目的探索miR-200a在TGF-β誘導(dǎo)口腔黏膜修復(fù)過程中表達(dá)水平的變化和功能。方法分離培養(yǎng)原代人牙齦成纖維細(xì)胞（Human Gingival Fibroblast,HGF）,加入不同濃度TGF-β,實(shí)時熒光定量PCR檢測miR-200表達(dá)水平的變化。通過轉(zhuǎn)染miR-200a模擬物增加miR-200a表達(dá)水平,利用Transwell實(shí)驗檢測細(xì)胞遷移能力,利用CCK-8實(shí)驗檢測細(xì)胞增殖活性,利用蛋白質(zhì)免疫印跡實(shí)驗檢測細(xì)胞Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原表達(dá)水平。結(jié)果 TGF-β處理會引起HGF細(xì)胞miR-200a表達(dá)水平下降,且隨著TGF-β作用濃度增加,miR-200a表達(dá)下降比例增加;與對照組相比,轉(zhuǎn)染miR-200a模擬物的實(shí)驗組miR-200a表達(dá)水平上升,細(xì)胞增殖活性下降,遷移到Transwell下層小室的細(xì)胞數(shù)目降低,Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白表達(dá)水平下降。結(jié)論 miR-200a在TGF-β誘導(dǎo)口腔黏膜修復(fù)過程中可以抑制HGF的增殖活性、遷移能力和Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白的表達(dá),進(jìn)而影響口腔黏膜的修復(fù)和重建。 

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 實(shí)驗試劑及儀器
    1.2 健康牙齦標(biāo)本采集及原代HGF培養(yǎng)
    1.3 細(xì)胞總RNA提取
    1.4 實(shí)時熒光定量PCR
    1.5 實(shí)驗分組及細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    1.6 Transwell細(xì)胞遷移實(shí)驗
    1.7 CCK-8檢測細(xì)胞增殖
    1.8 蛋白質(zhì)免疫印跡實(shí)驗
    1.9 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 不同濃度TGF-β對HGF中miR-200a表達(dá)的影響
    2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染對HGF中miR-200a表達(dá)水平的影響
    2.3 過表達(dá)miR-200a對HGF增殖活性的影響
    2.4 過表達(dá)miR-200a對HGF遷移能力的影響
    2.5 過表達(dá)miR-200a對HGF中Ⅰ型和Ⅲ型膠原表達(dá)的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miR-2053在口腔黏膜修復(fù)中對成纖維細(xì)胞的影響及其機(jī)制研究[J]. 余美嬋,陳凱炎,劉思源.  組織工程與重建外科雜志. 2019(05)



本文編號：3694010