目的探索唑來膦酸在顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎(TMJOA)軟骨細(xì)胞增殖及凋亡的作用。方法用10 ng·mL^-1白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)誘導(dǎo)髁突軟骨細(xì)胞構(gòu)建TMJOA細(xì)胞模型,并隨機(jī)分為對照組和低、高劑量實(shí)驗組,分別用0,10和100 nmol·L^-1唑來膦酸干預(yù)培養(yǎng)。用Western Blot檢測增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)和Caspase-9蛋白的表達(dá)情況,用流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞凋亡比例;最后加入Wnt/β-catenin通路抑制劑(XAV939)與激動劑(LiCl),在顯微鏡下觀察軟骨細(xì)胞狀態(tài)變化。結(jié)果干預(yù)48 h后,對照組和低、高劑量實(shí)驗組的PCNA蛋白相對表達(dá)量分別為0.36±0.01,0.21±0.01和0.20±0.01,Caspase-3蛋白相對表達(dá)量分別為0.75±0.02,1.11±0.03和1.03±0.03,低、高劑量實(shí)驗組的上述指標(biāo)與對照組相比,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.001)。流式結(jié)果顯示,高劑量實(shí)驗組處理24和48 h后,軟骨細(xì)胞凋亡比率分別為(29.05±3.43)%...

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【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 實(shí)驗方法
        2.1 建立TMJOA體外細(xì)胞模型[5-7]
        2.2 細(xì)胞分組與給藥方法
        2.3 主要觀察指標(biāo)
            2.3.1 用RT-PCR法檢測增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)和Caspase-9基因的表達(dá)水平[8]
            2.3.2 用Western Blot法檢測PCNA和Caspase-3蛋白的表達(dá)水平[9]
        2.4 次要觀察指標(biāo)
            2.4.1 鏡下觀察給藥后TMJOA軟骨細(xì)胞形態(tài)[10]
            2.4.2 以流式細(xì)胞技術(shù)測定細(xì)胞凋亡率[9]
            2.4.3 鏡下觀察給予Wnt信號通路抑制藥后TMJOA軟骨細(xì)胞形態(tài)改變[8]
    3 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié) 果
    1 10 ng·mL-1 IL-1β誘導(dǎo)6 h可成功構(gòu)建TMJOA細(xì)胞模型
    2 唑來膦酸抑制TMJOA軟骨細(xì)胞增殖和促進(jìn)凋亡
    3 唑來膦酸促進(jìn)TMJOA軟骨細(xì)胞凋亡
    4 唑來膦酸對TMJOA軟骨細(xì)胞狀態(tài)影響
    5 Wnt/β-catenin通路對唑來膦酸作用TMJOA軟骨細(xì)胞狀態(tài)的影響
討 論



本文編號：3741999