目的探索miR-200a在TGF-β誘導口腔黏膜修復過程中表達水平的變化和功能。方法分離培養(yǎng)原代人牙齦成纖維細胞（Human Gingival Fibroblast,HGF）,加入不同濃度TGF-β,實時熒光定量PCR檢測miR-200表達水平的變化。通過轉染miR-200a模擬物增加miR-200a表達水平,利用Transwell實驗檢測細胞遷移能力,利用CCK-8實驗檢測細胞增殖活性,利用蛋白質免疫印跡實驗檢測細胞Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原表達水平。結果 TGF-β處理會引起HGF細胞miR-200a表達水平下降,且隨著TGF-β作用濃度增加,miR-200a表達下降比例增加;與對照組相比,轉染miR-200a模擬物的實驗組miR-200a表達水平上升,細胞增殖活性下降,遷移到Transwell下層小室的細胞數(shù)目降低,Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白表達水平下降。結論 miR-200a在TGF-β誘導口腔黏膜修復過程中可以抑制HGF的增殖活性、遷移能力和Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白的表達,進而影響口腔黏膜的修復和重建。 

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 實驗試劑及儀器
    1.2 健康牙齦標本采集及原代HGF培養(yǎng)
    1.3 細胞總RNA提取
    1.4 實時熒光定量PCR
    1.5 實驗分組及細胞轉染
    1.6 Transwell細胞遷移實驗
    1.7 CCK-8檢測細胞增殖
    1.8 蛋白質免疫印跡實驗
    1.9 統(tǒng)計學方法
2 結果
    2.1 不同濃度TGF-β對HGF中miR-200a表達的影響
    2.2 細胞轉染對HGF中miR-200a表達水平的影響
    2.3 過表達miR-200a對HGF增殖活性的影響
    2.4 過表達miR-200a對HGF遷移能力的影響
    2.5 過表達miR-200a對HGF中Ⅰ型和Ⅲ型膠原表達的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]miR-2053在口腔黏膜修復中對成纖維細胞的影響及其機制研究[J]. 余美嬋,陳凱炎,劉思源.  組織工程與重建外科雜志. 2019(05)



本文編號：3694010