低強度脈沖超聲波抑制髁突軟骨下骨TGF-β1/Smad3通路改善顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎的研究
發(fā)布時間:2022-08-10 18:26
目的:顳下頜關(guān)節(jié)紊亂。╰emporomandibular disorder,TMD)是口腔臨床的常見病和多發(fā)病。顳下頜關(guān)節(jié)(temporomandibular joint,TMJ)骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthrits,OA)是TMD最嚴重的類型,發(fā)病率較高,可引起患者關(guān)節(jié)區(qū)疼痛、摩擦音、開口受限、下頜運動障礙、面部畸形等,嚴重影響患者的生活質(zhì)量。它是一種關(guān)節(jié)退行性疾病,主要病理特征為漸進性髁突軟骨退變,并伴有滑膜和軟骨下骨改變。TMJOA的病因非常復雜,炎癥和軟骨下骨異常重塑被認為是該疾病最重要的致病因素。近年來,雖然國內(nèi)外學者對TMJOA的病因進行了廣泛的研究,但尚無有效的治療方法可以預(yù)防,阻止,或延遲該疾病的進展。治療TMJOA,最理想的方法是改善關(guān)節(jié)腔炎癥狀態(tài),阻斷髁突軟骨破壞,促進髁突軟骨及軟骨下組織的再生。目前TMJOA的治療方法包括手術(shù)和非手術(shù)治療。非手術(shù)治療是最常用的治療方法,包括藥物治療、物理治療和咬合夾板等。大多數(shù)情況下,這些療法能夠比較有效的緩解癥狀,但是遠期觀察來看,對于關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)的病理療效并不理想。長期以來OA被認為是一種以關(guān)節(jié)軟骨損傷為主的疾病,然而軟骨下骨的...
【文章頁數(shù)】:99 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 IL-1β誘導成骨細胞炎性效應(yīng)對TGF-β1/Smad3通路的影響
1 前言
2 材料與方法
2.1 試劑和儀器
2.1.1 細胞來源
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器設(shè)備
2.2 實驗方法
2.2.1 主要試劑制備
2.2.2 細胞培養(yǎng)
2.2.3 細胞分組處理
2.2.4 酶聯(lián)免疫吸附測定法
2.2.5 熒光定量PCR法
2.2.6 免疫熒光染色法
2.2.7 免疫印跡法
2.3 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果
3.1 IL-1β誘導對細胞分泌IL-6水平的影響
3.2 IL-1β誘導對細胞MMP-13、TGFβ1、Smad3 mRNA相對表達水平的影響
3.3 IL-1β誘導對細胞核pSmad3 熒光表達的影響
3.4 IL-1β誘導對細胞TGF-β1/Smad3 通路的影響
4 討論
5 結(jié)論
第二部分 低強度脈沖超聲波通過TGF-β1/Smad3 通路調(diào)控炎性效應(yīng)的作用研究
1 前言
2 材料與方法
2.1 試劑和儀器
2.1.1 細胞來源
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器設(shè)備
2.2 實驗方法
2.2.1 細胞培養(yǎng)
2.2.2 si-TβRII的轉(zhuǎn)染及效率檢測
2.2.3 激動劑(SRI-011381)對TGF-β1/Smad3 通路的作用
2.2.4 細胞分組處理
2.2.5 LIPUS刺激
2.2.6 ELISA法
2.2.7 QPCR法
2.2.8 Western blotting法
2.3 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果
3.1 si-TβRII轉(zhuǎn)染效率
3.2 激動劑(SRI-011381)對TGF-β1/Smad3 信號通路的作用
3.3 細胞培養(yǎng)上清中IL-6的表達水平
3.4 LIPUS對 IL-1β誘導下細胞MMP-13、TGF-β1、Smad3 mRNA表達水平的影響
3.5 LIPUS對 IL-1β誘導下細胞TGF-β1、pSmad3 蛋白表達水平的影響
3.6 LIPUS對 IL-1β誘導下轉(zhuǎn)染細胞TGF-β1、Smad3、pSmad3 蛋白表達水平的影響
4 討論
5 結(jié)論
第三部分 低強度脈沖超聲波對兔顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎髁突軟骨下骨改建和TGF-β1/Smad3 通路的影響
1 前言
2 材料與方法
2.1 試劑和儀器
2.1.1 實驗動物
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器設(shè)備
