境下飼養(yǎng)至實驗結束。實驗后按1、3、7、14、21、28、35天分別取材,常規(guī)固定、脫鈣、脫水、石蠟包埋;石蠟切片后進行常規(guī)HE染色觀察髁突組織學變化;免疫組化方法(兩步法)檢測Cyclin A2蛋白的表達;采用多功能真彩色細胞圖象分析管理系統(tǒng)進行免疫組化染色評分,以IHS值表示染色強度。所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行處理,統(tǒng)計資料用x__±s表示,統(tǒng)計分析時實驗組與對照組間采用兩樣本t檢驗,組內比較采用單因素方差分析,以P0.05為差異有統(tǒng)計學意義。檢驗水準α=0.05。結果:1大體觀察大鼠戴用斜面導板矯治器后下頜處于前伸狀態(tài),上下前牙大多數(shù)處于對刃狀態(tài),個別出現(xiàn)反he,摘除矯治器后下頜不能后退。而對照組未出現(xiàn)前牙對刃,前牙覆蓋約3毫米。2髁突軟骨形態(tài)學變化鏡下可見髁突軟骨分為纖維層,增殖層,過渡層(增殖層深層),軟骨層(肥大層)和軟骨鈣化層。隨著功能矯治力的作用,實驗組大鼠髁突中后部軟骨增殖層,過渡層的細胞層數(shù)增多,細胞數(shù)目增加,與同時間點對照組軟骨厚度相比增加;到21天時髁突軟骨各層厚度逐漸趨于穩(wěn)定;第35天時可見過渡層和增殖層的厚度減小,但仍厚于對照組,軟骨層深層細胞體積增大,胞質增多,細胞核逐漸固縮與鈣化層延續(xù),軟骨內成骨活躍。對照組隨著增齡性生長,髁突軟骨各層的厚度逐漸變薄,中后部最為明顯,前部變化不明顯。3 Cyclin A2的表達水平及分布空白對照組髁突軟骨各層未見棕黃色染色顆粒。對照組Cyclin A2低水平表達一直持續(xù)到實驗結束,且主要位于軟骨層;實驗組Cyclin A2主要表達于增殖層和過渡層,陽性定位于細胞核。第1天時實驗組Cyclin A2的IHS=12.00±3.61,對照組IHS=10.33±1.53,兩組差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);第3天時實驗組中Cyclin A2表達明顯增強,IHS=70.33±28.50,對照組IHS=7.67±3.06,兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);第7天時,實驗組IHS為95.67±11.37,對照組為7.67±3.51,兩組相比統(tǒng)計學意義顯著(P0.01);第21實驗組與對照組Cyclin A2表達差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);第28、35天時實驗組與對照組Cyclin A2表達差異不具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:1 Cyclin A2參與了生長發(fā)育期大鼠功能性下頜前伸過程中髁突軟骨細胞的有絲分裂,從而促進髁突軟骨細胞的增殖。2 Cyclin A2的表達可能參與了功能矯治力-生物學信號的轉換。
【關鍵詞】：下頜功能前伸 骨改建 髁突軟骨 細胞周期 CyclinA2
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R782
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12
• 材料與方法12-17
• 結果17-20
• 附圖20-30
• 附表30-31
• 討論31-34
• 結論34-35
• 參考文獻35-38
• 綜述細胞周期蛋白A及其調控功能的研究進展38-51
• 參考文獻44-51
• 致謝51-52
• 個人簡歷52

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 孟曉紅;焦鳳娟;孟華;;Livin陽性乳腺癌中細胞周期調控相關蛋白的變化[J];臨床與實驗病理學雜志;2014年03期

  本文關鍵詞：周期蛋白A2對功能性下頜前伸中髁突軟骨細胞周期的調控作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：378537