目的人乳頭狀瘤病毒（human papilloma virus, HPV）是嚴(yán)格的嗜上皮病毒。人是其唯一的宿主。HPV不但和女性宮頸良、惡性腫瘤有直接聯(lián)系,還常導(dǎo)致口腔粘膜、食道、咽喉、氣管和結(jié)膜等部位的病變。該病毒的高危亞型還往往和鱗狀上皮細(xì)胞的惡變密切相關(guān)。E5一般存在于高危型HPV,在導(dǎo)致良性腫瘤的低危型HPV中經(jīng)常缺省,這一特點(diǎn)可能和高危型HPV的致癌作用具有潛在聯(lián)系。目前有關(guān)HPV的研究大都圍繞HPV的癌基因E6、E7展開,而鮮有針對E5基因的研究報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建了E5真核表達(dá)載體成功轉(zhuǎn)染人口腔上皮細(xì)胞,并對上皮細(xì)胞相關(guān)生物學(xué)特性進(jìn)行了初步分析,研究結(jié)果將為深入研究E5基因功能奠定基礎(chǔ)。方法①E5基因的PCR擴(kuò)增與克隆：通過比較高危型HPV全序列,在E5的上下游保守區(qū)設(shè)計(jì)一對引物（分別含有BamHI，HindⅢ阝艱制性酶切位點(diǎn)）,PCR反應(yīng),回收純化產(chǎn)物,獲得帶有酶切位點(diǎn)的E5基因片段,序列分析；將HPV16 E5連接到質(zhì)粒pGEM-T,構(gòu)建質(zhì)粒pGEM-T-E5,雙酶切,測序鑒定。②真核表達(dá)載體的構(gòu)建：設(shè)計(jì)帶有一對酶切位點(diǎn)（HindⅢ, BamHⅠ）的HPV E5引物,分別... 

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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目錄
英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
正文
    前言
    第一部分
        1 引言
        2 材料與方法
        3 結(jié)果
        4 討論
    第二部分
        1 引言
        2 材料與方法
        3 結(jié)果
        4 討論
    第三部分
        1 引言
        2 材料與方法
        3 結(jié)果
        4 討論
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述及其參考文獻(xiàn)



本文編號：3669530