2.2 實驗方法
2.2.1 主要試劑制備
2.2.2 實驗分組和兔TMJOA模型的建立
2.2.3 LIPUS治療
2.2.4 操作方法
2.2.5 處死與取材
2.2.6 Micro-CT掃描
2.2.7 組織切片制備
2.2.8 番紅O染色
2.2.9 TRAP染色
2.2.10 免疫組織化學染色
2.2.11 Western blotting法
2.3 數(shù)據(jù)處理
3 實驗結(jié)果
3.1 Micro-CT
3.2 番紅O染色
3.3 TRAP染色
3.4 免疫組織化學染色
3.5 Western blotting
4 討論
5 結(jié)論
本論文創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷
本文編號:3674133
【文章頁數(shù)】:99 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 IL-1β誘導成骨細胞炎性效應(yīng)對TGF-β1/Smad3通路的影響
1 前言
2 材料與方法
2.1 試劑和儀器
2.1.1 細胞來源
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器設(shè)備
2.2 實驗方法
2.2.1 主要試劑制備
2.2.2 細胞培養(yǎng)
2.2.3 細胞分組處理
2.2.4 酶聯(lián)免疫吸附測定法
2.2.5 熒光定量PCR法
2.2.6 免疫熒光染色法
2.2.7 免疫印跡法
2.3 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果
3.1 IL-1β誘導對細胞分泌IL-6水平的影響
3.2 IL-1β誘導對細胞MMP-13、TGFβ1、Smad3 mRNA相對表達水平的影響
3.3 IL-1β誘導對細胞核pSmad3 熒光表達的影響
3.4 IL-1β誘導對細胞TGF-β1/Smad3 通路的影響
4 討論
5 結(jié)論
第二部分 低強度脈沖超聲波通過TGF-β1/Smad3 通路調(diào)控炎性效應(yīng)的作用研究
1 前言
2 材料與方法
2.1 試劑和儀器
2.1.1 細胞來源
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器設(shè)備
2.2 實驗方法
2.2.1 細胞培養(yǎng)
2.2.2 si-TβRII的轉(zhuǎn)染及效率檢測
2.2.3 激動劑(SRI-011381)對TGF-β1/Smad3 通路的作用
2.2.4 細胞分組處理
2.2.5 LIPUS刺激
2.2.6 ELISA法
2.2.7 QPCR法
2.2.8 Western blotting法
2.3 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果
3.1 si-TβRII轉(zhuǎn)染效率
3.2 激動劑(SRI-011381)對TGF-β1/Smad3 信號通路的作用
3.3 細胞培養(yǎng)上清中IL-6的表達水平
3.4 LIPUS對 IL-1β誘導下細胞MMP-13、TGF-β1、Smad3 mRNA表達水平的影響
3.5 LIPUS對 IL-1β誘導下細胞TGF-β1、pSmad3 蛋白表達水平的影響
3.6 LIPUS對 IL-1β誘導下轉(zhuǎn)染細胞TGF-β1、Smad3、pSmad3 蛋白表達水平的影響
4 討論
5 結(jié)論
第三部分 低強度脈沖超聲波對兔顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎髁突軟骨下骨改建和TGF-β1/Smad3 通路的影響
1 前言
2 材料與方法
2.1 試劑和儀器
2.1.1 實驗動物
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器設(shè)備
2.2 實驗方法
2.2.1 主要試劑制備
2.2.2 實驗分組和兔TMJOA模型的建立
2.2.3 LIPUS治療
2.2.4 操作方法
2.2.5 處死與取材
2.2.6 Micro-CT掃描
2.2.7 組織切片制備
2.2.8 番紅O染色
2.2.9 TRAP染色
2.2.10 免疫組織化學染色
2.2.11 Western blotting法
2.3 數(shù)據(jù)處理
3 實驗結(jié)果
3.1 Micro-CT
3.2 番紅O染色
3.3 TRAP染色
3.4 免疫組織化學染色
3.5 Western blotting
4 討論
5 結(jié)論
本論文創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷
本文編號:3674133
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