目的：血管新生是腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的必要條件，傳統(tǒng)血管新生體外模型在模擬體內(nèi)腫瘤誘導(dǎo)血管新生過程中存在明顯不足，本研究擬以微流控芯片技術(shù)為主要手段，構(gòu)建腫瘤誘導(dǎo)血管新生體外研究模型，并在此模型上對涎腺腺樣囊性癌（Salivary Gland Adenoid Cystic Carcinoma，ACC）和頭頸部鱗狀細(xì)胞癌（Head andNeck Squamous Cell Carcinoma，HNSCC）誘導(dǎo)的血管新生進(jìn)行研究。 材料和方法：本實驗采用軟光刻技術(shù)制備微流控芯片模版，采用聚二甲基硅氧烷(Polydimethylsiloxane, PDMS)做為芯片材料灌制基片，用等離子處理PDMS基片和載玻片，實現(xiàn)基片與載玻片的不可逆封接。本實驗采用的細(xì)胞株有臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞（Human umbilical vein endothelial cell, HUVEC），ACC高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株ACC-M，舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株SCC-6，原代正常成纖維細(xì)胞（Normal Fibroblasts，NF）。采用基底膜樣物質(zhì)（Basement Membrane Extract, BME）作為細(xì)胞外基質(zhì)（Ext...

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
材料和方法
    1. 儀器和試劑
        1.1 芯片制作儀器
        1.2 細(xì)胞培養(yǎng)儀器
        1.3 芯片制作試劑
        1.4 細(xì)胞培養(yǎng)試劑
        1.5 細(xì)胞免疫熒光染色試劑
    2. 微流控芯片的制備
        2.1 SU-8 模板制作
        2.2 PDMS 芯片成型和封接
    3. 常規(guī)細(xì)胞株的培養(yǎng)
        3.1 實驗所用細(xì)胞
        3.2 培養(yǎng)方法
    4. 原代正常成纖維細(xì)胞（Normal Fibroblasts，NF）的提取和培養(yǎng)
    5. 芯片 BME 進(jìn)樣和細(xì)胞進(jìn)樣
        5.1 芯片 BME 進(jìn)樣
        5.2 芯片細(xì)胞進(jìn)樣
    6. 芯片細(xì)胞免疫熒光染色
    7. 圖像采集和數(shù)據(jù)分析
        7.1 圖像的采集
        7.2 HUVEC 細(xì)胞分化的分析
        7.3 遷移方向的分析
        7.4 遷移距離的計算
        7.5 遷移面積的計算
    8. 統(tǒng)計學(xué)分析
結(jié)果
    1. 微流控芯片的設(shè)計和模型構(gòu)建
    2. NF 誘導(dǎo)的血管新生
    3. ACC-M 誘導(dǎo)的血管新生
    4. SCC-6 誘導(dǎo)的血管新生
    5. 腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)的管腔形成
    6. 不同細(xì)胞誘導(dǎo)血管新生能力分析
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號：3784700